4) ; произвести сравнительную оценку иммунологического экспресс-метода диагностики зажеребляемости и других методов определения жеребости кобыл (радиоиммунологического, биологического, газохроматографического, ультразвукового). при разработкеНаучная новизнаиммунологическогоработы. Впервыеэкспресс-методапредложено использоватьранней диагностики херебости кобыл иммуноферментную тест-систему для определения сывороточного гонадотропива в крови. Проведен анализ основных достоинств и нецостатков различных методов диагностики зажеребляемости кобыл. Изучено содержание лютеинизируюшего гормона и прогестерона в крови у кобыл на разных стациях полового цикла и жеребости и определено значение данных показателей как диагностических критериев ири выявлении зажеребляемости. ультразвуковой диагностикиУстановленажеребостивозможностькоонлиспользованиязхотахокардиогра-для фа "Риты". Практическое значение. По результатам исследований был разработан иммунологический экспресс-метод ранней диагностики жеребости кобыл, позволяющий быстро и надежно проводить ,. определениеНа зажеребляемости в производственных условиях. мендацииосновепо раннейполученныхэкспресс-двагностикеданных разработаныжеребостии изданыкобыл"Реко-иммунологическим, газохроматографическим и ультразвуковым методами", одобренные учебно-методическим Советом зооинженерного бина факультетаи утвержценныеМосковскойВсесоюзнымветеринарнойтрестом конныхакадемиизаводовим.К.И.Скря-и ипподромов. К.Б.Свечина,Материалы диссертационной работы включены в учебники лос", 1984 иИ.Ф.Бобылева,А.В.Бакая, И.ФБ . Бобылева,М.Гопки "Коневодство",В.Ф.Красоты иM.,др. "Ко"Кивстноводство", М., Агропромиздат, 1985. й доложеннАпробация работы. Ооновные положения диссертации они нарного, и сдобрены на юбилейной науч; онференции ветеризетов, посвямоннойвотеринарно-бислогического60-летию MBA (Москла,в 1980);‚нженерног<в BUS факуль-DEERE
. 2
четных научных конференциях МВА (Москва, 1983, 1984); Всесоюзной научно-технической конференции молодых ученых "Актуальные вопросы профилактики и лечения болезней сельскохозяйственных животных" (Москва, 1985); производственных совещаниях специалистов конного завода "Альбертовец" и государственной ветеринарной станции г. Олавы (ЧССР, 1986); межкафодральном совещании сотрудников кафедр разведения и генетики сельскохозяйственных животных, акушерства, гинекологии и искусственного. осеменения сельскохозяйственных животных, кормления, зоогигиены, коневодства Московской ветеринарной академии (Москва, 1986); опубликованы в материалах Х^хУ конференции Европейской ассоциации животноводства, (Гаага, 1984). - Публикации. По теме диссертации опубликованы 7 работ. Объем и структурадиссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и мотодов, результатов исследований и их обсуждения, выводов, рекомендаций производству, списка литературы. Текст диссертации изложен на ‘ II? страницах, содержит 20 таблиц, иллюстрирован 6 рисунками, 4 фотографиями. Список литературы включает IOI источник. МАРЕРИАЛЫ И arrarae | ¥ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИИ Наши исоледозания проводились на клинически здоровых лошадях Московского, Гомельского, Старожиловского ковных заВСдов, Центрального московского ипподрома, совхоза "Призыв" и колхоза им. М.И.Калинина Ярославской области, конноспорТИВНЫХ ШКОЛ Московской ветеринарной академии и ДО "Зенит", : Подопитные лошади содеряались в благоустроенных конюш/HAN, отвечающих зоогигиеническим требованиям, и обеспечива| лись полноценным кормлением, : Анализ зоотехнических особенностей маточного поголовья ‚конных заводов, использовавшегося в экспериментах, проводил‚ СЯ по даныым Государственных племенных книг, племенных свидетольств, лурналов бонитировки я ‘утем личного обследования лонадей, Уровень лютеинизирующего гормона (ЛГ) в сыворотке крови ROOM определяля радиоиммунологяческим методом в тетероген-
ной иммунологической системе с использованием готовых коммерческих наборов фирмы JRE-C2A-Sorin (Франция) для тестироsanta ZT зеловека»
Для изучения изменений концентрации ЛГ в течение половото цикла у 5 кобыл конноспортивной школы ДСО "Зенит" брали кровь с интервалом в два дня на протяжении 24 дней. Опрецеление динамики ЛГ в крови на разных стадиях жере‘` бости по сравнению с холостыми проводили у 58 кобыл Московского, Гомельского конных заводов и центрального MOCKOBCKO ‘ TO ипподрома. Разработка иммунологического экспресс-метода ранней диагностики жеребости кобыл, основанного на использовании иму и | на eo ОИ гоP о роточного{) получениегонадотропинавысокоактивногоиз СЕК "Пролазан"антигенного(производствапрепарата фиринсыво"Dessau ", ГДР); | ; ; | 2) наработку моноспецифических антител к нему; 3) конотруирование и апробацию нимуноферментной тест системы. Получение высокоактивного антигенного препарата проводили путем хроматографической очистки и фракционирования "Пролазана". Белковые компоненты CHK "Пролазан" осаждали раствором сульфата аммония 60 % насыщения. Очистка и выделение активных в гонадотропном отношении фракций проводились методом ионообменной хроматографии на колонке с QAE -сефадексом с последующей хроматофокусировкой полибуфером на полиионообменнике. При проведении хроматофокусирования использовали ЦБИ-96 с полибуфером - 74-НСе с интервалом pH от 4 go 7. В процессе очистки добивались максимального удаления из "Пролазана" . балластных сывороточных белков, снижающих специфичность иммунного ответа. Проверку гонадотроиной активности получаемых фракций выполняли при помощи биологического тестирования на ивфантильных самках крыс по изменению зеличины и весов яичнихо. боакцию с наибольшей гонаотройной активностью аспользозал» в качестве антагена для иммунизации хроликов
