8
преподавательского состава Рязанской государственной сельскохозяйсти й венной академии (Рязань, 1997-2005). 1.6. Публикации. Материалы диссертации опубликованы в 33 научных работах, в том числе в статьях. | патенте на изобретение. научнопрактических рекомендациях и отражены в 4 отчетах по хоздоговорной работе, объемом 157 листов компьютерного текста. 1.7. Объем и структура работы. Диссертация изложена на 286 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов собственных исследований и их обсуждения, Списоквыводов,литературыпрактическихвключает 426предложений,источников,re спискав томлитературы, числе 196 зарубежныхприложений.~ авторов. Материал иллюстрирован 32 таблицами и 41 рисунком. 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИИ
Исслелования проводилив 3 этапа: |- физиологические исследования крови и вагинальной слизи коров и кобыл в период эструса в связи со степенью зрелости фолликула, 2- разработка прибора «Репротест» и методики определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл, 3- производственная проверка прибора и методики в хозяйствах Рязанской области (рис. 1).
Объектами исследований были коровы и кобылы, так как эти животные моноплодные с длительным периодом беременности, поэтому трудности с воспроизводством стоят в этих отраслях особенно остро. Кроме того, эти животные с разным типом осеменения, что позволило наиболее полно тивнойвыявитьсистемы.механизмык и видовые особенности функционирования< репродукKn 1 этая. Физиологические исследования проводили на протяжении 19962005 г.г. В опыте использовали кобыл опытной конюшни ВНИИ коневодства, Старожиловского конного завода. Кобылы были русской верховой и тракененской пород. Физиологические исследования на коровах проводили в племзаводе «Авангард». Коровы черно-пестрой породы подобраны по принципу аналогов с учетом породности, продуктивности (средний удой за лактацию 6000-6500 кг), возраста (3-5 лактации) и живой массы (620-650 кг). В опытах использовали гинекологически здоровых животных. Уровень кормления лошадей и коров соответствовал нормам, разработанным ВНИИ коневодства и ВИЖа в соответствии с продуктивностью. Содержание отве7 чало зоогигиеническим требованиям. Состояние охоты У кобыл определяли жеребцом-пробником ("pyuным " Cr . м м метолом). гепень зрелости фолликула - ректальнои пальпациеи с ультразвуковым контролем на ультрасонаре SCAD-9210.
, СХЕМА опы ГА 1 этап. Физнологические исследования репродуктивной системы коров и кобыл в период эструса.
КОРОВЫ
} ™ KOB $ лы
owЭСТРУС307 Se,‚ —ЭСТРУС>=.
Ф! ©? Pe 4 OB ot oe р <br>Половая © ов<br>рн Половая охота<br>[[eeeкоровКРОВЬи кобылбоди ]| ВАГИНАЛЬНАЯкоров и кобыл СЛИЗЬ—|]<br>ОбшийFema Обший белок<br>Белковые фран Г.Белковые фракции<br>а - амилиза Se Биохимические ‚рп -амипаза<br>ЛДГ} F Фепменты А неслепования _||Чрерменты дя . |
ie+ we р ПФ К. |
Na’ Электоолиты ; ЭлектиолитыNa
С’ смограмма Nc
cr ©
Т-иВ- лимфоциты pues -- Лизоцим |
НСТ- тест HaMyHONOTESECRNE |
БАСКDAES исслело!ыы БАСБАС
Лизоцим
ЭстПрогестерн р адиол -17 p———PB Гормональныеисслелования | Serpanion-I76
|
Фен | Э^ектропроволмость |
показатели `` Кристаллизация
аллее2
Органолептические = Цвет |
5 показатели —
Растяжимость
Корреляцнонный | |
анализ
И этан_ Разработка нового прибора «Репротест» и методики (алгоритма) на его основе для определения оптимального времени осеменения коров и случки кобыл Ш этап. Производственная проверка методики на основе прибора «Репротест» для определения оптимального времени осеменения.
Пробы вагинальной слизи и сыворотки крови у кобыл отбирали в следующие стадии (на основании изменений, происходящих в яичниках):
-
начальный период охоты (фолликул на 1-Й и 2-й стадиях развития
-
1.2);s2);
-
предовуляторныйs2); ; период (cp3-4);( 3
; ( 3
- период овуляции; (OB)
У коров состояние половой охоты определяли визуальным контролем по степени выраженности «рефлекса неподвижности». Стадии развития фолликула в яичнике устанавливали ректальной пальпацией. Пробы слизи и крови у коров в периол эструса отбирали по тем же стадиям. Искусственное осеменение корови проводили мано-цервикальным способом.= На кобылах применяли «ручную случку» с жеребцом. Содержание эстрадиола-17В и прогестерона в сыворотке крови коров и кобыл, а также эстрадиола-17В в вагинальной слизи кобыл изучали методами PHA и ИФА. Метод ИФА на автоматизированном иммунохимическом анализаторе "АМХ" (модуль системы версии 6.0 и модуль “Репродуктивная эндокринология”). с использованием реактивов фирмы "Эббот лабораториз"
Т- и В- лимфоциты определяли методами Е-РОК и EAC-POK («Иммунологические методы исследования в животноводстве», Метод. рекомендации, 1987). Определение числа Т-лимфоцитов общих у животных проводили методом спонтанного розеткообразования с эритроцитами барана (Е-РОК - эритроциты розеткообразующие). Субпопуляции Т-лимфоцитов с помощью нагрузочного теста с теофиллином. В- лимфоциты определяли методом ЕАС-РОК - розеткообразование с эритроцитами барана в системе EAC Определение общей окислительно-восстановительной активности нейтрофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТтест). Реакцию спонтанного НСТ-теста проводили на основе готового реактива нитро-синего тетразолия (фирмы «Лахема» - Чехия). Стимулированный НСТ-тест определяли с взвесью зимозана. Иммуноглобулины в крови коров анализировали рефрактометрическим методом (Методические указания по лечению и профилактике гипогаммаглобулинемии, 1985). Концентрацию лизоцима и бактерицидную активность определяли по методуи О.В.veБухарина (1972). . Активность о-амилазы, шелочной фосфатазы и лактатдегидрогеназы (ЛДГ) изучали кинетическим фотометрическим методом с помощью наборов реактивов фирмы «Диаком» (Россия). Использовали фотометр
