8 | дотронина в крови. Принцип метода заключается во взаимодейостi вии антигена (тонадотропина сыворотки крови исследуемой кобы| лы} с комилементерными ему кроличьими антителами, сорбирован, | ными на внутренней поверхности лунок полистироловых планшетов. . образующийся комплекс антиген-антитело выявляется с помощью таких MG антител, конъюгированных с ферментом пероксидазой, Форментативная активность устанавливается по изменению окрас' ки, соответствующей данному ферменту субстратной смеси, визу| р ально или инструментально на фотоэлектроколориметре, Ласораторные испытания иммуноферментной тест-системы иро-водились на сывороточном банке, полученном от 39 жеробых кобых Гомельского конного завода. В качестве положительного ковтроия использовался препарат "Пролазан", отрицательного - сыворотка жоребца. Раакция ставилась в дубле. Полученные данные по изменению значений экстинкции сывороток приводоны в табл. 2.
Таблица 2 Уровень экстинкции сывороток крови жеребых. кобыл
в сравнении с препаратом "Пролазан" и сывороткой жеребца
| Сыворотки | nen жеребца, | i | Исследуемые | gente nent снворотки | eninge жеребых кобыл |
|---|---|---|---|---|---|
| i | 2 | 3 | 4 | 5 | 6S А |
| 0,135 | 0,140 | 0,150 | 0,875 | 0,927 | 1,217(Прол.) |
| ete | ae | Otay | Oa | oes | pil . : |
| oe 0. 138 | 0 0 158 | 0 , 145 | nies 0.873 | 0.673 ns ee | 0.230 ee |
| исследуемые | сыворотки | жеребых кобыл | : | ||
| 7 | 8 | 9 | Io | ООН | ЕО |
| 0,270 | 0,67 | 0,420 | 0,58 | 0,260 | 0,512 , |
| 0,312 | 0,699 | 0,197 | 0,677 | 0,570 | 0,282 : |
| 0,370 | 0,315 | 0,561 | 0,489 | 0,491 | 0,147 | |
| 0,585 | 0,742 | 0,212 | 0,851 | 0,458 | 0,122 : |
| _—___кокккокдиддид—дддиыААА———— |
Анализ результатов, приведенных в таблице, свидетельствует о том, что величины экстинкции зависят от гонадотропной ак-
ии
TMBHOCTH сывороток. Показатели экстинкции ‘сыворотки жеребца ‘находятся на уровне 0,108-0,158, наибольшее значение экстинкции ~ 1,217 - имеет препарат "Пролазан". Из исследуемых снвороток крови жеребых кобнл достаточно высокий уровель гонадотропина обнаружен в 33, что составляет 84,5 %.
.В дальнейших исследованиях мн использовали для постановки отринательного контроля наряду с сывороткой крови жеребца сыворотку крови холостых кобыл.
Усредиенные показатели экотинкции сыворотки крови у ловаKol различных групи при проведении иммуноферментного анализа (ИФА) призодены в табл. 3,
Таблица 3
Показатели экстинкцие сыворотки крови B ИФА на содержание гонадотропина у лошадей различных трупи
| ОН ОСЕР ЕЗЕЕ ЕВА Групи лошадей п Показатели via экс- Достоверность SPABHEHLD СRSpeOuMIE разницы ко- по — ta PZ ть ART ae Ne aE ee OE OT OES A eS ee eee ee Ny |
|---|
| `Холостнз кобылы 12 0,120+0,006 9,20 0,001 |
| Жеребцы 8 0,1324+0,007 8,85 0,001 |
| Жоребые кобылы 39 0,47440,038- - - Sa |
| Из табл. 3 видно, что срёдние значения показателей экс- . тинкции у жеребых кобыл достоверно выше, чем у холостых или жерэбцов, соответственно в 3,9 раза ( td= 9,20; р 0,001) и 3,6 pasa ( ta= 8,85; рх 0,001). Достоверная разница в иммуноферментном анализе значений экстинкции сыворотки крови жеребнх кобыл в сопоставления с хо- лостыми кобылами и жерэбцами свидетельствует о высоких диаг- ностических возможностях разработанной иммуноферментной тест- системы при определении жеребости. : Производственная проверка иммунологического` экспресс-ме- тода ранней диагностики жеребости кобыл показале положительные результаты. Совпадение данных по определению жеребоств, полу- ченкых при помощи иммуноферментной тест-системы, с показателя- |
.
и
ми ректалькой диагностики составило 88-90 % на сроках в интерpane от 12 до 36 дней после случки. 3. Определение жеребости кобыл по уровню рогестерона в крови методом тазожидкостной хроматографии Для определения эффективности выявления ранних стадий жеребости по уровню прогестерона в крови мы провели исследованио концентрации его в сыворотке крови кобыл методом газожидкостной хроматоградия. Анализ полученных результатов по динамике концентрации прогестерона у холостых кобыл овидетольствует о том, что с0дерхание гормона в снворотке зависит от фазы полового цикла. В период фолликулярной стадии цикла, продолжающейся 6-8 дней, cose” “AMMO прогестерона в сыворотке варьирует в среднем of 2 до 4 нг/мл. В период лютеиновой стадии цикла, длящейся 14-16 дней, коннентрация прогестерона повышается от 5,4 до 11,6 нг/мл. Уровень прогестерока B крови в лютеиновой фазе достигает максимума за 3-4 дня и за такой же срок снижается. Высоко содерлание гормона в середине лютеиновой стадии сохраняется с II no 20 день полового цикла, Концентрация прогестерона в CH~ воротке в этот период составляет 9-ТГ нгИмл, Результаты анализа содержания прогестерона в крови кобни Bны порохв табл.fis табл.Fassel херебости4. 4 видно, чтопосодержаниесравнению прогестеронас холостыми представле-у холостнх кобнл составляет в среднем на фолликулярной фазе цикла 3,7240,44 нг/мл, на лютеиновой - 10,7041,14 нг/мл. На ранней стадии керобости отмечается достоверный подъем уровня прогестерона по сравнению с фолликулярной и лютеиновой фазами нолового цикла соответственио в 4,2 раза ( td = 6,86; p 2 0,001) ив 1,45 раза ( ta = 2,38; pZ 0,05). Достоверное повышение концентралии прогестерона у кобыл на ранней стадии гестации по сравнению с холостыми позволяет использовать данный показатель в качестве диагностического критерия при выявлении жеребости.
