Эстральная цикличность у домашних и диких жвачных животных в лактационный период

краниального отдела влагалища самок животных в послеродовом периоде. Метод был разработан нами для коров и лосих (Василенко, Борисенков, 1987; Василенко, 2000 а, б).

Метод определения функционального состояния яичников у коров включает взятие мазка из верхнебокового свода влагалища на уровне шейки матки путем снятия клеточной массы со стенок пипеткой для искусственного осеменения с обработанным шероховатым концом (5-7 см). Пипетку вводили через вагинальное зеркало с подсветкой под визуальным контролем. Материал, взятый со стенки влагалища, равномерно распределяли по предметному стеклу. Сразу после взятия высушенные мазки фиксировали в 70° спирте в течение 10 минут. Окраску мазков проводили по методу Романовского-Гимза. С помощью клавишного счетчика подсчитывали 200 клеток в разных участках на мазках, используя микроскоп Biolar (увеличение 12х10).

На мазках, взятых у коров, отмечали наличие четырех типов десквамированных клеток:

1. Клетки собственно поверхностного слоя влагалищного эпителия - самые крупные клетки со слабо ацидофильной или слабо базофильной окраской, иногда вакуолизированные. Ядро большое, круглое или овальное, интенсивно окрашенное.

2. Большие промежуточные клетки влагалищного эпителия, прилегающие к клеткам собственно поверхностного слоя, отличаются от базальных клеток интенсивной ацидофильной окраской цитоплазмы.

3. Малые промежуточные клетки круглой, овальной или треугольной формы с цитоплазмой, чаще окрашенной в слабые базофильные поля.

4. Единичные клетки парабазального слоя. Ядро большое, круглое, окружено ободком цитоплазмы. Клетки по величине не больше лимфоцита.

Определение принадлежности клеток к определенному типу осуществляли с использованием классификации клеток влагалищного эпителия для женщин (Арсеньева, 1977) и собак (Dore, 1978, 1978 а). В группу поверхностных клеток влагалищного эпителия включали также безъядерные или с чуть заметными контурами ядра прозрачные чешуйчатые клетки со слегка базофильной или бесцветной цитоплазмой, так называемые “тени”, по аналогии с “тенями” эритроцитов. Такие клетки часто располагаются отдельно, имеют закрученные края. В эту группу клеток включали дополнительно обособленные ядра и “тени” ядер при цитолизе.

Учитывали следующие характеристики клеточного состава влагалищных мазков у коров в послеродовом периоде: изменения в содержании отдельных типов поверхностных клеток, цитолиз или наличие ядер без цитоплазмы и их "теней" и появление лейкоцитов. Каждый тип клеток представляли в процентах от суммы. Лейкоциты и другие клетки

крови отмечали отдельно. При обследовании одного животного осуществляли взятие двухтрех мазков.

Для диагностирования яичников у животных определяли процентное содержание собственно поверхностных клеток с четким ядром и ядер без цитоплазмы и их «теней». При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и ядер без цитоплазмы и их «теней» не более 1,3% диагностировали предовуляторный период полового цикла и делали заключение о наличии благоприятных условий для оплодотворения коров. При содержании собственно поверхностных клеток не более 7,5% и обособленных ядер и их «теней» в пределах 3,1 – 8,5% диагностировали беременность и судили о благоприятных условиях для развития плода.

Влагалищные мазки были взяты у 143 коров в определенные периоды после родов и у 56 животных – на разных сроках беременности. Забор мазков осуществляли у семи лосих: в июне-августе у пяти лактирующих лосих и в период гона у двух самок в возрасте 16 месяцев в специально оборудованном станке на лосеферме.

Для характеристики возобновления эстральных циклов у коров определяли длительность временного промежутка в днях от родов до появления признаков проявления половой охоты – отказ от корма, беспокойство, снижение удоя, изменение двигательной активности и поведенческих реакций у животных (проявление рефлекса вспрыгивания на других животных стада или состояния неподвижности в конце истинной половой охоты). Исследовали возрастные особенности возобновления эстральных циклов у 45 коров трехшестилетнего возраста в течение 5 лет. Учитывали периоды выделения цервиковагинального секрета, осуществляли отбор проб секрета и исследовали концентрацию водородных ионов (рН), показатель преломления цервико-вагинального секрета в отраженном свете на рефрактометре ИРФ-22. Проводили забор мазков и осуществляли подсчет количества разных типов клеток эпителия, выстилающего краниальный отдел влагалища.

Определяли длительность циклов и половой охоты (эструса) в цикле у 73 животных. Отмечали особенности проявления циклов - овуляторный (нормальный) заканчивается овуляцией и оплодотворением; ановуляторный - без овуляции; ареактивный цикл - без стадии возбуждения; нерегулярный цикл - с изменением длительности и т.д.

Проводили эксперименты по изучению влияния на функциональное состояние яичников и возобновление эстральных циклов у коров в послеродовой период дополнительного использования в рационе экспериментальных препаратов с включением калиевой соли уксусной кислоты или животных тканей и растений, содержащих биологически активные вещества:

1. 20%-й водный раствор калиевой соли уксусной кислоты по 200-250 мл на корову в сутки. Водный раствор соли смешивали с любым наполнителем (концентрированные корма, сенная резка, травяная мука и т.д.). Общие затраты уксуснокислого калия составили 600-750 г на животное. Препарат использовали в кормлении коров в течение 15 дней в определенный физиологический период после родов. Проведено три серии опытов, протяженностью от трех до шести месяцев. Обследовано 21 животное.

2. Смесь свежих или свежезамороженных измельченных тканей плаценты (плацентом с соединительно-тканными оболочками и остатками околоплодных вод) с наполнителем (травяной мукой, сенной резкой и т.д.) в соотношении 1:1. Препарат использовали в зависимости от физиологического состояния коров в течение 33-44 дней до и после родов. Общие затраты препарата на животное за весь период составляют 16,2-18,6 кг. Чистые затраты плаценты равны 8,1-9,3 кг, что несколько превышает вес плаценты (последа), отделяемого у коров после родов (5,8-7,3 кг). Проведено 4 серии экспериментов. Общее число обследованных коров составило 43 (из них 23 получали обычный рацион - контроль).

3. Смесь плаценты с любым наполнителем в соотношении 2,5:1,0. Полученную смесь высушивали при температуре не выше 50º С, измельчали до порошкообразного состояния и фасовали на дозы. Препарат использовали в качестве добавки к кормам животным в течение первых 20 дней после родов или с первого дня половой охоты (начала истечения цервико-вагинального секрета – течки) не более 5 дней. Общие затраты препарата на животное в течение 5 дней составляют 1,75 кг. Длительность эксперимента составила 4 года. Общее количество обследованных коров равно 46.

4. Кормовой препарат из надземных частей растения рапонтик сафлоровидный. Препарат вводили в рацион коров за 4-16 дней до родов, начиная с 0,1 кг в 1 сутки, и постепенно доводили до 1,0 кг в день прохождения родов и последующие 20-30 дней послеродового периода. Общую длительность скармливания препарата установили в 39-41 день. Расход муки из рапонтика на корову за весь период составил в среднем 34,0 кг. Опыты выполняли в течение двух лет. Количество животных в эксперименте составило 34. Из них 14 коров находились на рационе без добавления стимулятора (контроль).

5. Препарат на основе использования надземных частей растения серпуха венценосная. Скармливание проводили не более 10 дней животным после родов в зависимости от их физиологического состояния. Затраты препарата за весь период обработки составляли не более 200 г на животное. Эксперименты проводили в течение трех лет на 15 животных.