Покрытие и искусственное осеменение кобыл...
размером — длина 30—40 см, ширина 20—30 см, высота 15— 25 см, разлеленную на три отсека. В средний отсек кладется сперма, набранная в шприцы, а по бокам — лед в пластмассовой упаковке. Толщена двух внутренних перегородок должна быть в пределах 1,5—2,5 см, а толщина наружных стенок кожет сохраняться и транспортироваться недолго — 2—5 часов , робки должна составлять 4—5 см. Таким способом сперма мо` степеннотает(взависимости и температур от окруж а ющейвнутри температуры), таккоробки начинаетподниматькак лед по - ся. Для более длительной транспортировки можно оборудовать такимбиля.бильноСпермаже поддерживатьсяспособомавтомобильный некоторыхтемпература жеребцов холодильник, хорошоOT бортовой транспортируется гдесетибуде ав т омоста - охлажденной, тогда как других — нет (причина не известна). В последнее время установлено, что при хранении охлажденной спермы происходит склеивание сперматозоидов, что пагубно сказывается. Часть из них теряет свои оплодотворялючющиеохлном а приборе,етсяжденнойспособности. B TOM, которсперм что сперму ы Былайнем оч е разработанань медлецкойхранят фирм н анспециально о ,й постояннотехнологияMinitube. разработСутьее еехранения вращзак а нет - как в вертикальном, так и вгоризонтальном положении. Прибор «качающаяся волна» (Rolling Mixer RR) способствует равномерному охлаждению спермы и может быть использован при хранении охлажденной спермы в бытовом холодильнике, атакже при комнатной температуре. В практике мирового коневодства существует несколько технологий замораживания спермы жеребца. Одна изтехно. логий разработана во ВНИИ коневодства России, где применяется технология замораживания в виде гранул на поверхности сухого льда или валюминиевых пакетах в холодном газе пейских странах, roe сперму замораживают в микро- (4 и над жидким азотом. Другая технология применяется в Евро5(0,25 мл, старая и 0,5 мл) технология пакетах. практически не используется) и макро-
Технология замораживания спермы, разработанная ВНИИ коневодства России предусматривает оценку по подвижнос-
47 |
ти и концентрации спермы. После чего сперму разбавляют лактозо-хелато-цитратно-желточной средой (ЛХЦЖ) в соотношении 1:3 с добавлением 3,5 мл глицерина на 100 мл разбавителя. Разбавленную сперму охлаждают до +2—5 °С втечение 2 часов, после чего замораживаютв виде гранул на поверхности сухого льда либо в алюминиевых пакетах в холодном газе над жидким азотом. При замораживании в виде гранул сперму наносят каплями по 0,2 мл влунки на поверхности сухого льда. Через 5 минут после замораживания гранулы собирают и упаковывают валюминиевые пакеты по 125—130 гранул, что соответствует 25 мл, и помещают на хранение в жидкий азот.
При замораживании спермы в охлажденном Газе над жидким азотом ее предварительно разливают в охлажденные алюминиевые пакеты по 25 мл. Для изготовления пакета у стандартной трубы №16 (алюминий A-7) отрезают торцовую часть с пробкой и один конец полученной таким образом трубки закатывают дважды. Заполненный спермой пакет закрывают, дважды закатывая другой конец трубки. После упаковки пакет должен иметь размеры, мм: длина 120—125, ширина 45, толщина 4—5. При заполнении пакета спермой и его упаковке необходимо строго следить за тем, чтобы в нем не остался воздух, иначе при оттаивании неизбежны разрывы пакета. Алюминиевые пакеты должны быть маркированы кличкой жеребца и датой замораживания. Пакеты, заполненные подготовленной к замораживанию спермой, помещают в держатели, которые вместе с поплавком переносят на поверхность жидкого азота. Испаритель опускают в жидкий азот, и контейнер закрывают крышкой, расстояние от пакетов до жидкого азота |—2 см. Через 5 минут пакеты с замороженной спермой переносят вбиохранилище с жидким азотом на хранение.
Через 24 часа после замораживания оттаивают несколько гранул или один пакет из каждого эякулята и проверяют подвижность спермиев. Для дальнейшего хранения и использования допускают сперму подвижностью не ниже двух баллов.
Покрытие и искусственное осеменение кобыл... scree Er rr об ан винить Европейская технология замораживания спермы жеребца включает в себя:
-
Разведение эякулята.
-
Центрифугирование.
-
Извлечение супернатанта и добавление специального разбавителя, содержащего криопротектанты. 4. Упаковка, замораживание и оценка качества спермы после оттаивания. Для каждого из этих этапов существует значительное количество модификаций, которые также используются.
Цельный свежеполученный эякулят разбавляется 1:] разбавителем Kenny, Tak его можно транспортировать до лаборатории для замораживания несколько часов. После чего все содержимое разделяют на две равные части и центрифугируют 10 минут со скоростью 1600—1800 об/мин. Как только центрифугирование завершено, супернатант извлекается, а осадок разбавляется разбавителем такой пропорции:
-
Лактоза 11% 50 мл.
-
Раствор глюкозы/ЕОТА* 25 мл.
-
Желток 20 мл.
-
Паста EQUEX (детергент) 0,5 мл.
*Раствор глюкозы/ЕОТА готовят на стерильной дистиллированной воде. До 100 мл такой воды добавляют нижеперечисленные компоненты. Воду осторожно нагревают, помешивая для лучшего растворения солей. После растворения солей и остывания добавляют 0,08 г пенициллинаи 0,08 г стрептомицина сульфата. Хранят этот раствор при температуре +4°С. Изымают изобрашения, если не использовали втечение7 дней.
Глюкоза 6 г
Ма цитрат дегидрированный 0,37 г
Na EDTA 0.37 г Na бикарбонат 0,12 г
Центрифугируют при 1700 оборотах 20 минут, добавляют 5млглицерина. Хранят при +4 °С, если не используют втечение 6 часов — изымают. Если глицерин не добавлен, разбавитель должен храниться в морозилке при -18 °С. В таких случаях глицерин должен добавляться после оттаивания разбавителя.
