Покрытие и искусственное осеменение кобыл... scree Er rr об ан винить Европейская технология замораживания спермы жеребца включает в себя:
-
Разведение эякулята.
-
Центрифугирование.
-
Извлечение супернатанта и добавление специального разбавителя, содержащего криопротектанты. 4. Упаковка, замораживание и оценка качества спермы после оттаивания. Для каждого из этих этапов существует значительное количество модификаций, которые также используются.
Цельный свежеполученный эякулят разбавляется 1:] разбавителем Kenny, Tak его можно транспортировать до лаборатории для замораживания несколько часов. После чего все содержимое разделяют на две равные части и центрифугируют 10 минут со скоростью 1600—1800 об/мин. Как только центрифугирование завершено, супернатант извлекается, а осадок разбавляется разбавителем такой пропорции:
-
Лактоза 11% 50 мл.
-
Раствор глюкозы/ЕОТА* 25 мл.
-
Желток 20 мл.
-
Паста EQUEX (детергент) 0,5 мл.
*Раствор глюкозы/ЕОТА готовят на стерильной дистиллированной воде. До 100 мл такой воды добавляют нижеперечисленные компоненты. Воду осторожно нагревают, помешивая для лучшего растворения солей. После растворения солей и остывания добавляют 0,08 г пенициллинаи 0,08 г стрептомицина сульфата. Хранят этот раствор при температуре +4°С. Изымают изобрашения, если не использовали втечение7 дней.
Глюкоза 6 г
Ма цитрат дегидрированный 0,37 г
Na EDTA 0.37 г Na бикарбонат 0,12 г
Центрифугируют при 1700 оборотах 20 минут, добавляют 5млглицерина. Хранят при +4 °С, если не используют втечение 6 часов — изымают. Если глицерин не добавлен, разбавитель должен храниться в морозилке при -18 °С. В таких случаях глицерин должен добавляться после оттаивания разбавителя.
Скрипка
В. Применение УЗИ-диагностики... ______
Сперма, разбавленная таким составом, не нуждается вуравновешивании рН и немедленно упаковывается при комнатной температуре. Обычно используют 0,5 мл поливинилхлоридные капилляры — соломинки. Они замораживаются в парах жидкого азота в специальном фиксаторе, поддерживающемся на расстоянии 3—7 см выше поверхности жидкого азота, при температуре около -165 °С. Оставляют капилляры на держателе на 5 минут. Затем погружают в жидкий азот. Это пропись для 0,5 мл капилляров, содержаших 200 млн сперматозоидов в капилляре. Четыре капилляра используются на 1 дозу осеменения, если после оттаивания имеют 30% подвижных сперматозоидов.
Предсказание овуляции
Во многих случаях кобылы, предназначенные для программы ИО, содержатся в условиях конюшен, где нетопытного специалиста, который Mor бы правильно предсказать овуляцию. Предсказание овуляции He так-то просто и требует принять BO внимание наличие УЗИ. Комбинируя каждодневную ректальную и вагинальную пальпацию с применением УЗИ, опытный специалист, как правило, проводит довольно точное предсказание срока наступления овуляции. Размер фолликула, его преовуляторное смягчение, изменение формы и уголшение фолликулярной стенки, и направление отечности матки — все это нужно для предсказания овуляции. Однакоу некоторых кобыл фолликулярная фаза начинается с размером фолликула около 3 см и занимает 5—6 дней до овуляции. Другие кобылы овулируют, когда фолликулы достигают 3 см. Каждая кобыла — это индивидуальность. Бывают случаи, что кобыла в начале случного сезона, когда холодно, овулирует с одним размером фолликула, а в жаркую пору размер фолликула при овуляции увеличивается. Знание преовуляторного диаметра каждой конкретной кобылы — большое преимущество в предсказании овуляции, т. к. каждая кобыла обычно овулирует при известном диаметре фолликула в определенную пору года. Следует
50
Покрытие и искусственное осеменение кобыл...
помнить, что когда созревают два фолликула, то их преовуляторный размер меньше, чем единичного.
Для индукции овуляции часто применяются гормоны. Наиболее употребляемый и дешевый метод — внутривенное введение 5000 МЕ человеческого хорионического гонадотропина (XTT), как только устанавливается, что кобыла в охоте и имеeT мягкие фолликулы не меныше 3—3,5 см вдиаметре и в матке находятся характерные отеки. Около 85% кобыл овулируютчерез 24—48 часов после введения ХГТ.
Хотя большинство кобыл, участвующих в программах ИО, во время первичного обследования могут находиться нев состоянии охоты, лютеолизис у кобыл вызывается простогландином (ПГ) только тогда, когда желтое тело старше 5 дней. Если жеонозиологически. существуетОднако более из-за 14 дней, то того, чтодолжно продолжительная регрессироватьактив- финость желтого тела мешает возвращению кобылык эструсу в ожидаемое время, довольно часто назначают ПГ. Овуляция регистрируется приблизительно 8—10 дней спустя, однако этот интервал очень изменчив.
Время осеменения
Продолжительностьактивности сперматозоидов в половых путях кобылы определяет максимальный интервал между осеменениеми овуляцией, если кобылу осеменяют преовуляторно (передовуляцией). Жизнеспособность спермиев в половых органах кобылы сокрашается в зависимости от метода хранения. Свежая сперма живет до 3-х суток. Большая разбежность от одних до семи суток (в очень редких случаях) обусловливается индивидуальными особенностями жеребиа. Охлажденная сперMa может сохранять оплодотворяющую способность в половых путях кобылы до 24 часов. Замороженная сперма должна быть введена не более 12 часов перед овуляцией.
С другой стороны, продолжительность жизнедеятельности яйцеклеток определяет временные параметры после овуляции. Практически это означает, что осеменение следует провести
