прибор, световой микроскоп, сам техник искусственного осеменения может принять решение не только о времени осеменения, но и провести превентивную диагностику функционального и клинического состояния половой системы животных. И самое главное, методика с использованием «Репротеста» неинвазивна и безболезненна, не вызывает стресс у животных, это очень важно для реализации полноценного полового цикла. В 4 хозяйствах Рязанской области проведена производственная проверка результатов однократного осеменения коров при определении оптимального времени по разработанной нами методике. Она заключалась в том, что в обычных производственных условиях в хозяйстве техник искусственного осеменения коров или специалист по воспроизводству в конном заводе определял время осеменения по нашим рекомендациям, действовал согласно алгоритму и проводил осеменение в пик электропроводности по прибору 650-900 ед. В среднем по всем хозяйствам при определении оптимального времени осеменения с использованием прибора «Репротест» и комплекса признаков половой охоты, оплодотворяемость достигла 92%, что на 11% выше, чем при обычном визуальном контроле. Это позволяет судить о высокой эффективности определения оптимального времени осеменения коров по нашей методике с использованием прибора «Репротест». Использование этого метода позволяет значительно снизить расход семени на одно оплодотворение. Если при обычном двукратном осеменении в хозяйствах он составил 3,8-4 дозы, то при однократном— 1,4-1,5 доз. Производственная проверка в Старожиловском конном заводе по использованию метода определения оптимального времени случки кобыл показала также высокую эффективность. Так, при использовании методики и прибора «Репротест» за ряд случных сезонов (2000-2005 г.г.) зажеребело 87% кобыл. На методику A прибор получены положительНе OTSEIBEL специалистов, Таким образом, только за счет определения оптимального времени осемененыя коров и кобыл можно повысить эффективность воспроизводства, а также улучшить работу специалистов и искусственное осеменение сделать современным биотехнологическим процессом. 5, ВЫВОДЫ
- — Установлено, что по мере роста и развития фолликула в яичнике в период эструса повышалось содержание эстрадиола-17В в сыворотке крови. В предовуляторный период, при фЗ-4 содержание гормона существенно возрастало до 21,42 пг/мл у коров, до 62,5 пг/мл у кобыл. Эстрадиол17В служит регулятором преобразований в организме и половой системе в процессе подготовки к осеменению и оплодотворению. Уровень прогестерона в сыво-
г
ротке крови был низким на протяжении всего эструса, а к овуляции снижался до 0.1 | нг/мл у кобыл и до 0,31 нг/мл у коров, что указывает на полноценность полового цикла. 2. Уровень показателей T- и В- лимфоцитарных систем крови коров и кобыл в период эструса взаимосвязан с функциональным состоянием половой системы. В предовуляторный период у коров и кобыл повышалось солержание Т-общих лимфоцитов и Т-хелперов. содержание у глобулинов и иммуноглобулинов. что указывает на активацию специфического клеточного и гуморального иммунитета и связано с усиленной защитой организма от любых чужеродных агентов во время осеменения. К овуляции отмечено перераспределение субпопуляций Т-лимфоцитов: лостоверно снижались Т-обшие, Т-хелперы, а Т-супрессоры сушественно возрастали у коров, а у кобыл несколько снижались, но были выше, чем в начале эструса. Динамика Т-супрессоров указывает на развитие иммунной толерантности, что является важнейшим условием для оплодотворения и раннего эмбриогенеза. 3. Фагоцитарная активность нейтрофилов (НСТ-тест), бактерицидная активность сыворотки крови, лизоцим были на высоком уровне в период эструса, что свидетельствует об активации клеточных и гуморальных факторов естественной резистентности в организме коров и кобыл в эструс. Их роль в большей степени направлена на создание общей противомикробной защиты при осеменении и оплодот ворении, что также биологически целесообразно. 4. Выявлены закономерности формирования местной естественной резистентности дило в половой системе. В предовуляторный период происхоло 15,88%,повышение у кобылбактерицидной— 26,50%. уровняактивности лизоцимавагинальной у коров - до 22.49мкг/мл.слизи у коровУ кобыл-15.80 мкг/мл. Это обеспечивает необходимое усиление местной противомикробной защиты во время осеменения, а также для создания оптимальных условий для пенетрации и капацитации спермиев в половых путях. К овуляции бактерицидная активность и лизоцим в вагинальной слизи существенно снижались. Снижение местной естественной резистентности в половой системе в период овуляции биологически оправдано. так как создаст благоприятные условия для выживания спермиев и оплодотворения. 5. Установлена физиологическая роль ферментов вагинальной слизи коров и кобыл. В крови коров и кобыл активность @-амилазы, щелочной фосфатазы. лактатдегидрогеназы (ЛДГ) была относительно стабильна и менялась лишь в некоторые стадии. В то же время в вагинальной слизи существенно повышалась в предовуляторный период активность а-
3!
амилазы у коров до 32,64ел., у кобыл —25.01 ед., шелочной фосфатазы у коров- 290,37 ед., у кобыл-227,46 ед.. Активность ЛДГ была высокой в начале эструса и к овуляции. Такой закономерной динамикой показателей активности ферментов вагинальной слизи можно объяснить вклад цитохимических процессов углеводного обмена в создание оптимальной BRYTренней среды репродуктивного тракта в период благоприятный для осеменения. 6. Выявлена физиологическая роль электролитов в создании оптимальных условий для оплодотворения. В крови коров и кобыл уровень калия, натрия, хлора и кальция был относительно стабилен. В вагинальной слизи характеризовался определенной динамикой. В связи с развитием фолликула уровень калия, натрия, хлора в вагинальной слизи возрастал, а кальция снижался. С особенностями электролитного состава связано создание особых физико-химических и осмотических свойств вагинальной слизи, проницаемости клеточных мембран в плане подготовительных процессов к осеменению и оплодотворению. 7. В эструс в предовуляторный период у коров и кобыл повышалась интенсивность метаболизма. Возрастало содержание общего белка в сыворотке крови у коров до 81,48 г/л, у кобыл- 72,97 г/л. Концентрация альбуминов в крови мало менялась в связи со степенью зрелости фолликула, У коров она составляла -30,73-38,81 г/л, у кобыл- 32,65-35,02 г/л. Уровень глобулинов достоверно возрастал в предовуляторный период у коров до 52,54г/л, у кобыл — 39,61т/л. Повышалось содержание гемоглобина в крови у коров до 109,9| г/л, у кобыл-14178г/л. 8. Динамика содержания общего белка в вагинальной слизи коров и кобыл более выражена, чем в сыворотке крови. В предовуляторный период (ф3-4) в слизи его уровень достоверно повышался у кобыл до 10,20 гул, У коров — 1,88г/л. Это связанно с созданием особых структурномеханических свойств слизи, проницаемой для спермиев. 9. Концентрация клеток крови у кобыл и коров в лериод эструса характеризуется определенной стабильностью, как результат гомеостаза и гемостаза. В предовуляторный период было высокое содержание эритроцитов: в крови коров-5,06х10'/л, кобыл-9,31х10'/л, что связано с активизацией окислительно-восстановительных процессов в организме. У коров и кобыл в крови концентрация лейкоцитов, нейтрофилов и лимфоцитов была на высоком уровне, что указывает на закономерный лейкоцитоз и активизацию иммунных факторов в период эструса. 10. — Установлены закономерности кристаллизации вагинальной слизи коров и кобыл в связи со степенью зрелости фолликула. В предовуляторный период, при фЗ-4 слизь коров и кобыл обладает способностью обра-
