«Репротест» и содержанием общего белка в вагинальной слизи коров г = 710,980, кобыл - г= +0.942. Так, повышение содержания общего белка в слизи способствует возрастанию электропроводности в период эструса. Все это доказывает неслучайный характер полученных данных. обосновывает выявленную тенденцию. Таким образом, прибор «Репротест» имеет все научные основания использования для определения онтимального времени осеменения коров и случки кобыл. 4. Разработка метода определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл На основе проведения большого объема исследований по изучению воспроизволительной функции коров и кобыл с позиции иммунологии, эндокринологии, биохимии мы разработали комплексную методику с использованием нового прибора «Репротест» для определения оптимального времени осеменения животных. Метод на основе «Репротеста» предназначен для специалистов на производстве и использования в личных хозяйствах. Он поможет опытному специалисту, но особенно не заменим начинающим техникам искусственного осеменения, ветврачам, зоотехникам. Его применение не усложнит, а наоборот, упростит работу, сделает ее более эффективной, результативной и творческой на современном уровне. Наш метод не отменяет действующую инструкцию по технике искусственного осеменения и ведения случной компании, он дополняет и уточняетсложно установитьее. На практике,начало охоты,особенноотсюдав зимне-стойловыйнеточности расчетапериодвремениочень осеменения, его пропуски, перекрытие коров и кобыл и большие экономические потери. ния являетсяКлючевымактивноемоментомфункциональноедля выбора временисостояниеплодотворногополовой системы,осемене-что отражают такие показатели как степень зрелости фолликула, оптимальные свойства слизистых выделений как среды для оплодотворения, близость к овуляции с учетом необходимого времени для капацитации спермисв.
по определениюНами разработанвремениалгоритмосеменениядля специалистовкоров и случкипокобыл.воспроизводствуОсновным показателем мы рекомендуем считать интервал показателей «Репротеста», а также учитывать дополнительные признаки, как хорошо знакомые специалистам (поведение животных, внешнее состояние половых органов и выделений), так и новые — пенетрационный тест (слизьтсперма), кристаллизацию слизи. Весь комплекс исследований занимает не более 5 минут и непосредственно на месте, имея под рукой
=
прибор, световой микроскоп, сам техник искусственного осеменения может принять решение не только о времени осеменения, но и провести превентивную диагностику функционального и клинического состояния половой системы животных. И самое главное, методика с использованием «Репротеста» неинвазивна и безболезненна, не вызывает стресс у животных, это очень важно для реализации полноценного полового цикла. В 4 хозяйствах Рязанской области проведена производственная проверка результатов однократного осеменения коров при определении оптимального времени по разработанной нами методике. Она заключалась в том, что в обычных производственных условиях в хозяйстве техник искусственного осеменения коров или специалист по воспроизводству в конном заводе определял время осеменения по нашим рекомендациям, действовал согласно алгоритму и проводил осеменение в пик электропроводности по прибору 650-900 ед. В среднем по всем хозяйствам при определении оптимального времени осеменения с использованием прибора «Репротест» и комплекса признаков половой охоты, оплодотворяемость достигла 92%, что на 11% выше, чем при обычном визуальном контроле. Это позволяет судить о высокой эффективности определения оптимального времени осеменения коров по нашей методике с использованием прибора «Репротест». Использование этого метода позволяет значительно снизить расход семени на одно оплодотворение. Если при обычном двукратном осеменении в хозяйствах он составил 3,8-4 дозы, то при однократном— 1,4-1,5 доз. Производственная проверка в Старожиловском конном заводе по использованию метода определения оптимального времени случки кобыл показала также высокую эффективность. Так, при использовании методики и прибора «Репротест» за ряд случных сезонов (2000-2005 г.г.) зажеребело 87% кобыл. На методику A прибор получены положительНе OTSEIBEL специалистов, Таким образом, только за счет определения оптимального времени осемененыя коров и кобыл можно повысить эффективность воспроизводства, а также улучшить работу специалистов и искусственное осеменение сделать современным биотехнологическим процессом. 5, ВЫВОДЫ
- — Установлено, что по мере роста и развития фолликула в яичнике в период эструса повышалось содержание эстрадиола-17В в сыворотке крови. В предовуляторный период, при фЗ-4 содержание гормона существенно возрастало до 21,42 пг/мл у коров, до 62,5 пг/мл у кобыл. Эстрадиол17В служит регулятором преобразований в организме и половой системе в процессе подготовки к осеменению и оплодотворению. Уровень прогестерона в сыво-
г
ротке крови был низким на протяжении всего эструса, а к овуляции снижался до 0.1 | нг/мл у кобыл и до 0,31 нг/мл у коров, что указывает на полноценность полового цикла. 2. Уровень показателей T- и В- лимфоцитарных систем крови коров и кобыл в период эструса взаимосвязан с функциональным состоянием половой системы. В предовуляторный период у коров и кобыл повышалось солержание Т-общих лимфоцитов и Т-хелперов. содержание у глобулинов и иммуноглобулинов. что указывает на активацию специфического клеточного и гуморального иммунитета и связано с усиленной защитой организма от любых чужеродных агентов во время осеменения. К овуляции отмечено перераспределение субпопуляций Т-лимфоцитов: лостоверно снижались Т-обшие, Т-хелперы, а Т-супрессоры сушественно возрастали у коров, а у кобыл несколько снижались, но были выше, чем в начале эструса. Динамика Т-супрессоров указывает на развитие иммунной толерантности, что является важнейшим условием для оплодотворения и раннего эмбриогенеза. 3. Фагоцитарная активность нейтрофилов (НСТ-тест), бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцим были на высоком уровне в период эструса, что свидетельствует об активации клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности в организме коров и кобыл в эструс. Их роль в большей степени направлена на создание общей противомикробной защиты при осеменении и оплодот ворении, что также биологически целесообразно. 4. Выявлены закономерности формирования местной естественной резистентности дило в половой системе. В предовуляторный период происхоло 15,88%,повышение у кобылбактерицидной— 26,50%. уровняактивности лизоцимавагинальной у коров - до 22.49мкг/мл.слизи у коровУ кобыл-15.80 мкг/мл. Это обеспечивает необходимое усиление местной противомикробной защиты во время осеменения, а также для создания оптимальных условий для пенетрации и капацитации спермиев в половых путях. К овуляции бактерицидная активность и лизоцим в вагинальной слизи существенно снижались. Снижение местной естественной резистентности в половой системе в период овуляции биологически оправдано. так как создаст благоприятные условия для выживания спермиев и оплодотворения. 5. Установлена физиологическая роль ферментов вагинальной слизи коров и кобыл. В крови коров и кобыл активность @-амилазы, щелочной фосфатазы. лактатдегидрогеназы (ЛДГ) была относительно стабильна и менялась лишь в некоторые стадии. В то же время в вагинальной слизи существенно повышалась в предовуляторный период активность а-
