1 час, используя последний эякулят как достоверный для анализа.
Для облегчения процедуры комплексная оценка спермы должна проводиться 2—3 раза за случной сезон и обычно включать следующие тесты:
-
объем спермы без семенной жидкости;
-
объем семенной жидкости;
-
цвет;
-
определениерН;
-
подвижность и поступательные движения; — продолжителъность и характер движения; — концентрация и количество сперматозоидов;
-
морфология;
-
цитология;
-
бактериология,
Ежедневная оценка при искусственном осеменении заключается в объеме, концентрации и подвижности спермы. Физиологические характеристики эякулята, включая объем, цвет, РН, подвижность и концентрацию, должны исследоваться сразу после отбора.
Объем
В норме составляет 60—80 мл, однако, может быть OT 10 до 300 мл. Собственно объем не столь важен для плодовитости, но его точное определение важно для дальнейшего подсчета общего количества сперматозоидов в эякуляте. Чтобы можно было подсчитать количество доз, получившихся из эякулята для осеменения, свежая сперма сначала фильтруется, чтобы отделить от эякулята семенную жидкость, смегму, грязь и волос.
Цвет
У нормального эякулята варьирует от водянисто-серого до кремового, в зависимости от концентрации спермы. Белый цвет свидетельствует о высококонцентрированном эякуляте, тогда как эякулят менее концентрированный сероватобелый или серый. Ненормальный цветсвидетельствует о сме-
Скрипка В. Применение УЗИ-диагностики.. ____
шивании с кровью или мочой. Розовый или красноватый цвет свидетельствует о смешиваниис кровью. Наличие мочи определяют по наличию желтоватого цвета или запаха аммиака.
РН
Должен определяться как можно скорее после отбора, так как метаболическая активность сперматозоидов повышает РН. Нормальный рН спермы 7,2—7,6.
Подвижность сперматозоидов и поступательные движения
Должны оцениваться как можно скорее, так как снижаются со временем. Контрастная микроскопия хорошего качества с подогревающим столиком (+ 37 °С) должна применяться для оценки подвижности. Исследуют сперму при увеличениив 200—300 раз.
Если оценивается подвижность спермы, которая была разбавлена и охлаждена, то перед этим ее нужно подогреть для объективной оценки подвижности. На Западе существуют фирмы, которые производят разбавители для спермы, в нашей стране пока это не налажено, поэтому приходится их готовить самостоятельно. К пробе добавляется разбавитель, и подвижность оценивается вновь в разбавленной сперме. Готовые импортные разбавители применимы для большинства эякулятов, для хранения свежей и замороженной спермы. Уровень разбавления зависит от первоначальной концентрации, конечная концентрация для осеменения должна составлять не ниже 100 млн/мл. В практике объем разбавителя должен составлять 2—4 к одному объему спермы. Достаточно большая капля разбавленной спермы помещается на подогретое до - 37 °С предметное стекло и накрывается предварительно подогретым покрывным стеклом. Подвижность и поступательное движение оцениваются в 5 полях зрения при 200-кратном увеличении. Важнотакже судить о характере движения, так как движения по окружности не свидетельствуют о хорошем качестве.
14
Подготовка к случной компании...
Общая подвижность = процентная часть сперматозоидов, которые двигаются (в идеале 70—80%). Поступательное движение = процентная часть сперматозоидов, двигающихся вперед поперек поля зрения по относительно прямому направлению (в идеале — 60—70%). Определение подвижности и поступательного движения субъективно, поэтому желательно проводить одним и тем же исследователем. Оно требует большого опыта исследователя.
Подвижность сперматозоидов в практике рассматривается как мера жизнеспособности спермы, особенно при исследовании охлажденной и оттаиваемой после глубокого замораживания спермы. Жеребцы с хорошей подвижностью и продолжительностью движения обеспечивают лучшую оплодотворяемость при осеменении. Несмотря на субъективность оценки, сперма с ограниченной подвижностью мало пригодна для оплодотворения.
Продолжительность движения сперматозоидов Порции отфильтрованной спермы (нативной или разбавленной) должны сохраняться в герметичных условиях, втемноте при комнатной температуре +20—25 °С. По меньшей мере 10% сперматозоидов должны двигаться поступательно через 6 часов в нативной — свежей, неразбавленной сперме и через 24 часа — в разбавленной. При разбавлении и охлаждении спермы до температуры +2—5 °C исследования на продолжительность движений проводят через 48 часов, предварительно подогрев сперму втечение 15—20 минут до температуры +20—25 °С. При этом подвижность должна составлять не менее 10—15%.
Количество и концентрация сперматозоидов Точно определяется с применением фотомстра SpermaCue фирмы Minitube с подсчитывающим устройством. Хотя этот метод довольно точен, когда выполняется правильно, он очень быстрый, но относительно дорогой. Также можно подсчитать количество сперматозоидов камерой Горясва.
15
,
