Физиология и биотехника размножения лошадей

Для получения зародышей доноров осеменяют естественно или искусственно в спонтанный или индуцированный (без стимуляции или с попыткой индукции суперовуляции) половой цикл. Время и кратность осеменения кобыл-доноров контролируют по дате пачала половой охоты и степени зрелости преовуляторного фолликула. При искусственном осеменении кобыл в спермодозе должно содержаться 250-500 млн активных спермиев.

Получение зародышей. Зародыши у кобыл-доноров получают нехирургическим способом из полости рога матки (рис. 2.12). В рог матки зародыши мигрируют на 6-й день после овуляции на стадии морулы или бластоцисты и достигают в диаметре в среднем 0,2 мм. С 7-го по 9-Й день после овуляции зародыши увеличиваются в размерес 0,4 до 2,2 мм (Wanderwall D.K., Woods G.L., 2006). Оптимальное время для вымывания зародыша — 7-й или 8-й день после овуляции. Через 9 дней после овуляции бластоциста имеет слишком большие размеры, легко травмируется и поэтому непригодна для пересадки.

Операцию по нехирургическому извлечению зародышей из полости матки проводят при помощи двухканального катетера самой разной конструкции (например, катетера VEUF-80 длиной 80 см, диаметром 8 мм). Катетер через шейку матки вводят в тело матки и надувают в резиновый баллончик 15—30 мл воздуха. Полость тела и рогов матки

_
ыы юм
— в ™
—
ей
At Oo =
МР va
olf
¢р р
№ / ‘\ Piaр
а * 6

Рис. 2.12. Схема получения (а) и пересадки (6) зародыша лошади нехирургическим способом

al

промывают последовательно три-четыре раза 1 л специальной среды и собирают в цилиндр объемом несколько свыше 1 л. Удаление промывочной жидкости из рогов и тела матки контролируют методом трансректальной пальпации. Количество остаточной жидкости после каждого промывания матки не должно превышать 10% введенной. Собранную в цилиндр промывную жидкость отстаивают в течение 20-30 мин, чтобы зародыши опустились на дно. Затем верхний слой жидкости (850—900 мл) удаляют, а нижний слой порционно разливают в чашки Петри и исследуют макро- и микроскопически в больших часовых стеклах под бинокулярной лупой при 10-—15-кратном увеличении. Найденных зародышей оценивают морфологически. Зародыши с признаками дегенерации, уродства и недоразвития выбраковывают, пригодные для трансплантации при помощи шприца (1 мл) и катетера переносят в стерильную чашку Петри со средой для трансплантации. В течение 1-2 мин зародыш отмывают и переносят во вторую чашку Петри, где хранят до момента трансплантации. Эффективность вымывания без индукции у кобылы-донора суперовуляции достигает 59-80%, у хронически бесплодных кобыл — 30%. В качестве среды для вымывания обычно используют жидкость Дюльбекко, обогащенную 1% инактивированной фетальной бычьей сывороткой, для кратковременного хранения — Ham’ Е10, после ее предварительного насыщения в течение 3—5 мин газовой смесью, содержащей 90% No, 5% О, и 5% СО», и последующего добавления к ней 10% инактивированной фетальной бычьей сыворотки или сыворотки новорожденного теленка, пенициллина (1000 ЕД/мл) и стрептомицина (100При мкг/мл).необходимости транспортировки зародышей на большие расстоянияОптимальныеих замораживают, результаты получают прино они плохо замораживании шестидневныхпереносят замораживание. зародышей лошадей. Первый жеребенок от пересадки замороженно-оттаянного зародыша получен в Японии (Yamomoto У. et al., 1982). Эффективность такой трансплантации низкая и не превышает 20% (Bruyas J.F. иОтбор^{реципиентов.Вкачествереципиентовиспользуютздоро-} вых кобыл в возрасте 3-15 лет с хорошо развитой молочной железой, без какой-либо патологии родового канала и не имевших осложнений в период беременности, родов или в послеродовом периоде и проявляющих в период полового сезона регулярные и нолноценные половые циклы.

Индукция и синхронизация полового цикла донора и реципиента. Для индукции и синхронизации полового цикла у донора и реципиента кобылам применяют синтетический прогестаген или альтреногест (рис. 2.13), ПгФ., или его синтетический аналог и хорионический гонаWOT POTME:

Индукция и синхронизация полового цикла у кобыл при помощи альтреногеста, ПгФ», или его синтетического аналога. Гормональную обработку проводят без учета стадии полового цикла. Препарат дают животным ежедневно с кормом в дозе 12,5 мл. Кобыле-донору препарат назначают в течение 15 дней, реципиенту — 16 дней. Лютеолитическую дозу ПгфФь», или его синтетического аналога донору инъецируют на 16-й день, реципиенту на 17-й день от начала гормональной обработки. Признаки половой охоты у кобыл диагностируют спустя 5 (4-6) дней после инъекции ПТФ»... По дате начала половой охоты и сроку овуляции преовуляторного фолликула решают вопрос об ускорении (синхронизации) овуляции при помощи хорионического гонадотропина (3000 МЕ) либо у донора, либо у реципиента. Для синхронизации полового цикла при помощи ПФ», или его аналога кобылам (донору и реципиенту) в лютеиновую фазу полового цикла (через 6-11 дней после овуляции) инъецируют лютеолитическую дозу этих препаратов. Инъекцию ПгФ,, или ero аналога реципиенту

Рис. 2.13. Схема синхронизации полового цикла у кобыл-доноров и реципиентов при помощи альтреногеста, ПгФ,, или его аналога (Wade J.M., 1996)