Нозриех diagnostics Clin Check Plus LIHD 102. р Калий и натрий в сыворотке крови и вагинальной слизи определяли методом пламенной фотометрии (Меньшиков B.B., 1987). Хлор в сыворотке крови и вагинальной слизи у кобыл - колоримегрическим методом без депротеинизации с использованием реактивов фирмы «Ольвекс Диагностикум»рическим методом(Санкт-Петербург).с индикаторомХлордифенилкарбозоном.у коров определялиКальциймеркуримет-K в крови и вагинальной слизи коров и кобыл - унифицированным колориметрическим методом (Колб В.Г., Камышников B.C., 1982, Меньшиков B.B., 1987). . р Содержание общего белка в сыворотке крови и в вагинальной слизи определяли биуретовымА ye методом.' Белковые фракции (альбумины.й а @-. В- - ‚ууглобулины) - нефелометрическимс методом (Антонов Б.И..1991.« Клетки крови анализировали общепринятыми методами, лейкограмму определяли в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимзе. Гемоглобин определяли унифицированным гемоглобинцианидным методом с использованием гемоглобинометра Минигем-540, реактивами фирмы «Ренам». . Электрическую проводимость вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле определяли на приборе «Репротест». Кристаллизацию вагинальной слизи у коров и кобыл оценивали при помощи светового микроскопа. Использовали только биоматериал без применения базисного кристаллообразующего вещества. Пенетрационный тест (слизь+сперма). На предметное стекло нано" сили каплю вагинальной слизи и каплю размороженной спермы быка. Смешивали стекля ННОЙ палочкой и сразуза затем: через 3 минуты определяли жизнеспособность и подвижность спермиев в среде. Результат оценивали в баллах. При взятии проб вагинальной слизи фиксировали ее количество. Растяжимость вагинальной слизи определяли по длине ниТиз Которая тянется между пальцев, в сантиметрах. Проводили учет реакции среды вагинальной слизи (рН) при помощи экспресс-метода индикатором оромтимоловым синим. 2 этап. Разработка прибора «Репротест» и методики определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл _
На основе многолетних физиологических исследований по биохимическим. физико-химическим свойствам вагинальной слизи животных в соавторствеа ca разработан6 прибор5 «Репротест»- (рис.2). Принцип работы прибора. Прибор основан на проводимости вагинальной слизи в неоднородном электрическом поле, что связано с изменением тонкой структуры белковых молекул. Данные «Репротеста»
C—O
2
i И | соответствуют степени зрелости фолликула в i | и В, яичнике. Цифровое значение на мониторе ih | ‘i i i | считали единицами (ед.). ek | Е Небольшое количество слизи наносили на Гони | | `a датчикисследованиеи занимаетснимали несколькопоказания.секунд. Все ue aa 3 этап. Производственная проверка — " ae прибора и методики в хозяйствах а.ак "| РязанскойВ Старожиловскомобласти конном заводе, в iS aha aoa ООО «Авангард», учебном — хозяйстве ip co > «Стенькино», ОПХ «Подвязье», СПК , "oR «Новоселки» была проведена производственная проверка по Рис 2. Фото прибора «Репоотест» эффективности разработанной нами методики определения оптимального времени осеменения коров и кобыл.
Она заключалась в том, что в обычных производственных условиях В хозяйстве техник искусственного осеменения коров или специалист по воспроизводству в конном заводе определял время осеменения по нашим рекомендациям, действовал согласно алгоритму и проводил осемснение коров и случку кобыл с жеребцом в пик показателей прибора. У кобыл половую охоту выявляли на 5-9 день после выжеребки с помощью «пробы» в манеже утром и вечером, с последующим установлением степени зрелости фолликула ректальной пальпацией и времени покрытия прибором «Репротест». Статистическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере по программе “Биометрическая обработка”, основанной на методах, изложенных Е.К. Меркурьевой (1983).
- РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Содержание овариальных гормонов у коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула в яичнике Эстрадиол-17В в сыворотке крови коров и кобыл в начале эструса был относительно низким 7,59 пг/мл у кобыл и 4,54 пг/мл- у коров. Затем по мере роста и созревания фолликула до ф3-4 возрастал в несколько раз и достигал у кобыл 62,3 пг/мл, у коров 21,42 пг/мл (рис.3). Такой повышенный эстрогенный фон определяет спенифическое поведение самок в этот перйод- «половая охота», рефлекс неподвижносйв», что указывает на готовность к спариванию. Овуляция проходила при низких значениях эстрадиола-17В.
Об
13
70
623
с 90
Е 50
Е= 40
5 30
а ыы 21.42
5 210 7. yo2 рв ля
о и я
т
$1 2 94 ОВ
Период эструса (стадии развития фолликула)
|
о SP Hae ecpoe
Рис.3 . Динамика содержания эстрадиола-17В в крови коровн кобыл в пери00 эструса в связи со стененью зрелости фолликула
Корреляционный анализ между эстрадиолом-17В и общим белком. электролитами, активностью ферментов в слизи коров и кобыл показал высокую связь (= + 0.9; 0,7; 0,6 соответственно). На этом основании можно считать эстрадиол-17В регулятором преобразований в период эструса. Важно отметить, что по сравнению с коровами уровень эстрадиола17B у кобыл в сыворотке крови почти в 3 раза выше. Это можно объяснить продолжительностью периода эструса и половой охоты. У кобыл половая охота продолжается 2-12 суток (в среднем 5-6) отсюда и необходимость существенной гормональной поддержки в организме. Концентрация прогестерона в сыворотке крови была низкой на протяжении всего эструса, а к овуляции снижалась до 0,1 1нг/мл у кобыл, 0,31 нг/мл - у коров. Это не только не противоречит сущности механизма, но и указывает на полноценность полового цикла. 3.2. Иммунные показатели крови и естественная резистентность вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса 3.2.1. Т- и В-лимфоцитарные системы крови кобыл и коров в пернол эструса в связи со степенью зрелости фолликула Иммунная система, наряду с нервной и гормональной, участвует в регуляции всех жизненных функций организма, включая воспроизведение. Для объяснения особенностей протекания эструса, подготовительных механизмов и процесса оплодотворения у коров и кобыл мы изучили о показателей специфического иммунитета крови в период эструса”связи с развитием фолликула в яичнике и овуляцией. В резуль-
СОНИ
_
