ной иммунологической системе с использованием готовых коммерческих наборов фирмы JRE-C2A-Sorin (Франция) для тестироsanta ZT зеловека»
Для изучения изменений концентрации ЛГ в течение половото цикла у 5 кобыл конноспортивной школы ДСО "Зенит" брали кровь с интервалом в два дня на протяжении 24 дней. Опрецеление динамики ЛГ в крови на разных стадиях жере‘` бости по сравнению с холостыми проводили у 58 кобыл Московского, Гомельского конных заводов и центрального MOCKOBCKO ‘ TO ипподрома. Разработка иммунологического экспресс-метода ранней диагностики жеребости кобыл, основанного на использовании иму и | на eo ОИ гоP о роточного{) получениегонадотропинавысокоактивногоиз СЕК "Пролазан"антигенного(производствапрепарата фиринсыво"Dessau ", ГДР); | ; ; | 2) наработку моноспецифических антител к нему; 3) конотруирование и апробацию нимуноферментной тест системы. Получение высокоактивного антигенного препарата проводили путем хроматографической очистки и фракционирования "Пролазана". Белковые компоненты CHK "Пролазан" осаждали раствором сульфата аммония 60 % насыщения. Очистка и выделение активных в гонадотропном отношении фракций проводились методом ионообменной хроматографии на колонке с QAE -сефадексом с последующей хроматофокусировкой полибуфером на полиионообменнике. При проведении хроматофокусирования использовали ЦБИ-96 с полибуфером - 74-НСе с интервалом pH от 4 go 7. В процессе очистки добивались максимального удаления из "Пролазана" . балластных сывороточных белков, снижающих специфичность иммунного ответа. Проверку гонадотроиной активности получаемых фракций выполняли при помощи биологического тестирования на ивфантильных самках крыс по изменению зеличины и весов яичнихо. боакцию с наибольшей гонаотройной активностью аспользозал» в качестве антагена для иммунизации хроликов
| 5 | mete лени о . | , | ay ae bic ties от BECTON GENE GE x ми р тропияу антител поущеоввляяй На ON -софарозе с сорбировечHolt Ha ВОЙ ОНВОрОкОЙ жередца» Спонифичность получат ной are. ee cee e en a ee ВИНА СТА eibiinwo ромар ee Г . ee Wei р р м ‘ , nonewoe Оби ТОВУИЧИИ ША SNE НУИЮНОМЕ eee Se . we и a a . . . . по| методике,ИИразработавнойyeeлабораторяей. .рН ТЕСТОиммуножными’ НЕИЗК: SKU. АМН СССР, и предусмазривало_ приготовление конзюгазов зртител с форментом пороксидозой; потбизонание rarmaennedyvesmont a ИЕi AHTNGHRODOTHEр ваHA гидрофобнуюгидоофабнтяв поверхностьTE о оронполистироловных точном банке и окончательную доводку параметров тест-састеми. ‚ микротитровальных планиетов; лабораторную апробацию на снвоуоиДиагностикупи занеребляемостиона МООИ тазохроматографичестииTASOAPOMETOT PNG мото-NS дом проводили по определению урозня прогестерона в сыворозие ||) хрови кобыл. Стеронхы экстратировали из онворотси крови хобыл | © по методу Резникова А.Г. (1978). Дальнейшую очистку прогесте| poua пролзродили хроматотрафическим разделением отеровдов сн| вбротим в тонком слое сизикагеля на влаосунох "зазягой UY 2354 | Количестзенное определение коннонтрации прорзоторой ос . | щесталяли газохром атогоафическим методом на вере - : : . | хроматографе " Руе Unicam " с учетом потерь и ВВ | вии и очистив гормона. е | Цияамику уровня прогестерона в крови в течение полового | Цикла исследовали на двух кобылах конноспортезной школы МВА. | С этой целью на протяжении 24 дней брали кровь у подолнтных 4 ` кобыл через каждые два дня. a Для анализа изменений концентрации прогестерона ка ран‚ и He стадии жеребости определяли содержание гормона в снворотке крови 20 жеребых кобыл Гомельского конного завода на сроках после случки от 8 до 42 дней в сравнении с 24 холостыми кобы+, | лами центрельного московского иппопрома. } Ультразвуковую диагностику зажеребляемости кобыл осуществляли в Московском конном завоце, а в целях проверки универенот метода проводили диагностику стельности коров фермы Е; Золотой рог" Гомельского конного завода и колхоза им.С.М.КиR= 1646
, |
О[
| рова №Московскойетаобласти с нЕиспользованием к‘прибора фирмы "Медаta" (франция) и разработанного Ленинградским ВНИИТВЧ эхотахокардиогрефа "Ритм".
Полученные данные обрабатывали методами вариационной статистики ка микрокалькуляторе "Электроника МК-56" и на электронно-вычислительной машине СМ-4. р oan Ал й РЕЗУЛЬТАЗЫ ИССЛЕДОВАНИИ | I. Радиоиммунологическое определение уровня лотекнизирующего гормона в сиворотке крови кобыл
Изменения концентрации ЛГ у кобыл в течение полового цикла исследовали редиоиммунологичесвким методом в гетеролевной иммунологической"Зенит". Полученныесистемеданныеу 5показали,кобыл KOHHOCHO,что Авеивной школыкониеитра-ДСО ция ЛГ в сыворотке крови отмечается в овуляторный период, варьируя в среднем от 4,4 нг/мл до 9,8 нг/мл. Повышенное содер. хание ЛГ в крови кобыл наблюдается в течение 5-6 дней. Базальный уровень гормона в можовуляторный период имвет значения B среднем 1,2320,24, нг/мл с колебаниями от 0,6 до 2,4 нг/мл. Содержание ЛЕ в крови на ранних стадиях жеребости изучаля у 39 кобыл, срок после случки которых составлял от 6 до 42 дне" ну 14 из них - на более поздней через 60 дней после предыдуHero определения в сопоставлении с концентрацией гормона у 19 холостых кобыл. Результаты исследований приведены в табл. I. Анализ табл. I показывает, что наименьшее увеличение концентрации ЛГ в крови жеребых кобыл по сравнению с холостыми н8: блюдается на сроках с 6 по 14 день после оплодотворения. Найболее заметно на ранней стадии жеребости уровень ЛГ возрастает в период с 15 по 23 ис 33 по 42 дни, достигая соответственно 11,7441,79 и 16,0841,68 не/мл (различия по сравнению с холостыми кобылами статистически достоверны). На сроках жеребости с 24 по 32 дни отмечается некоторое снижение количества лютеинизирующего гормона в крови ис сравнению с содержанием ЛГ в сыворотке крови жеребых кобнл в интервале с 15 по 23 день гестации. ` На более поздней стадии неребости в период с 66 по 90 день наблюдается интенсивное возрастание концентрация Тв
