Современные технологии получения и сохранения телят

Продолжение · 2

Методы выявления коров и телок в охоте

Выявление коров и телок в охоте и своевременное их осеменение – это решающие факторы получения высокой оплодотворяемости животных. Наиболее полно эти вопросы освещены в работах Н.Ф. Ключниковой (2003) и В.А. Середина (2004).

В настоящее время применяются следующие методы выявления коров и телок в охоте.

1. По внешним признакам. Корова, пришедшая в охоту, возбуждена, более подвижна, чем обычно. Пищевая доминанта тормозится, отмечается повышенная реакция на других коров. Заметно выражено стремление общаться с рядом стоящими особями. Животное тянется к обслуживающему персоналу, особенно к оператору по искусственному осеменению. Корова или совсем не дает молока или уменьшает его дачу, при этом оно становится более соленым и имеет даже горьковатый привкус. Корова в охоте стоит спокойно и допускает прыжки других животных на себя – у неё явно выражен признак «рефлекс неподвижности». В это время слизь из половых путей становится мутной и загустеваемой.

2. Методом группового контакта. Содержание скота на пастбище, активные прогулки зимой, моцион животных на выгульных площадках способствуют яркому проявлению половых рефлексов. При этом на корову в охоте запрыгивают другие коровы (не стельные и стельные).

3. Методом анамнеза – опроса обслуживающего персонала. Для выявления коров в охоте важное значение имеет число наблюдений за животными в течение суток и продолжительность одного наблюдения при трехкратных наблюдениях по 30 минут (в 8, 14 и в 21 час) выявляют 85 % животных, а по 15 минут – 65 %. При пятикратных выявлениях в течение суток процент пропусков охоты приближается к нулю. Особенно важно выявлять коров в охоте до утренней и после вечерней дойки. В это время половое возбуждение и рефлекс «неподвижности» проявляют 68 % животных.

4. Использование быков-пробников. Пробник – это специально оперированный производитель, у которого половой член отведен в сторону или другими способами нарушена функция выведения спермы. Самец – самый древний и сильный стимулятор половой функции самок. Однако использование пробников в скотоводстве весьма проблематично. Пробники, как и обычные производители, нуждаются в усиленном кормлении и хорошем уходе. Нельзя забывать о соблюдении техники безопасности. Как контролировать поведение огромного возбужденного зверя массой более 500 кг?

5. С помощью коров – выявительниц охоты. Выбракованных коров обрабатывают тестостероном пропионатом. (40 мг/мл в кукурузном масле) внутримышечно по 5 мл в течение 20 дней, а затем 1 раз в две недели вводят 500 мл тестостерона пропионата. Такие животные работают как быки, выбирая коров в охоте.

6. Мечение коров мелом. – если метка размазана и волосяной покров взъерошен, считают, что корова пришла в охоту. Этот метод применяется на некоторых фермах в США.

7. Применение детекторов охоты. Детектор охоты КаМАР состоит из заполненной красной жидкостью капсулы, которая прикреплена к ткани, имеющей губчатое строение. Его прикрепляют на крестец коровы и когда на корову в охоте прыгают другие животные, то тяжестью тела давят на капсулу. Если это давление продолжается около 8 секунд, то краска выливается из капсулы и окрашивает губку в красный цвет. Оригинальные конструкции детекторов охоты в нашей стране предложены Ю. Максимовым (1977); В.И. Державцевым и В.П. Белоус (1983); А. Спиваковым и В. Войтенко (1984).

8. Мечение крупа коров специальными красками. Краски яркие: светло-розовые, светло-зеленые, светло-голубые. Из аэрозольного баллончика окрашивают полоску волос 520 см в области крупа. Краска сохраняется на животных до трех недель. Дважды в день во время доения животных осматривают. При наличии взъерошенных волос на окрашенной полосе судят о наличии рефлекса неподвижности. Ошибка такого способа выявления охоты – 8 %. Этот способ хорошо зарекомендовал себя на крупных фермах Новой Зеландии. По эффективности он не уступает хорошо организованному выявлению охоты с помощью быка – пробника, является более удобным и менее трудоемким.

9. Инструментальный метод. В 1961 году в нашей стране предложен электрический метод определения пригодности коров для осеменения. В основе его измерения электропроводимости слизистой оболочки преддверия влагалища в период течки. Сопротивление в межтечковый период более 450 Ом. Затем оно снижается до 300 Ом во время течки, а после овуляции вновь повышается. Разработаны приборы «Эстрометр -2», «Охотник» и др.

10. По содержанию прогестерона в молоке. В последние годы все большее распространение получает лабораторное исследование молока с целью уточнения осеменения. Для этого образцы молока собирают ежедневно, начиная с 18 дня после последней охоты в течение 3-4 дней до заметного снижения концентрации прогестирона. Осеменение проводят в течение следующих 24 ч.

11. По температуре молока. Для этого монтируется датчик электронного измерения в коллектор доильного аппарата или прямо в доильные стаканы. По данным Н.Ф. Ключниковой (2003), во всех случаях измерения температуры молока у коров в «охоте» величина его была выше нормы на 0,8-1,0⁰ С.

12. Использование телевидения. Круглосуточное наблюдение за поведением коров с помощью телевизионной системы – несомненное достоинство этого метода. Однако его применение затрудняет дороговизна оборудования и невозможность использования на пастбище.

13. Применение собак. Метод основан на выявлении коров в охоте по запахам феромонов.

Косвенным показателем точности отбора коров для осеменения может служить кровотечение из половых органов после осеменения. Выделение крови до 24 ч и после 72 ч свидетельствует о безрезультативности осеменения.

Факторы, влияющие на оплодотворение

Оплодотворение - сложный процесс взаимодействия спермиев и яйцеклетки, в результате которого обра­зуется качественно новая клетка - зигота (в переводе с греческого - упряжка из двух быков), способная к реализации заложенной в ней генетической про­граммы.

Долгое время человек не мог раскрыть тайны этого процесса. Так, еще в XVIII веке существовало два мнения. Сторонники одного из них (преформи­сты) считали, что все части зародыша находятся в готовом виде в яйцеклетке. Сторонники другого направления (аминкулисты) были убеждены в том, что все части зародыша «упакованы» в спермии. Один из представителей этого направления Николай Андре утверждал, что врожденные уродства не что иное, как результат повреждений, полученных спермиями в схватке с сопер­никами. Бурное развитие биологии на рубеже XIX-XX вв. показало, что обе стороны были неправы.

Оплодотворяемость зависит от многих факторов: породы, возраста, упи­танности животных, размера стада, системы содержания, уровня продуктив­ности, сезона года, биологического качества яйцеклеток и спермиев, условий проведения случки или искусственного осеменения, состояния половых пу­тей и т.д.

Наличие породных различий по оплодотворяемости можно видеть из анализа результатов осеменения коров в хозяйствах Кубы - голштинская по­рода - 45,5%, швицкая - 64,9%, зебу - 61,3% (Цит. по Н.И. Полянцеву и В.А. Калашнику, 1991).

Наивысшая оплодотворяемость отмечается у телок (80%) и у коров 3-4 - летнего возраста (60-70%).

Лучших результатов осеменения достигают при осеменении животных, находящихся в состоянии средней или выше средней (заводской) упитанно­сти. Как ожирение, так и исхудание снижает этот показатель воспроизводст­ва стада.

С увеличением размера стада оплодотворяемость коров снижается, так как меньше уделяется времени отдельным животным, возрастает воздействие стресс-факторов. При пастбищном содержании дойного стада оплодотворяе­мость выше, чем при стойловом.

Высокая продуктивность затрудняет оплодотворение коров особенно в первые 2 месяца после отела.

В первый месяц после отела половые пути коровы еще недостаточно подготовлены к осуществлению функций размножения, поэтому оплодотво-ряемость не превышает 20-30%, на втором-третьем месяцах она возрастает до 60-70%.

Наиболее благоприятное время для осеменения самок - весна и осень. Самая низкая оплодотворяемость отмечается зимой.

Большое влияние на оплодотворяемость оказывает генотип. По оплодо-творяющей способности быков-производителей можно разделить на три груп­пы: низкоплодовитые, (51-60%), среднеплодовитые (61-70%) и высокоплодо­витые (свыше 70%). В США комплектование центров по искусственному осеменению ремонтными бычками с учетом результатов их оценки по опло­дотворяющей способности спермы позволило за сравнительно короткий срок поднять уровень оплодотворяемости до 65-72%.

При выборе времени осеменения следует учитывать физиологические сроки сохранения биологической полноценности спермиев и яйцеклеток. Так, спермии быка сохраняют оплодотворяющую способность в течение 24-48 ч, яйцеклетка живет не более 8 ч.

Оплодотворяемость у коров и телок снижается при принудительной дос­тавке к месту осеменения, грубом обращении (окрики, побои). Физиологиче­ский механизм нарушений процесса оплодотворения в этом случае сводится к следующему: стресс-факторы тормозят предовуляторный выброс в кровь лютеинизирующего гормона, что обуславливает задержку овуляции. Под влиянием болевых ощущений и страха выделяется гормон надпочечников -зпинефрин, который вызывает спазм половых путей и выброс введенной спермы (Д.А.Устиноа,1976).

Работы немецких ученых показали, что побои, нанесенные животному утром, снижают вероятность оплодотворения, если даже осеменение прове­дено после полудня.

Большое влияние на оплодотворение оказывает общее состояние орга­низма самок. Животные низкой упитанности, изнуренные лактационной дея­тельностью, как правило, плохо оплодотворяются. Проникновение в орга­низм самки некоторых веществ (мышьяк, ртуть, коллоидальное серебро, же­лезо, свинец, никотин, фосфор) снижает этот показатель. По данным А.С. Студенцова (1970) введение в организм желтого фосфора, свинца, нико­тина не только снижает оплодотворяемость, но и в 50% случаев вызывает аборт.

СТИМУЛЯЦИЯ ПОЛОВОЙ ФУНКЦИИ ЖИВОТНЫХ

Приемы, стимулирующие половую активность быков

Для стиму­ляции воспроизводительной способности самцов применяют массаж семен­ников. Массаж нужно проводить ежедневно, после предварительного обмы­вания мошонки водой комнатной температуры. Массируют, разминают и поглаживают. Быкам массаж проводят за 5 минут до садки в течение 5-10 ми­нут. Массаж возбуждает лимфатический и венозный тонус, рефлекторно вы­зывает повышение кровяного давления и усиливает приток крови к органам: половая функция активизируется, в результате увеличивается количество и улучшается качество спермы.

Особенно хороший результат массаж семенников дает у молодых, впер­вые назначенных для случки животных. Нельзя применять массаж при вос­палительных процессах в семенниках.

Половое возбуждение у быков можно усилить, выдерживая их около животного перед садкой в течение 5 минут и предоставляя им несколько хо­лостых прыжков (без выделения спермы), что повышает количественные и качественные показатели спермы.

На Дальнем Востоке в целях повышения половой активности и спермо-продукции быков рекомендуется использовать растительные стимуляторы: лимонник из семейства магнолиевых и элеутерококк колючий из семейства аралиевых.

Препарат лимонника скармливают производителям в течение 15 дней. Готовится он следующим образом. Собранные осенью ягоды размалывают вместе с косточками. Полученная мука скармливается ежедневно быку жи­вой массой 900 кг по 30 г в сутки вместе с концентрированными мучными кормами.

Препарат элеутерококка колючего готовится следующим образом. Соб­ранные осенью корни растения высушиваются и размалываются на мельнице. Перед скармливанием мука заливается кипятком. Это улучшает экстрак­цию действующего начала растения - элеутерозидов. Препарат скармливает­ся вместе с концентратами из расчета 30 г муки в сутки на быка живой мас­сой 900 кг в течение 15-20 дней. В опытах, проведенных на Хабаровской и Приморской станциях по искусственному осеменению сельскохозяйственных животных, спермопродукция быков-производителей, получавших элеутеро­кокк, возрастала на 50 % (Ю.Л. Максимов, 1965, В.И. Коровко, 1973).

Методы повышения половой активности и борьбы

с перегулами коров

Бесплодие коров проявляется в двух формах:

1. Корова не проявляет половой активности (охоты и течки) и ее не осе­меняют.

2. Корова приходит в охоту, осеменение производится, но оплодотворе­ние не наступает, т.е. корова перегуливает.

В зависимости от формы проявления бесплодия применяются различные методы стимуляции половой активности. Стимуляцию следует проводить не ранее чем через 45 дней после отела, то есть когда половые органы полно­стью восстановят свои функции (Н.И. Полянцев, В.А. Калашник, 1991).

Наиболее сильными стимуляторами воспроизводительной функции яв­ляется правильное кормление, содержание животных в сочетании с активным моционом и использованием быков-пробников.

В том случае, если корова не приходит в охоту необходимо применять следующие мероприятия:

1. Делать ректальный массаж матки и яичников в течение 2-3 мин с интервалом в 2-3 дня.

2. Смазывать шейку матки слабой 2% настойкой йода (ватка увлажняет­ся настойкой йода и зажимается в корнцанг, смазывание производится через влагалищное зеркало).

3. Промывать влагалище стерильным 1% раствором поваренной соли с температурой 43-44°С из кружки Эсмарха.

4. Применять молозиво. Оно содержит эстрогены, которые, попав в ги­пофиз, вызывают выделение фолликулостимулирующего гормона. Молозиво берут со второго удоя от благополучно растелившихся коров, добавляя на 1 литр 1 000 000 ИЕ антибиотиков, и вводят на 20-30 мл в верхнюю треть шеи подкожно.

5. Для стимуляции охоты и профилактики послеродовых заболеваний органов размножения коров рекомендуется выпаивать собственное молозиво в количестве 1 литра (М.Т. Ключников и др., 2000).

6. Скармливать измельченные корни элеутерококка по 30-40 г в сутки с комбикормом в течение 10 дней.

7. Временно включить в рацион коров, не приходящих в охоту, 10-15 кг свеклы или 500 г сахара.

В случае если корова приходит в охоту, осеменяется, но не становится стельной необходимо применять следующие технологические приемы:

1. Производить массаж матки через прямую кишку за 5-7 мин до осеме­нения для усиления действия окситоцина.

2. Орошать влагалище 10% раствором сахара или 2% раствором двууг­лекислой (пищевой) соды. Объем раствора - 0,5 л, температура 38-39°С вво­дится во влагалище из кружки Эсмарха за 15 мин до осеменения.

3. Вводить раствор окситоцина. Вводится цервикально (в шейку матки) за 1-2 мин до осеменения в количестве 3 мл (15 ЕД) один раз в течение охо­ты.

4. Осеменять коров перед дойкой или через 2-4 часа после дойки.

5. Заменять сперму одного быка (в случае повторной охоты) спермой другого той же линии с целью предупреждения иммунного бесплодия.

6. Вводить подкожно перегуливающим коровам витамин А или каротин в количестве 30-50 тыс. ЕД.

7. Скармливать коровам препарат из корней или листьев элеутерококка. Размол (30 г) заливают кипятком (1:5), выдерживают 30 мин и скармливают в течение 15-20 дней.

ЕСТЕСТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КОРОВ И ТЕЛОК

Естественное осеменение происходит при половом акте, т.е. при непо­средственном контакте самца и самки, когда проявляется весь комплекс по­ловых рефлексов, характерных для спаривания. Основными способами есте­ственного осеменения (спаривания или случки) в скотоводстве являются вольная и ручная.

При вольной случке производитель постоянно находится вместе с сам­ками и покрывает их по мере того, как они приходят в охоту. На одного быка подбирают 35-40 коров или телок за сезон. Только при такой низкой нагрузке на быка-производителя можно рассчитывать на получение здорового потом­ства.

Вольная случка приводит к быстрому изнашиванию производителей и частой их смене. По данным американских исследователей, если быка помес­тить в один загон с 10-25 телками в состоянии охоты, то бык сделает в сред­нем 245 садок за 96 часов (Г. Миниш, Д. Фокс, 1986).

В случае использования в одном стаде нескольких производителей од­новременно, что часто бывает при таком способе случки, невозможно точно вести учет происхождения приплода и осуществлять целенаправленный под­бор пар животных.

При вольной случке значительно увеличивается возможность распро­странения заразных болезней (бруцеллез, туберкулез, вибриоз, лептоспироз, трихомоноз и др.). Поэтому, за исключением табунно-пастбищного содержа­ния лошадей, распространенного в отдельных зонах страны, применение вольной случки свидетельствует о низком уровне зоотехнической работы в животноводстве.

При ручной случке производителя содержат отдельно от самок. Спари­вание животных происходит под наблюдением персонала. Она дает возмож­ность: подбирать маток по намеченному плану и в определенные сроки; ре­гулировать половую нагрузку на производителя; предупреждать появление и распространение инфекционных заболеваний; проверять готовность самки к осеменению; учитывать приплод от родителей.

Случку проводят в загоне, выгульном дворике или манеже. Во избежа­ние травм при покрытии телок крупными быками используют специальные станки. Неспокойных животных фиксируют, иначе возможны травмы поло­вых органов, как самцов, так и самок.

При ручной случке за быком закрепляют 60-100 коров или телок. Осе­менение животных проводят дважды в одну охоту: первый раз - сразу после выявления у них охоты и второй раз - через 10-12 ч, если охота продолжает­ся.

Продолжение · 3

При ручной случке следует по возможности ограничиваться одной сад­кой, которой в большинстве случаев бывает достаточно для оплодотворения. При первой садке выделяется спермы по объему и по количеству клеток зна­чительно больше, чем требуется для одной самки. При повторных садках, следующих одна за другой, у быков-производителей уменьшается количест­во и качество спермы, что снижает вероятность оплодотворения других ко­ров и телок.

В хозяйствах для организации и проведения естественного осеменения нужны пункты осеменения. На каждом пункте необходимо иметь помещение для содержания производителей, кормов и инвентаря. Комнату для специа­листа по воспроизводству животных, где могут храниться необходимые ма­териалы и инструменты (халаты, полотенца, вата, бинты, дезинфицирующие растворы, влагалищные зеркала, микроскоп и другие принадлежности). Об­ширный двор с загоном, коновязью и станком для осеменения. Помещения должны содержаться в чистоте и периодически подвергаться дезинфекции, побелке или окраске.

ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ

Краткая история развития и преимущества метода

Тайна зарожде­ния живых существ с древнейших времен волновала человеческие умы. Су­ществует легенда о том, что за 800 лет до н.э. ассирийцы вводили губку во влагалище кобылы и после коитуса с жеребцом переносили эту губку со спермой во влагалище другой кобылы для получения высококачественного потомства.

В арабской летописи отмечается, что в 286 г. новой эры один бедуин из Северной Африки, не имея возможности получить приплод от жеребца, при­надлежащего его сопернику, ввел во влагалище одной из кобыл, пасшихся с этим жеребцом, пучок конских волос. Затем извлек его после коитуса, быст­ро перевез и ввел во влагалище своей кобылы и таким образом искусственно осеменил ее.

Как физиологический опыт искусственное осеменение впервые приме­нили в 1763 г. Стефан Якоби на рыбах, а в 1780-1782 гг. Ладзаро Спалланца-ни и П.Росси - на собаках. Однако производственное значение в животно­водстве этот метод приобрел только в результате творческой деятельности нашего выдающегося соотечественника И.И. Иванова. Он заложил теорети­ческие основы и принципы почти всех существующих приемов искусствен­ного осеменения животных. Современные методы получения, оценки, раз­бавления, сохранения спермы и введения ее в половые пути самок по суще­ству являются усовершенствованием и развитием тех методов, которые впер­вые применил И.И. Иванов. Своими работами он заслуженно завоевал миро­вую известность и его имя останется в веках как автора самого крупного от­крытия в истории животноводства. Так, используя искусственное осемене­ние, от одного барана получили 18414 ягнят и от одного быка 42 тыс. телят в год.

Искусственное осеменение животных позволяет быстро выводить новые и улучшать существующие породы животных. В нашей стране за короткий период выведены 12 новых высокопродуктивных пород крупного рогатого скота (черно-пестрая, сычевская костромская, курганская и др.).

Семенем быка улучшателя швицкой породы по кличке Джей в 1984 г. было осеменено 20 тыс. коров и от полученных от него дочерей было надое­но в среднем на 547 кг молока больше, чем от их сверстниц. Животноводам Дании, благодаря использованию искусственного осеменения и хорошей ор­ганизации племенной работы удалось за 25 лет повысить удои коров с 4000 до 6500 кг, при средней жирности молока 4,2%.

Искусственное осеменение животных предупреждает распространение инфекционных заболеваний, которые передаются при естественном спарива­нии, поскольку используется стерильный или одноразовый инструмент.

Этот метод позволяет вести эффективную борьбу с бесплодием потому, что с помощью специальных приборов или пальпацией определяют аномалии воспроизводительной функции животных и принимают меры к их устране­нию.

Ни одно открытие в животноводстве (механическое доение, уборка на­воза, раздача кормов и т.д.) не может сравниться по экономической эффек­тивности с этим методом. Поскольку значительно сокращаются потребности в производителях, сокращаются затраты на корма, помещения, человеческий труд.

Надо также учитывать то, что быки-производители - это, как правило, крупные, сильные, агрессивные животные, которые представляют опасность для здоровья и жизни человека. В 1965 г. погиб под рогами быка гл. зоотех­ник Черниговской станции искусственного осеменения. А ведь это был знающий специалист, который более 20 лет работал с такими животными. Он допустил маленькую ошибку: надел новый бушлат (новый запах) и вошел в станок к своему любимому быку по кличке Фараон, который мгновенно прижал его к стенке станка. Через 2 месяца этот человек умер.

Внедрять искусственное осеменение в скотоводстве начали с 1930 г. В 1932-1933 гг. выдающийся генетик А.С. Серебровский выдвинул идею орга­низации специальных станций, на которых должны быть сосредоточены цен­ные производители, чью сперму можно широко и планомерно использовать во многих стадах разных районов страны. В 1955-1956 гг. в нашей стране на­чали создаваться крупные государственные станции по племенной работе и искусственному осеменению. Это позволило расширить масштабы примене­ния метода, повысило его экономическую эффективность и способствовало дальнейшему развитию научных исследований в области воспроизводства животных. Особенно большую роль сыграла разработка способа длительного хранения спермы в глубоко замороженном состоянии (при -196°С) И.В. Смирнов, В.К. Милованов и И.И. Соколовская (1948-1951 гг.).

В настоящее время искусственное осеменение стало самым эффектив­ным биотехнологическим способом воспроизводства животных. В мире в от­дельные годы осеменяют до 100 млн. молочных коров, 50 млн. овец, 6 млн. свиней. В 1989 г. в СССР было осеменено 35 млн. коров и телок (87%). В ря­де стран (Дания, Голландия, Япония, Израиль, Финляндия и др.) почти всех коров осеменяют искусственно.

Получение спермы от быков

Получение спермы от производителей - важнейшая часть технологии искусственного осеменения сельскохозяйст­венных животных.

Все методы получения спермы подразделяются на хирургические, вла­галищные и уретральные.

Хирургический метод заключается в извлечении спермиев из придатков семенников убитого самца или после его кастрации. Этот метод разработал И.И. Иванов. Отпрепарированные придатки семенников измельчают, вымы­вают из них разбавителем половые клетки и этой смесью осеменяют самок. Таким путем получили сперму от диких баранов - архаров и вывели новую породу - архаромеринос.

Влагалищные методы заключаются в извлечении спермы из влагалища самки после спаривания с производителем при помощи влагалищного зерка­ла и специальной ложки или посредством губки. Губочный метод был дове­ден до совершенства И.И. Ивановым. Хорошо обработанную, чистую, про-стерелизованную греческую губку вводят корнцангом во влагалище коровы и дают возможность производителю покрыть ее. После этого губку извлека­ют и выжимают из нее сперму рукой или специальным прессом. При приме­нении влагалищных методов получения спермы отмечаются большие потери спермы и загрязнение ее влагалищным секретом и микроорганизмами, а при отжатии губки часть половых клеток повреждается. К недостаткам методов относится также возможность переноса заразных болезней.

К уретральным методам относят массаж ампул спермиопроводов, фис­тульный, электроэякуляции, спермособирателя и искусственной вагины.

Метод массажа. Известно, что во время полового возбуждения спермии из канала придатка семенника перемещаются в ампулы спермиопроводов и сохраняются там до момента эякуляции. Массажем можно вызвать сокраще­ние ампул и выделение половых клеток наружу. Впервые массаж половых протоков с целью получения спермы от быка применил Г. Кэйз в 1925 г. В последующем Ф. Миллер и Е. Эвэнс (1934) описали метод массажа ампул спермопроводов через прямую кишку.

Быка перед получением спермы выдерживают перед самкой или другим самцом (сексуальная стимуляция). Затем руку вводят в прямую кишку на глубину 25-35 см, при необходимости освобождая ее от каловых масс, нахо­дят твердый червеобразный орган - мочеполовой канал и, двигая по нему ру­кой вперед, отыскивают мягкую шейку мочевого пузыря с лежащими на ней ампулами спермиопроводов в виде эластичных трубок толщиной с палец, а по бокам от них — грушевидные пузырьковидные железы. Производят осто­рожный массаж желез спереди назад и таким же образом массируют ампулы спермиопроводов. Обычно 2-минутного массажа бывает достаточно для того, чтобы выделилась сперма. Сперму собирает помощник в спермоприемник, подставленный к отверстию препуция.

Этим методом можно воспользоваться для получения спермы от тех бы­ков, которые по какой-либо причине (слабые или больные задние конечно­сти, слишком вялое проявление половых рефлексов и др.) не в состоянии эякулировать в искусственную вагину или идти в случку.

Фистульный метод. Впервые промежностную уретростомию для полу­чения спермы быков применил И.В. Глумаков. Этим методом сперму полу­чают во время естественной садки производителя из фистулы мочеполового канала. В научных целях применяется наложение фистул на спермиопрово-ды, канал придатка семенника, другие участки внутренних половых прото­ков.

Метод электроэякуляции. Этот метод впервые был применен для полу­чения спермы от быков в 1943 г. Метод основан на том, что под воздействи­ем слабого электрического тока происходит возбуждение центра эякуляции, а также нервов и мышц, участвующих в процессе извержения спермы.

Прибор для электроэякуляции состоит из биполярного электрода и ис­точника тока переменного напряжения (от 0 до 30 V) малой силы (0,5 - 1 А ). Биполярный электрод представляет собой каучуковый стержень с вмонтиро­ванными электродами (двумя положительными и двумя отрицательными) в виде колец, расположенных на расстоянии 4 см друг от друга. Биполярный электрод вставляют в прямую кишку (перед этим удаляют фекалии) так, что­бы кольца находились в области придаточных половых желез. Делая перио­дически электрические стимулы продолжительностью 3-5 с, вызывают вы­деление спермы. Эякуляция у быков наступает после 3-5 периодов подачи тока. Сперму собирают как при массаже ампул спермиопроводов и в тех же случаях нарушения половой функции производителей.

Метод спермособирателя. Спермособиратель представляет собой трубку из тонкой резины, один конец которой полностью закрыт, а свободный рас­тянут на жестком широком кольце. Эти приборы были сконструированы А.А. Зальцманом, В.К. Миловановым и И.М. Родиным. Несмотря на жесткие рас­ширяющие кольца, спермособиратели в момент совокупления могут вдавли­ваться во влагалище, а иногда они просто разрываются. В связи с этим полу­чение спермы этим методом не нашло широкого применения.

Метод искусственной вагины. Впервые прибор с названием искусствен­ная вагина был предложен итальянцем Дж. Амантеа в 1913 г. для получения спермы от собаки. Искусственную вагину для быка создали И.М. Родин, Н.А. Комиссаров, В.И. Липатов в 1932 г. Поэтому в литературе многих стран по­лучение спермы при помощи искусственной вагины называли русским мето­дом. Это открытие имело исключительно важное значение для развития ис­кусственного осеменения, так как почти разрешил чрезвычайно трудную технологическую задачу получения спермы от самцов.

Искусственная вагина состоит из наружного (эбонитового, резинового, металлического) и внутреннего цилиндра или трубки - эластичной гладкой резиновой камеры, которую надевают на наружный цилиндр. В наружном цилиндре имеется патрубок с отверстием, через которое в межстенную по­лость (между корпусом и резиновой камерой) наливают теплую воду (100 мл) и нагнетают воздух. Для нормальной эякуляции быка необходима темпе­ратура 41-42°С и давление 40-60 мм рт.ст. На одном конце наружного цилин­дра фиксируют спермоприемник. В настоящее время спермоприемником служит одноразовый полиэтиленовый пакет конической формы, заключенный в термостатический чехол. После получения спермы концевую часть однора­зового спермоприемника отделяют и герметизируют для дальнейшей работы со спермой.

Физиология и биохимия спермы

Состав спермы. Сперма состоит из двух частей различного происхож­дения: спермиев, образовавшихся в семеннике и созревших в придатке се­менника и плазмы, являющейся смесью секретов придаточных половых же­лез. Спермии - главная часть спермы. В них заложена наследственная осно­ва в виде молекулы ДНК. Однако и плазма играет важную роль, так как со­держит различные химические вещества и соединения, обеспечивающие изотоничность, буферность, а также соответствующее осмотическое давле­ние и рН.

Сперма содержит 85-97% воды и 3-15% сухих веществ. Сухой остаток на 9% состоит из белков и липидов. В сперме широко представлены биоло­гически активные вещества: ферменты (кислая и щелочная фосфатаза, гиалу-ронизада, гликозидаза, амилаза, липаза, протеазы, оксидазы и др.), антиаглю-тинины, простаглапдины, гормоны (апдрогены и эстрогены).

В сухом веществе спермы около 1% золы. Зольная часть содержит фос­фор, кальций, магний, калий, натрий, хлор, цинк, железо, медь и ряд других элементов.

Строение спермиев. У быка спермии составляют от 12 до 20% объема эякулята. Спермий состоит из головки, шейки, тела и хвоста. Головка со­держит наследственное вещество - дезоксирибонуклеиновую кислоту, пере­дающую потомству свойства родителей. Шейка, тело и хвост - двигательные части спермия. Длина спермиев быка равна 65-72 микрометрам (микрометр равен 0,001 мм). Длина головки - 9, шейки - 1, тела - 10-13 и хвоста - 44-53 мкм (микрометров). У спермиев быка на головку приходится 51% общей массы, на шейку + тело - 16, на хвост - 33%. По объему сперматозоид быка в 20 тыс. раз меньше яйцеклетки коровы.

Химический состав спермы. Спермии содержат около 25% сухого веще­ства и 75% воды. Из сухого вещества 85% приходится на белки, 13,2% на ли-пиды и 1,8% - на минеральные вещества. В спермиях имеется также значи­тельное количество фосфора (около 2,7%), а в головке содержание его дохо­дит до 4%. Головки спермиев содержат много нуклеиновых кислот, а хвосты - липиды и разнообразные ферменты, активно участвующие в жизненных про­цессах спермия.

В спермиях находятся следующие минеральные вещества: натрий, маг­ний, калий, кальций в виде солей фосфорной, хлористоводородной и серной кислот, а также в виде солей органических кислот.

Оболочка, одевающая спермий, имеет белковое происхождение и со­держит большое количество цистина и является таким же белковым образо­ванием, как и кератин кожи. Белок, содержащий серу, придает оболочке спермия прочность.

Виды движения спермиев. Способность двигаться - важное биологиче­ское свойство спермиев, которое необходимо для достижения ими места оп­лодотворения и проникновения в глубь яйцеклетки. Центр движения нахо­дится в шейке и теле спермия. При отрывании хвоста от тела, спермий становится неподвижным, тогда как спермии без головки могут продолжать дви­гаться.

Имеется несколько видов движения спермиев: прямолинейно-поступательное (спермии активно перемещаются вперед по прямой линии), манежное (спермии вращаются вокруг своей головки или перемещаются по кругу с радиусом, равным примерно длине спермия), колебательное (спермии на одном месте изгибаются вправо и влево). Прямолинейно-поступательное движение спермиев является нормальным, а манежное и колебательное отно­сится к анормальным.

Движение спермиев осуществляется при помощи хвоста. Он изгибается в одну сторону, а затем быстро выпрямляется. Такое движение хвоста быстро повторяется одно за другим. В результате отталкивания его от жидкости, в которой он находится, спермий продвигается вперед. В одну секунду хвост спермия быка при +37°С производит 9 ударов. Ложкообразная форма головки спермия при односторонних движениях хвоста обеспечивает вращение его вокруг своей продольной оси. Сочетание ударов хвоста с вращением вокруг оси приводит к прямолинейному поступательному движению спермия. Ско­рость движения спермиев быка около 5,6 мм/мин.

Нормальные спермии в медленно текущем потоке двигаются в одном направлении - против тока жидкости. Эта особенность называется реотакси­сом. Благодаря реотаксису спермии в яйцеводе двигаются навстречу с яйце­клеткой. В то же время неподвижные и мертвые спермии перемещаются вместе с током жидкости.

Все нормальные спермии имеют отрицательный электрический заряд. Наличие одноименного электрического заряда отталкивает спермиев друг от друга. Поэтому в густой сперме не происходит их столкновения или слипа­ния. Под влиянием электрического заряда спермии располагаются парал­лельно друг другу, что создает определенный порядок в их движении.

При снижении электрического заряда взаимное отталкивание спермиев ослабевает, и они агглютинируют, т.е. слипаются головками или всеми час­тями. Агглютинация может быть от разных причин: при увеличении кислот­ности спермы, при наличии в нем ионов металлов (кальция, магния, алюми­ния), которые ослабляют или полностью снижают отрицательный электриче­ский заряд спермиев. Склеивание может быть также при наличии агглюти­нинов - особых веществ, появляющихся при иммунизации организма самки чужеродными белками. Сперма с агглютинированными спермиями - показа­тель низкого качества, так как такие спермии не способны продвигаться в половых путях самки для встречи с яйцеклеткой.

Влияние на спермиев внешних факторов. После получения (извлечения из организма самца) спермии подвергаются воздействию факторов окру­жающей среды.

Действие света. Прямые солнечные лучи возбуждают движение сперми­ев, но быстро убивают их (за 20-40 мин). Неблагоприятен и сильный элек­трический свет. Рассеянный свет не оказывает вредного воздействия. Следовательно, и в процессе получения, разбавления и использования, сперму надо оберегать от прямого воздействия солнечного света.

Действие температуры. Жизнеспособность спермиев вне организма за­висит от температуры жидкости, в которой они находятся. Наиболее под­вижны спермии при температуре близкой к температуре тела животного (+37-39⁰ С). При температуре 45⁰ С спермии утрачивают свою оплодотворяю­щую способность вследствие инактивации ферментных систем, а при темпе­ратуре 48°С они погибают.

Продолжение · 4

При температуре ниже, чем температура тела животных, движение спермиев замедляется. При постепенном охлаждении спермы до температу­ры около 0⁰ С движение спермиев прекращается и они переходят в состояние анабиоза (неподвижное состояние спермиев, при котором они сохраняют жизнеспособность). При подогревании спермы до температуры 37-39⁰ С под­вижность их восстанавливается. При низких температурах спермии сохраня­ют жизнеспособность длительное время. Поэтому большинство методов хра­нения спермы связано с его охлаждением.

Однако резкое охлаждение спермы вызывает температурный шок или холодовой удар - гибель спермиев или их повреждение с потерей оплодотво­ряющей способности. Температурный шок наиболее сильно проявляется при быстром понижении температуры спермы - ниже 18⁰ С. Наиболее чувстви­тельна к понижению температуры свежеполученная сперма. После выдерж­ки спермы при комнатной температуре в течение 1-2 ч она становится менее чувствительна к быстрому понижению температуры. Чтобы избежать гибели спермиев от холодового удара, необходимо все работы со спермой прово­дить при температуре не ниже 18⁰ С.

Осмотическое давление. Спермии очень чувствительны к изменению осмотического давления, т.е. концентрации веществ в жидкости, в которой они находятся. Осмотическое давление в жидкости должно быть равным внутреннему осматическому давлению спермиев. Если спермии поместить в гипотонический раствор или в обыкновенную воду, они быстро погибнут вследствие повышения внутреннего давления. Под влиянием гипотоническо­го раствора хвостики спермиев набухают и закручиваются кольцом или по­лукольцом.

Если сперму смешать с гипертоническим раствором (например, 3%-й раствор хлористого натрия), спермии тоже погибнут, но уже от обезвожива­ния. Они сморщиваются, их хвостики приобретают зигзаговидную форму.

Исходя из этого, среда для разбавления спермы, а также рабочие раство­ры должны быть изотоничными сперме. К ним следует отнести 1%-й раствор хлористого натрия, 1%-й раствор двууглекислой соды, 2,9%-й раствор на­трия цитрата, 6,4%-й раствор глюкозы.

Кислотность среды. Все клеточные процессы в сперме происходят нормально только при определенных концентрациях водородных ионов (рН) среды. Свежеполученная сперма быка имеет нейтральную, или близкую к нейтральной (рН 6,7-7.0).

Накопление водородных ионов тормозит процессы жизнедеятельности спермиев. При рН 6,3-6,4 наступает кислотный анабиоз. Дальнейшее увели­чение кислотности вызывает гибель спермиев.

Сдвиг рН в щелочную сторону вначале активизирует спермии, но при рН 7,8-8,0 наступает их гибель.

Цельная сперма быка способна противостоять изменениям рН среды благодаря наличию в ее составе солей слабых кислот-карбонатов, фосфати-тов, цитратов. Это свойство называется буферностью. Буферность играет большую роль в обеспечении жизнедеятельности спермиев, предохраняя их от повреждений, связанных с резким изменением среды.

Действие солей. Большое влияние на жизнедеятельность спермиев ока­зывают растворы солей электролитов, т.е. растворы, проводящие электриче­ский ток.

В придатке семенника солей содержится в 10 раз меньше, чем в свеже-полученной сперме, поэтому спермии там могут храниться длительное вре­мя (до 2-х месяцев). При эякуляции концентрация солей в плазме повышает­ся, а они действуют возбуждающе на спермиев, что сокращает срок их жиз­ни.

Электролиты состоят из катионов и анионов. Одно- и двухвалентные ка­тионы существенно не изменяют выживаемость спермиев.

Анионы оказывают более сильное влияние, чем катионы, причем дейст­вие анионов зависит от валентности. Анионы хлоридов разрыхляют оболочку спермиев и разрушают липопротеидный покров, что ведет к гибели сперми­ев. Так, по данным М.В. Поповой, в сперме жеребца содержится 476 мг % хлоридов, а в семени баранов их всего 47 мг %. Этим можно объяснить низ­кую переживаемость спермиев жеребца вне организма (менее одних суток), тогда как спермии быка и барана могут жить вне организма 3-7 и более су­ток. Анионы фосфатов, сульфатов, цитратов, наоборот уплотняют оболочку спермиев и стабилизируют электрический потенциал. В связи с этим соли фосфорной, серной, лимонной кислот используются в составе сред для раз­бавления спермы.

Влияние сахаров. В противоположность солевым растворам на жизне­способность спермиев благоприятно действуют растворы различных сахаров, особенно фруктозы. Добавление сахарных растворов (фруктозы, глюкозы, сахарозы, лактозы и др.) в определенных концентрациях устраняют возбуж­дающее действие хлористых солей на спермиев, что увеличивает срок их жизни.

Влияние химических веществ и медикаментов. Большинство химиче­ских соединений токсичны для спермиев. Этим следует объяснить неудачи искусственного осеменения животных, когда его проводят в ветеринарных лечебницах, амбулаториях, или когда используют те же инструменты, кото­рые применяют во время лечебной работы.

Установлено, что спермиев быстро убивают сулема в дозе 0,000003 г, марганцевокислый калий в дозе 0,00004 г, лизол, креолин, уксусная кислота в дозе 0,0003 г на 1 г спермы (А.П.Студенцов и др., 1986). Щелочи и кислоты, эфир, нашатырный спирт, скипидар, являются сильными ядами для спер-миев. Окислы свинца, меди, железа, серебра также очень ядовиты для спер-миев. Поэтому в практике искусственного осеменения пользуются стеклян­ными, пластмассовыми, хромированными, никелированными инструмента­ми.

Следует также учитывать неблагоприятное действие на спермиев табач­ного дыма, паров одеколона, духов, чеснока, лука.

Наиболее приемлем для дезинфекции инструментов чистый спирт-ректификат, так как он легко удаляется (быстро испаряется) и хорошо рас­творяется в воде.

Из антимикробных средств малотоксичны нитрофураны (фурацилин, фуразолидон). Некоторые сульфаниламиды (стрептоцид) и большинство ан­тибиотиков в низких концентрациях безвредны и их используют в составе разбавителей для спермы.

Влияние микробной и грибковой загрязненности. Сперма является хо­рошей питательной средой для сохранения и размножения многих патоген­ных и непатогенных микроорганизмов. Количественный и качественный со­став микроорганизмов в сперме сильно колеблется в зависимости от здоро­вья, гигиенического состояния производителя, стерильности искусственной вагины, манежа, лаборатории, срока хранения спермы и многих других фак­торов. Особенно много микроорганизмов отмечается в воздухе помещения, где содержатся производители. По данным П. Маринова, у быков, выращен­ных в плохих гигиенических условиях, в 1 мл спермы содержится от 85 до 230 млн. микроорганизмов.

Для осеменения допускают сперму с содержанием в 1 мл не более 5 тыс. микробных тел при отсутствии патогенной микрофлоры и синегнойной палочки.

Источники энергии для движения спермиев. Движения спермиев требу­ют значительных затрат энергии. Основными ее источниками являются угле­воды (глюкоза, фруктоза, сорбит), липиды, свободные аминокислоты. Энер­гию спермии получают в результате трех сложных биохимических процес­сов: дыхания, гликолиза и распада аденозинтрифосфата (АТФ).

Дыхание - это получение энергии для движения и других жизненных процессов путем расщепления в присутствии кислорода различных пита­тельных веществ, таких как углеводы, жиры, белки. Наиболее легко при ды­хании в спермиях окисляются простые сахара (фруктоза и глюкоза). При на­личии фруктозы отмечается меньший расход липидов, а белки почти не рас­ходуются. Около 90% всей энергии спермии получают за счет дыхания.

Гликолиз (или фруктолиз)- это получение энергии путем расщепления сахароз в безкислородной среде. Несмотря на то, что при гликолизе спермии получают в 19 раз меньше энергии, чем при дыхании этот биохимический процесс имеет для спермиев важное значение, так как в половых путях самки кислорода нет.

Энергия, полученная в результате дыхания и гликолиза, аккумулируется в митохондриях спиральных нитей спермия в виде особого органического соединения - аденозинтрифосфата (АТФ). В хвосте спермия имеется специ­альный сократительный белок - спермозин и движутся спермии за счет энер­гии, которую отдает спермозину аденозинтрифосфат (АТФ).

Знать каким путем спермии получают энергию очень важно, так как ус­тановлено, что основная причина гибели спермиев вне организма - это рас­ходование энергии и накопление продуктов метаболизма или распада.

Методы оценки качества спермы

Понятие об оценке качества спермы включает в себя определение его биологической полноценности, т.е. способ­ности оплодотворить яйцеклетку и дать начало новому жизнеспособному по­томству. Методы определения оплодотворяющей способности спермы делят­ся на прямые и косвенные. К первой группе относится определение по ре­зультатам осеменения (отел, ректальное исследование через 2,5-3 месяца по­сле отела, отсутствие полового цикла). Как видно, для оценки спермы этими методами требуется длительное время. Поэтому в практике, наряду с прямы­ми, применяются косвенные методы. Эти методы позволяют быстро, в тече­ние 10-30 мин определять качество и количество спермиев, полученных в эя­куляте и назначить для осеменения такую дозу спермы, которая обеспечива­ла бы плодотворное осеменение, но не допускала ненужного перерасхода спермы. Ибо одним из необходимых условий получения максимального ко­личества приплода от ценных производителей - это рациональное использо­вание их спермы.

Ценность того или иного косвенного или предварительного метода оценки качества спермы определяется степенью его корреляции с показате­лем оплодотворяющей способности спермы.

Для прогнозирования оплодотворяющей способности спермы предло­жены физические, биохимические, биологические методы исследования. В их число входят органолептическая оценка по объему, запаху, цвету, конси­стенции, однородности, определение рН, осмотического давления, подвиж­ности, выживаемости спермиев, процента их с аномальной морфологией, ос­мотической резистентностью, устойчивости к холодовому удару, содержание аденозинтрифосфата, активности дегидрогеназ.

В практике искусственного осеменения наибольшее применение полу­чила оценка спермы по органолептическим признакам, концентрации, под­вижности и переживаемости.

Для определения качества спермы на чистое предметное стекло сте­рильной палочкой или пипеткой наносят каплю спермы, накрывают покров­ным стеклом и микроскопируют при увеличении 140-300 раз. Исследования проводят при температуре 38-40°С, для чего применяют специальные термо­статы или обогревательные столики (водяные, электрические).

Сперма может быть густой (средней густоты) - Г, редкой - Р, и без спер­миев - А - азоспермия.

Сперма густая - все поле зрения микроскопа густо заполнено спермия-ми. Соответствует приблизительно концентрации более 1 млрд. спермиев.

Сперма средняя - между спермиями имеются промежутки примерно равные длине спермия. Концентрация такой спермы от 600 млн. до 1 млрд. спермиев.

Сперма редкая - в поле зрения микроскопа промежутки между спер­миями превышают их длину. В 1 мл такой спермы содержится менее 600 млн. спермиев.

Для более точного определения концентрации спермиев применяют счетные камеры (Томма, Горяева и др.), фотоэлектрические колориметры или электрогемометры в соответствии с имеющимися наставлениями к этим приборам.

Активность (подвижность) спермы определяют по десятибалльной шкале. Чем она подвижнее, тем лучше качество спермы. Высшую оценку -10 баллов ставят, когда более 95% спермиев имеют прямолинейно-поступательное движение, 9 баллов соответственно - 90%, 8 баллов - 80% и т.д.

Если в поле зрения микроскопа видны спермии с манежным движением (при попадании в сперму воды), то такую сперму обозначают буквой М, с колебательным - К, а неподвижность их - Н. Окончательно оценивают каче­ство спермы с учетом густоты и активности, например: Г - 9 сперма густая, содержит 90% спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

Микроскопическое исследование эякулята показывает, что среди нор­мальных спермиев всегда встречаются патологические формы в виде изоли­рованных головок и хвостиков, гигантских и карликовых спермиев, спермиев с двумя головками, с двумя хвостиками, с головками неправильной формы, с закрученными и ненормально искривленными хвостиками.

Присутствие в сперме большого количества спермиев с ненормальной формой называется тератоспермией. В качестве конкретных причин образо­вания уродливых форм спермиев отмечаются:

1. Поражение семенника и придатка (гигантские и карликовые спермия).

2. Длительные промежутки между коитусами (обуславливающие старе­ние и распад спермиев в придатке), отдельные головки, изолированные хво­стики.

3. Половое истощение производителя вследствие большой половой на­грузки или недостаточного кормления (спермии с протоплазматической кап­лей в области шейки, тела и хвоста, т.е. незрелые спермии).

Быки, дающие сперму с содержанием более 18% уродливых спермиев, должны рассматриваться как бесплодные.

Определение выживаемости (живучести) спермиев вне организма. Из­вестно, что чем дольше сохраняется жизнь спермиев, тем выше их оплодо­творяющая способность. В.К. Милованов (1962) предложил определять абсо­лютный показатель живучести спермы. Делается это так. Образец спермы, после разбавления эякулята, оставляют в холодильнике при 2-5⁰ С и ежеднев­но определяют активность спермиев при температуре 38-40⁰ С до полной их гибели. Суммировав все произведения времени (в часах), в течение которого наблюдалась та или иная активность, на активность спермиев ( в баллах), получают абсолютный показатель живучести. Для спермы быка он должен быть не ниже 1400. Максимальная продолжительность жизни спермиев (в ча­сах) должна быть для спермиев быка - не менее 200.

Для определения выживаемости спермиев после оттаивания применяют экспресс-метод. Сперму после оттаивания ставят на инкубацию в водяную баню при температуре 38°С. Фиксируют время оттаивания и одновременно определяют исходную подвижность спермиев. Через 5 часов оценку повто­ряют. Пригодной для осеменения считают сперму быка, исходная подвиж­ность которой не менее 4 баллов и выживаемость 5 ч.

Согласно действующим в настоящее время ГОСТам, свежеполученная сперма быка считается пригодной для разбавления, если она соответствует следующим требованиям:

Объем эякулята не менее 3,0 мл;

Цвет - молочно-белый или кремовый;

Консистенция сливкообразная;

Запах - нормальная сперма быка запаха не имеет;

Концентрация спермиев - не менее 0,4 млрд/мл;

Подвижность - не менее 8,0 баллов;

Выживаемость спермиев при 2-5°С после разбавления ГЦЖ средой:

Относительная - не ниже 249 ч;

Абсолютная - не ниже 1400 ч.

Количество спермиев с аномальной морфологией - не более 18%;

Количество патогенных микробов в 1 мл - не более 5000.

Разбавление, хранение и транспортировка спермы

Чтобы увеличить объем эякулята, а также для того, чтобы сохранить оплодотворяющую спо­собность спермиев на более длительный срок, при хранении их вне организ­ма сперму разбавляют специальными средами.

Для сохранения спермы вне организма нужно создавать условия, кото­рые тормозили бы расходование внутренних запасов в спермиях и не вызы­вали их гибель.

Синтетическая среда обычно состоит из трех компонентов. В состав среды для спермы быка входят:

Сахара (глюкоза, лактоза) - служат источником энергии для спермиев. Помимо этого они участвуют в поддержании осмотического давления, пони­жают электропроводность среды, предохраняют спермии от потерь электри­ческого заряда. С желтком куриного яйца образуют биокомплексы, защи­щающие мембрану спермиев от повреждений при охлаждении.

Цитрат натрия. Создает буферность среды, нейтрализует конечные про­дукты жизнедеятельности спермиев, связывая ионы кальция и тяжелых ме­таллов, обеспечивает снижение их уровня до оптимального.

Глицерин. Защитное действие глицерина связано с понижением точки замерзания растворов. Глицерин задерживает начало кристаллизации (основ­ной причины гибели клеток при замораживании), замедляет рост кристаллов, снижает осмотическое давление растворенных веществ при замораживании до эвтектической точки (-46,5⁰ С). Глицерин всегда находится в жидкой фазе раствора, вследствие чего концентрация осмотически активных веществ уменьшается, что и способствует сохранению клеток.

Желток куриных яиц. Содержит лецитин и липопротеины. Они создают на поверхности спермиев адсорбционный слой, предохраняющий спермии от холодового шока, который подстерегает спермии до температуры - 51⁰ С, то есть пока в сперме сохраняется жидкая фаза.

Спермосан ППК. Комплексный антибактериальный препарат, состоя­щий из пенициллина, полимиксина, канамицина. Такая комбинация эффек­тивно тормозит размножение микроорганизмов в сперме.

Для разбавления и кратковременного хранения спермы быка при темпе­ратуре +2-5⁰ С необходимы следующие компоненты: вода дистиллированная - 100 мл, глюкоза - 3 г, натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятивод-ный - 1,4 г, желток куриного яйца - 12 мл, спермосан ППК - 75000 ИЕ.

С момента получения спермы от производителя до разбавления должно пройти не более 10 мин. В зависимости от подвижности и концентрации спермиев сперму быка разбавляют так, чтобы в одной дозе при всех способах хранения перед осеменением было 10-15 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением. Сперму быков, сохраненную при температуре +2-5⁰ С, используют для осеменения коров и телок в течение 3 суток с актив­ностью спермиев не ниже 7 баллов, а после хранения в замороженном со­стоянии - не ниже 4 баллов.

Температура синтетической среды перед разбавлением спермы должна быть одинаковой со спермой (27-35°С). Среду осторожно приливают к спер­ме, соблюдая правила асептики.

Для разбавления и замораживания спермы быка в форме гранул (капе­лек) применяют лактозо-желточную среду следующего состава: вода дистил­лированная - 100 мл, лактоза - 11,5 г, желток куриного яйца - 20 мл, глице­рин - 5 мл.