ЖАН,
чения обусловливают. пролонгированная лютеиновая фаза и пропуск полового Пика:
3.5.4. Диагностика беременности и бесплодия по наличию эстрона сульфата в моче, крови, кале
Концентрация эстрона сульфата в крови, моче и кале жеребых кобыл чрезмерно повышена начиная с 80-го дня беременности. Для обнаружения эстрона сульфата в моче прибегают к химическим (проба Кубони), в крови и кале — к радиоиммунологическим (РИА) методам исследо"ПробатестируемойКубони.мочиДлядобавляютгидролиза3 млконъюгированныхконцентрированнойэстрогеновсолянойккисло" 15 мл ты. Полученную смесь выдерживают в водяной бане при температуре 100 °Св течение 10 мин. После охлаждения до комнатной температуры добавляют 18 мл бензина. Пробирку закрывают и активно встряхивают, Надосадочную эмульсию, содержащую свободные эстрогены, переносят в другую пробиркуи к ней добавляют 10 мл концентрированной серной кислоты. Пробирку закрывают, встряхивают и прогревают в водяной бане при температуре 80 °С в течение 5 мин. Результаты оценивают визуально при дневном свете или под лампой Вуда. Темно-зеленая флюоресценция указывает на наличие в моче эстрогенов, жидкость кориae вого цвета —— Ha их отсутсBue. Прири срокеср 90 жеребости болееe жеребости100 дней боле?точ. ность150 теста Кубони достигает примерное by aeP88) ra ттимальноЕ дней — практически равна 100% (Elmore R.G., : - время для радиоиммунологической диагностики жеребости по пробе на эстрона сульфат в кале является 120-й день после осеменения. Радиоиму кий метод обнаружения эстрона сульфата в кале является | мМУНологичееметодом выбора при диагностикед PS беременности у диких лошадей.ii
3.5.5. Проба на гонадотропин сыворотки жеребых кобыл
Тонадотропин сыворотки жеребых кобыл является гормоном беременности. Гормон имеет большую молекулярную массу, с мочой не выделяется. В сыворотке крови жеребых кобыл его регистрируют с 40-го по 120-130-й день жеребости. Оптимальное время для проведения исследования — 60—80-й день беременности. В это время содержание ГСЖК достигает максимальных значений. Для выявления гомона прибегают к биологическим и иммунологическим методам исследования. Биологи-
АИ
ческую пробу проводят на неполовозрелых самках мышей и крыс или самцах некоторых видов лягушек. При подкожном введении неполовозрелым самкам лабораторных животных сыворотки крови, содержащей ГСЖК,ников, раскрытиеотмечают nononollувеличение щели,матки при венразмере, еегиперстимуляцию в aeuthanaseouattяич-Meшок лягушек из клоаки самцов извлекают жидкость, содержащую подвижные спермии. С середины 60-х| rr. прошлого столетия. для детекции в крови кобыл сывороточного гонадотропина прибегают к иммунологическому тесту (MIP test), или реакции торможения гемагглютинации. К исследуемой пробе крови добавляют стабилизированные антигенсодержащие эритроцитыбе крови барана исывороточного антисыворотку противгонадотропина ГСЖК.(антигена) Приэритроциты отсутствии вагглю про - тинируют, при его наличии — не агглютинируют. При использовании MIP-recra на 40-100-й день после ‘осеменения точность позитивного диагноза на жеребость достигает 97% (Morel D., 1997). По позитивному тесту Ha ГСЖК нельзя судит о жизнеспособности вынашиваемого плода.
3.5.6. Ультразвуковая диагностика беременности, многоплодия и определение пола плода
За последние годы в ветеринарной акушерской практике все большее распространение для раннейи диагностикиJ беременности у крупных и мелких домашних животных получает эхография, обладающая высокой информативностью и безвредностью, как для матери, так и для эмбриоаи Ялода:
ля инструментальной диагностики ранних СРОКОВ KepEEGerm и бесплодия обычно применяют ультразвуковые приборы, работающие в peжиме реального времени с линейным трансректальным датчиком. На экране дисплея получают двухмерное изображение исследуемой анатомической структуры в результате преобразования отраженных ультразвуковых лучей B святящиеся c различной интенсивностью серые точки. Получаемые изображения называют изображениями в В-режиме или срезами в режиме. При быстром череловании В-срезов получается видеомониторное на людение режим реального времени). Преимущества использования данной системы заключаются в возможности быстрого выбора плоскости оптимального сечения и получения непрерывного двухмерного изображения части тела, расположенной нод сканирующей
REE
поверхностью датчика. В большинстве приборов, работающих в режиме реального времени, можно «заморозить» изображение с целью его изу чения, проведения измерений и/или получения эхограммы (регистрация изображения на специальной бумаге). Ультразвуковое обследование половых органов кобыл не требует специальной подготовки самки. Животное фиксируют в станке и дополнительно применяют губную закрутку. Из прямой кишки удаляют каловые массы. При эвакуации кала следует избегать попадания в прямую кишку воздуха, присутствие которого резко ухудшает качество получаемого изображения. Рабочую поверхность трансректального дат* чика смазывают звукопроводящим гелем, чтобы избежать артефактов, и вводят датчик в прямую кишку. Для исследования половых органов применяют линейные датчикис частотой колебания 5,0-7,5 МГц. Они обеспечивают широкое поле наблюдения и позволяют получать детализированное изображение структуры, расположенной под сканирующей поверхностью преобразователя. Первое сообщение о возможности применения УЗИв режиме peального времени для диагностики беременности у кобыл появилось во Франции (Palmer E., Draincourt M.A., 1980). Позже было продемонстрировано, что ультразвуковые приборы, работающие в режиме реального времени, позволяют не только диагностировать ранние сроки беременности, но и дают возможность своевременно распознавать многоплодную беременность, проводить ее редукцию до одноплодной и вести мониторинг за развитием зародыша. При ежедневном сканировании матки кобыл зародышевый пузырек (бластоциста) начинает визуализироваться в виде эхонегативного образования диаметром 2 мм с 10-го дня, а эмбриобласт в виде эхопозитивной полоски — с 20-го дня после осеменения. На 14-Й день после овуляции зародышевый пузырек но-^ движен и достигает в диаметре 14 мм, на 16-й день бластоцита перестает мигрировать но матке и прикрепляется к основанию рога-плодовмести* лища. Сердцебиение у эмбриона начинают регистрировать с 21-22-го дня жеребости. Для вынесения безошибочного диагноза на беременность и бесплодие, своевременного выявления многоплодной жеребости и ее редукции до одноплодной — наблюдения за развитием зародыша кобыл рекомендуется проводить многократно: на 14-16-й, 21-22-й и 35-й дни после осеменения. Точность позитивного диагноза на беременность на 14— 16-й день после осеменения превышает 92% (Palmer Е., Draincourt M.A, 1980).
