ряющей способности спермы;

• охрану здоровья производителей, предупреждение появления и распространения заразных болезней;

• организацию массового применения искусственного осемене-

• ния животных в зоне деятельности племпредприятия;

• контроль за искусственным осеменением животных в хозяйствах обслуживаемой зоны через сеть районных инспекторов по племенному делу и искусственному осеменению;

• подготовку техников по искусственному осеменению и их еже-

• годную аттестацию, организацию конкурсов;

• внедрение в практику новейших достижений науки и передового опыта по технологии искусственного осеменения, а также мероприятий, способствующих высокой оплодотворяемости местного поголовья.

Филиалы предприятий не содержат производителей, в их задачи входят создание запасов замороженной спермы, жидкого азота, оборудования и снабжение ими хозяйств согласно их заявкам.

2. Методы получения, криоконсервации и хранения спермы быков-производителей

Получение спермы (биопродукции) от производителей является важнейшим технологическим элементом в технологии искусственного осеменения.

К методу получения спермы от производителей предъявляется ряд требований:

• обеспечение максимального объема эякулята и защита сперми-

• ев от травматизации;

• гарантия высокого санитарного качества спермы;

• безопасность для здоровья и воспроизводительной способнос-

• ти самцов.

Перечисленным требованиям в наибольшей мере отвечает получение спермы с помощью искусственной вагины. В настоящее время сперму от быков получают на укороченную искусственную вагину, состоящую из жесткого резинового корпуса с патрубком и навинчивающейся пробкой, внутренней трубки (камеры) из тонкой эластичной резины, разового спермоприемника из полиэтилена.

В последнее время находят широкое применение одноразовые

полиэтиленовые спермоприемники в виде пакета конической формы. Для предохранения спермы (эякулята) от слишком быстрого охлаждения спермоприемник заключают в спермоизоляционный чехол.

Искусственная вагина должна максимально воспроизводить условия, имеющиеся во влагалище самок при естественном осеменении:

• температура в диапазоне 40–42°С;

• скользкая внутренняя поверхность;

• давление 40–60 мм. рт. ст.

Даже незначительное понижение температуры (на 1–2°С) может затормозить проявление половых рефлексов (эрекции и эякуляции). Температура выше 42°С не препятствует совокуплению и эякуляции (они могут происходить даже при 50–60°С), однако жизнеспособность и оплодотворяющая способность спермиев ухудшается и уже после нескольких взятий спермы изменится порог чувствительности нервных окончаний пениса, что в дальнейшем затруднит нормальную эксплуатацию производителей.

От молодых быков, эксплуатируемых первый год, получают по одному эякуляту в 5 дней или по два эякулята через каждые 7–10 дней.

Таблица 1 – Характеристика свежеполученных эякулятов быка

В настоящее время в нашей стране сперму быков – свежеполученный эякулят с оценкой по подвижности не ниже 8 баллов, с концентрацией не менее 0,8 млрд/см³ – разбавляют лактозо-глицериновой средой следующего состава: лактоза – 11,54 г, глицерин – 5 мл, желтки куриных яиц – 20 мг, Спермосан 3 - 75000 ЕД (по пенициллину); вода бидистилированная – 100 мл. Сперму вначале разбавляют в соотношении 1:1, выдерживают 5–10 минут при комнатной температуре, затем разбавляют окончательно, чтобы в одной грануле перед использованием было не менее 15 млн спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

2.1. Контроль качества спермы

Сперму быков, сохраняемую в жидком азоте, тестируют по следующим показателям:

• подвижность спермиев в дозе;

• выживаемость спермиев при 38°С;

• наличие возбудителей инфекционных заболеваний, коли-титр. Согласно стандарту СЭВ 5155-85 «Замороженная сперма быков» после

оттаивания она должна отвечать следующим требованиям (табл. 2).

Таблица 2 – Характеристика замороженной спермы быков

после оттаивания

Примечание: Допускается к использованию сперма высокоценных быков-производителей с подвижностью не ниже 3,0 баллов и количеством спермиев с ППД не менее 1 млн.

Работу по оценке качества спермы проводят в лабораторном помещении пункта при температуре не ниже 18°С.

Для определения подвижности спермиев необходимо иметь биологический микроскоп, электрообогревательный столик Пакенаса или Морозова, предметные и покровные стекла, стеклянную палочку.

Перед началом работы включают в электрическую сеть электрообогревательный столик, переносят его на предметный столик микроскопа так, чтобы отверстия столика и микроскопа совпадали. На обогревательный столик кладут предметные и покровные стекла, палочку. Теплой стеклянной палочкой наносят на чистое предметное стекло каплю оттаявшей спермы, к ней добавляют каплю подогретого 2,9%-ного раствора цитрата натрия. Если сперма расфасована в гранулы, раствор цитрата натрия не добавляют. Каплю спермы накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом в проходящем свете при малом увеличении (180 раз). Исследования проводят при опущенном конденсоре и прикрытой диафрагме. При этом центр покровного стекла должен находиться против линзы объектива микроскопа.

Различают следующие виды движения спермиев:

• прямолинейно-поступательное – по направлению продольной

• оси спермия;

• манежное – по кругу;

• колебательное – спермии не перемещаются, а производят дви-

• жение хвостом.

Подвижность спермиев представляет собой отношение числа спермиев с прямолинейно-поступательным движением к общему числу спермиев. Этот показатель выражают в баллах. Принята 10-балльная система оценки, при которой каждый балл соответствует 10 % спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

Так, если в поле зрения микроскопа находится 50% спермиев с ППД, то сперму оценивают 5 баллами;

• если 60% спермиев с ППД – 6 баллов;

• если 70% спермиев с ППД – 7 баллов;

• если 80% спермиев с ППД – 8 баллов; - если 90% спермиев с ППД – 9 баллов;

• если 100% спермиев с ППД – 10 баллов;

При подсчете общего числа спермиев в 1 см³ после оттаивания (без применения буферной физиологической среды) сперму разбавляют в 20 раз, для этого ее набирают в лейкоцитарный меланжер до метки 0,5, а затем до метки 11 досасывают 3%-ный раствор натрия хлорида. Концы меланжера зажимают большим и указательным пальцами и переворачивают его не менее 60 раз, что обеспечивает равномерное распределение спермиев в растворе. Первые 3 капли выпускают из меланжера, следующую каплю подносят к краю покровного стекла, притертого к камере Горяева. Под действием сил поверхностного натяжения жидкость заполняет пространство между покровным стеклом и сеткой камеры Горяева. Под микроскопом подсчитывают спермии в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали. Найденная цифра соответствует количеству спермиев в 1 см³ , выраженному в миллионах.

• Количество спермиев с ППД в дозе (КСппд) вычисляют по формуле: КСппд = КСобППСД /100;

• где КСоб – общее число подсчитанных спермиев; ППС – процент (%) подвижных спермиев; Д – доза спермы, см³ .

Основным биологическим свойством спермы является ее оплодотворяющая способность. С целью прогнозирования оплодотворяющей способности спермы быков-производителей, закрепленных за хозяйством, проводят определение выживаемости спермиев по ускоренной методике.

3. Технология и гигиена искусственного осеменения животных Важнейшими звеньями технологии искусственного осеменения

самок в условиях хозяйства (фермы) являются:

• хранение спермы и контроль ее качества;

• подготовка спермы к использованию;

• отбор самок для осеменения;

• введение спермы в половые пути самок.

Все технологические звенья должны находиться под постоянным контролем со стороны зооветспециалистов хозяйства. Отсутствие должного контроля – наиболее частая причина низкой оплодотворяемости и бесплодия самок.

Сперма быков, замороженная в облицованных и необлицованных гранулах, пайетах в криобиологических сосудах (сосудах Дьюара), в сосуде «Харьков-34Б», по эксплуатационным характеристикам приближается к лучшим зарубежным образцам.

В процессе эксплуатации криобиологических сосудов необходимо соблюдать следующие правила:

• сосуды должны находиться в отдельном, хорошо вентилируе-

• мом помещении пункта;

• очередную дозаправку проводить при наличии не менее 1/4 жид-

• кого азота от рабочей емкости;

• при перемещении сосуда избегать сильной тряски и ударов;

• не пользоваться открытым огнем над горловиной сосуда, чтобы

• предупредить взрыв;

• категорически запрещается закрывать горловину герметично, так как это может привести к опасному повышению давления паров жидкого азота.

Если из-за неправильного обращения с криобиологическим сосудом произошла разгерметизация (на что указывает появление инея или снеговой «шубы» на горловине сосуда), его следует немедленно разгрузить от запасов спермы, жидкий азот вылить, а сосуд поставить

на отогрев в течение суток. Эти меры направлены на предупреждение возможного взрыва сосуда.

Сперма, сохраняемая в жидком азоте, подлежит оценке по подвижности спермиев не реже одного раза в 5 суток; сперма, сохраняемая при плюсовых температурах – ежедневно. Оценку по остальным показателям качества проводят в случаях снижения оплодотворяемости самок либо при возникновении арбитражных споров между хозяйством и племпредприятием, продавшим сперму.

Необлицованные гранулы спермы оттаивают в 2,9%-ном стабилизированном растворе цитрата натрия, выпускаемом в стеклянных ампулах. Ампулу вскрывают, помещают на 4–5 минут в гнездо биологического термостата, чтобы раствор прогрелся до 39–40°С. Открыв криобиологический сосуд, за крючок приподнимают канистру со спермой до верхнего края горловины сосуда. Конец пинцета охлаждают, погрузив на несколько секунд в жидкий азот, затем захватывают пинцетом гранулу и переносят в ампулу с раствором цитрата натрия. Опускают контейнер со спермой поглубже в жидкий азот. После этого ампулу со спермой вынимают из термостата, вытирают марлевой салфеткой и помещают в штатив из термоизоляционного материала (поролон, пенопласт). Следует оттаивать не более трех гранул спермы одновременно, чтобы иметь возможность использовать их в течение 10–15 минут, так как более продолжительное хранение оттаянной спермы заметно снижает оплодотворяющую способность спермиев. По данным ведущих ученых, оптимальная температура хранения оттаянной спермы быков – 16–20°С. Для поддержания такой температуры можно воспользоваться пищевым термосом или термосом-пеналом.

Следует отметить, что с повышением температуры оттаивания достоверно увеличивается % подвижных спермиев и возрастает их оплодотворяющая способность. Так, Стоянов (1986) установил, что оттаивание гранул спермы при температуре 55°С повышает оплодотворяемость коров на 5,39% по сравнению с температурой 38–40°С.

В НИИ Украины разработали и внедрили способ сверхбыстрого оттаивания спермы путем погружения их на 7 секунд в кипящую воду с использованием специального устройства. При таком режиме оттаивания спермы оплодотворяемость коров была выше на 13%. Пайету со спермой погружают на 15 секунд в воду с температурой до 38°С. После оттаивания ее протирают стерильной салфеткой и используют по назначению.