Скрипка В. Применение УЗИ-диагностики.. ____
шивании с кровью или мочой. Розовый или красноватый цвет свидетельствует о смешиваниис кровью. Наличие мочи определяют по наличию желтоватого цвета или запаха аммиака.
РН
Должен определяться как можно скорее после отбора, так как метаболическая активность сперматозоидов повышает РН. Нормальный рН спермы 7,2—7,6.
Подвижность сперматозоидов и поступательные движения
Должны оцениваться как можно скорее, так как снижаются со временем. Контрастная микроскопия хорошего качества с подогревающим столиком (+ 37 °С) должна применяться для оценки подвижности. Исследуют сперму при увеличениив 200—300 раз.
Если оценивается подвижность спермы, которая была разбавлена и охлаждена, то перед этим ее нужно подогреть для объективной оценки подвижности. На Западе существуют фирмы, которые производят разбавители для спермы, в нашей стране пока это не налажено, поэтому приходится их готовить самостоятельно. К пробе добавляется разбавитель, и подвижность оценивается вновь в разбавленной сперме. Готовые импортные разбавители применимы для большинства эякулятов, для хранения свежей и замороженной спермы. Уровень разбавления зависит от первоначальной концентрации, конечная концентрация для осеменения должна составлять не ниже 100 млн/мл. В практике объем разбавителя должен составлять 2—4 к одному объему спермы. Достаточно большая капля разбавленной спермы помещается на подогретое до - 37 °С предметное стекло и накрывается предварительно подогретым покрывным стеклом. Подвижность и поступательное движение оцениваются в 5 полях зрения при 200-кратном увеличении. Важнотакже судить о характере движения, так как движения по окружности не свидетельствуют о хорошем качестве.
14
Подготовка к случной компании...
Общая подвижность = процентная часть сперматозоидов, которые двигаются (в идеале 70—80%). Поступательное движение = процентная часть сперматозоидов, двигающихся вперед поперек поля зрения по относительно прямому направлению (в идеале — 60—70%). Определение подвижности и поступательного движения субъективно, поэтому желательно проводить одним и тем же исследователем. Оно требует большого опыта исследователя.
Подвижность сперматозоидов в практике рассматривается как мера жизнеспособности спермы, особенно при исследовании охлажденной и оттаиваемой после глубокого замораживания спермы. Жеребцы с хорошей подвижностью и продолжительностью движения обеспечивают лучшую оплодотворяемость при осеменении. Несмотря на субъективность оценки, сперма с ограниченной подвижностью мало пригодна для оплодотворения.
Продолжительность движения сперматозоидов Порции отфильтрованной спермы (нативной или разбавленной) должны сохраняться в герметичных условиях, втемноте при комнатной температуре +20—25 °С. По меньшей мере 10% сперматозоидов должны двигаться поступательно через 6 часов в нативной — свежей, неразбавленной сперме и через 24 часа — в разбавленной. При разбавлении и охлаждении спермы до температуры +2—5 °C исследования на продолжительность движений проводят через 48 часов, предварительно подогрев сперму втечение 15—20 минут до температуры +20—25 °С. При этом подвижность должна составлять не менее 10—15%.
Количество и концентрация сперматозоидов Точно определяется с применением фотомстра SpermaCue фирмы Minitube с подсчитывающим устройством. Хотя этот метод довольно точен, когда выполняется правильно, он очень быстрый, но относительно дорогой. Также можно подсчитать количество сперматозоидов камерой Горясва.
15
,
Скрипка В. Применение УЗИ-диагностики...
Нормальный жеребец производит 100—800 миллионов сперматозоидов в | миллилитре.
Морфология сперматозоидов Морфология и подвижность спермы жеребна, , как правило,мы и общее не изменяются количество в зависимости увеличиваются от сезона, весной но и объем летомсперМорфология сперматозоидов жеребца исследуется во влажных в формол-забуференных препаратах методом фазоконтрастной микроскопии в 1000-кратном увеличении под иммерсией. Визуализация деталей строения достигаетca фиксацией препарата и окрашиванием специальным красителем (нигрозин-эозиновый). Краситель, содержащий эозин, может проходить через поврежденные мембранны, применивно не через miaинтактные, иффербициацииоипоэтому этот иныхметод и мертвыхможно сперма-также тозоидов. В идеале должно быть 80% живых сперматозоидов При оценке морфологии сперматозоидов следует ссылаться на стандарт. Поскольку встречается много разновидностей морфологических аномалий, 5 они классифицируются по специфическим особенностям: нормальные сперматозоиды, патологическая головка, отделенная головка, проксимальное утолщение, . дистальное утолщение, ‚ аномалии среднего участка, аномалии хвоста. Морфологические аномалии распределяются на первичные — возникают в семенниках — и вторичные — возникают в выводящих пуTAX при хранениии эякуляции. Связь между аномалиями сперматозоидов и снижением плодовитости не установлена. Отклонение среднего участка от продольной оси сперматозоида допускается. В идеале должно быть 70% нормальных сперматозоилов.
Цитология и бактериология
Проводится в редких случаях при необходимостии по показаниям. Используют мазки на предметных стеклах и окрашивания метиленовым синим для выявления белых и крас-
