Современные технологии получения и сохранения телят

Продолжение · 3

При ручной случке следует по возможности ограничиваться одной сад­кой, которой в большинстве случаев бывает достаточно для оплодотворения. При первой садке выделяется спермы по объему и по количеству клеток зна­чительно больше, чем требуется для одной самки. При повторных садках, следующих одна за другой, у быков-производителей уменьшается количест­во и качество спермы, что снижает вероятность оплодотворения других ко­ров и телок.

В хозяйствах для организации и проведения естественного осеменения нужны пункты осеменения. На каждом пункте необходимо иметь помещение для содержания производителей, кормов и инвентаря. Комнату для специа­листа по воспроизводству животных, где могут храниться необходимые ма­териалы и инструменты (халаты, полотенца, вата, бинты, дезинфицирующие растворы, влагалищные зеркала, микроскоп и другие принадлежности). Об­ширный двор с загоном, коновязью и станком для осеменения. Помещения должны содержаться в чистоте и периодически подвергаться дезинфекции, побелке или окраске.

ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ

Краткая история развития и преимущества метода

Тайна зарожде­ния живых существ с древнейших времен волновала человеческие умы. Су­ществует легенда о том, что за 800 лет до н.э. ассирийцы вводили губку во влагалище кобылы и после коитуса с жеребцом переносили эту губку со спермой во влагалище другой кобылы для получения высококачественного потомства.

В арабской летописи отмечается, что в 286 г. новой эры один бедуин из Северной Африки, не имея возможности получить приплод от жеребца, при­надлежащего его сопернику, ввел во влагалище одной из кобыл, пасшихся с этим жеребцом, пучок конских волос. Затем извлек его после коитуса, быст­ро перевез и ввел во влагалище своей кобылы и таким образом искусственно осеменил ее.

Как физиологический опыт искусственное осеменение впервые приме­нили в 1763 г. Стефан Якоби на рыбах, а в 1780-1782 гг. Ладзаро Спалланца-ни и П.Росси - на собаках. Однако производственное значение в животно­водстве этот метод приобрел только в результате творческой деятельности нашего выдающегося соотечественника И.И. Иванова. Он заложил теорети­ческие основы и принципы почти всех существующих приемов искусствен­ного осеменения животных. Современные методы получения, оценки, раз­бавления, сохранения спермы и введения ее в половые пути самок по суще­ству являются усовершенствованием и развитием тех методов, которые впер­вые применил И.И. Иванов. Своими работами он заслуженно завоевал миро­вую известность и его имя останется в веках как автора самого крупного от­крытия в истории животноводства. Так, используя искусственное осемене­ние, от одного барана получили 18414 ягнят и от одного быка 42 тыс. телят в год.

Искусственное осеменение животных позволяет быстро выводить новые и улучшать существующие породы животных. В нашей стране за короткий период выведены 12 новых высокопродуктивных пород крупного рогатого скота (черно-пестрая, сычевская костромская, курганская и др.).

Семенем быка улучшателя швицкой породы по кличке Джей в 1984 г. было осеменено 20 тыс. коров и от полученных от него дочерей было надое­но в среднем на 547 кг молока больше, чем от их сверстниц. Животноводам Дании, благодаря использованию искусственного осеменения и хорошей ор­ганизации племенной работы удалось за 25 лет повысить удои коров с 4000 до 6500 кг, при средней жирности молока 4,2%.

Искусственное осеменение животных предупреждает распространение инфекционных заболеваний, которые передаются при естественном спарива­нии, поскольку используется стерильный или одноразовый инструмент.

Этот метод позволяет вести эффективную борьбу с бесплодием потому, что с помощью специальных приборов или пальпацией определяют аномалии воспроизводительной функции животных и принимают меры к их устране­нию.

Ни одно открытие в животноводстве (механическое доение, уборка на­воза, раздача кормов и т.д.) не может сравниться по экономической эффек­тивности с этим методом. Поскольку значительно сокращаются потребности в производителях, сокращаются затраты на корма, помещения, человеческий труд.

Надо также учитывать то, что быки-производители - это, как правило, крупные, сильные, агрессивные животные, которые представляют опасность для здоровья и жизни человека. В 1965 г. погиб под рогами быка гл. зоотех­ник Черниговской станции искусственного осеменения. А ведь это был знающий специалист, который более 20 лет работал с такими животными. Он допустил маленькую ошибку: надел новый бушлат (новый запах) и вошел в станок к своему любимому быку по кличке Фараон, который мгновенно прижал его к стенке станка. Через 2 месяца этот человек умер.

Внедрять искусственное осеменение в скотоводстве начали с 1930 г. В 1932-1933 гг. выдающийся генетик А.С. Серебровский выдвинул идею орга­низации специальных станций, на которых должны быть сосредоточены цен­ные производители, чью сперму можно широко и планомерно использовать во многих стадах разных районов страны. В 1955-1956 гг. в нашей стране на­чали создаваться крупные государственные станции по племенной работе и искусственному осеменению. Это позволило расширить масштабы примене­ния метода, повысило его экономическую эффективность и способствовало дальнейшему развитию научных исследований в области воспроизводства животных. Особенно большую роль сыграла разработка способа длительного хранения спермы в глубоко замороженном состоянии (при -196°С) И.В. Смирнов, В.К. Милованов и И.И. Соколовская (1948-1951 гг.).

В настоящее время искусственное осеменение стало самым эффектив­ным биотехнологическим способом воспроизводства животных. В мире в от­дельные годы осеменяют до 100 млн. молочных коров, 50 млн. овец, 6 млн. свиней. В 1989 г. в СССР было осеменено 35 млн. коров и телок (87%). В ря­де стран (Дания, Голландия, Япония, Израиль, Финляндия и др.) почти всех коров осеменяют искусственно.

Получение спермы от быков

Получение спермы от производителей - важнейшая часть технологии искусственного осеменения сельскохозяйст­венных животных.

Все методы получения спермы подразделяются на хирургические, вла­галищные и уретральные.

Хирургический метод заключается в извлечении спермиев из придатков семенников убитого самца или после его кастрации. Этот метод разработал И.И. Иванов. Отпрепарированные придатки семенников измельчают, вымы­вают из них разбавителем половые клетки и этой смесью осеменяют самок. Таким путем получили сперму от диких баранов - архаров и вывели новую породу - архаромеринос.

Влагалищные методы заключаются в извлечении спермы из влагалища самки после спаривания с производителем при помощи влагалищного зерка­ла и специальной ложки или посредством губки. Губочный метод был дове­ден до совершенства И.И. Ивановым. Хорошо обработанную, чистую, про-стерелизованную греческую губку вводят корнцангом во влагалище коровы и дают возможность производителю покрыть ее. После этого губку извлека­ют и выжимают из нее сперму рукой или специальным прессом. При приме­нении влагалищных методов получения спермы отмечаются большие потери спермы и загрязнение ее влагалищным секретом и микроорганизмами, а при отжатии губки часть половых клеток повреждается. К недостаткам методов относится также возможность переноса заразных болезней.

К уретральным методам относят массаж ампул спермиопроводов, фис­тульный, электроэякуляции, спермособирателя и искусственной вагины.

Метод массажа. Известно, что во время полового возбуждения спермии из канала придатка семенника перемещаются в ампулы спермиопроводов и сохраняются там до момента эякуляции. Массажем можно вызвать сокраще­ние ампул и выделение половых клеток наружу. Впервые массаж половых протоков с целью получения спермы от быка применил Г. Кэйз в 1925 г. В последующем Ф. Миллер и Е. Эвэнс (1934) описали метод массажа ампул спермопроводов через прямую кишку.

Быка перед получением спермы выдерживают перед самкой или другим самцом (сексуальная стимуляция). Затем руку вводят в прямую кишку на глубину 25-35 см, при необходимости освобождая ее от каловых масс, нахо­дят твердый червеобразный орган - мочеполовой канал и, двигая по нему ру­кой вперед, отыскивают мягкую шейку мочевого пузыря с лежащими на ней ампулами спермиопроводов в виде эластичных трубок толщиной с палец, а по бокам от них — грушевидные пузырьковидные железы. Производят осто­рожный массаж желез спереди назад и таким же образом массируют ампулы спермиопроводов. Обычно 2-минутного массажа бывает достаточно для того, чтобы выделилась сперма. Сперму собирает помощник в спермоприемник, подставленный к отверстию препуция.

Этим методом можно воспользоваться для получения спермы от тех бы­ков, которые по какой-либо причине (слабые или больные задние конечно­сти, слишком вялое проявление половых рефлексов и др.) не в состоянии эякулировать в искусственную вагину или идти в случку.

Фистульный метод. Впервые промежностную уретростомию для полу­чения спермы быков применил И.В. Глумаков. Этим методом сперму полу­чают во время естественной садки производителя из фистулы мочеполового канала. В научных целях применяется наложение фистул на спермиопрово-ды, канал придатка семенника, другие участки внутренних половых прото­ков.

Метод электроэякуляции. Этот метод впервые был применен для полу­чения спермы от быков в 1943 г. Метод основан на том, что под воздействи­ем слабого электрического тока происходит возбуждение центра эякуляции, а также нервов и мышц, участвующих в процессе извержения спермы.

Прибор для электроэякуляции состоит из биполярного электрода и ис­точника тока переменного напряжения (от 0 до 30 V) малой силы (0,5 - 1 А ). Биполярный электрод представляет собой каучуковый стержень с вмонтиро­ванными электродами (двумя положительными и двумя отрицательными) в виде колец, расположенных на расстоянии 4 см друг от друга. Биполярный электрод вставляют в прямую кишку (перед этим удаляют фекалии) так, что­бы кольца находились в области придаточных половых желез. Делая перио­дически электрические стимулы продолжительностью 3-5 с, вызывают вы­деление спермы. Эякуляция у быков наступает после 3-5 периодов подачи тока. Сперму собирают как при массаже ампул спермиопроводов и в тех же случаях нарушения половой функции производителей.

Метод спермособирателя. Спермособиратель представляет собой трубку из тонкой резины, один конец которой полностью закрыт, а свободный рас­тянут на жестком широком кольце. Эти приборы были сконструированы А.А. Зальцманом, В.К. Миловановым и И.М. Родиным. Несмотря на жесткие рас­ширяющие кольца, спермособиратели в момент совокупления могут вдавли­ваться во влагалище, а иногда они просто разрываются. В связи с этим полу­чение спермы этим методом не нашло широкого применения.

Метод искусственной вагины. Впервые прибор с названием искусствен­ная вагина был предложен итальянцем Дж. Амантеа в 1913 г. для получения спермы от собаки. Искусственную вагину для быка создали И.М. Родин, Н.А. Комиссаров, В.И. Липатов в 1932 г. Поэтому в литературе многих стран по­лучение спермы при помощи искусственной вагины называли русским мето­дом. Это открытие имело исключительно важное значение для развития ис­кусственного осеменения, так как почти разрешил чрезвычайно трудную технологическую задачу получения спермы от самцов.

Искусственная вагина состоит из наружного (эбонитового, резинового, металлического) и внутреннего цилиндра или трубки - эластичной гладкой резиновой камеры, которую надевают на наружный цилиндр. В наружном цилиндре имеется патрубок с отверстием, через которое в межстенную по­лость (между корпусом и резиновой камерой) наливают теплую воду (100 мл) и нагнетают воздух. Для нормальной эякуляции быка необходима темпе­ратура 41-42°С и давление 40-60 мм рт.ст. На одном конце наружного цилин­дра фиксируют спермоприемник. В настоящее время спермоприемником служит одноразовый полиэтиленовый пакет конической формы, заключенный в термостатический чехол. После получения спермы концевую часть однора­зового спермоприемника отделяют и герметизируют для дальнейшей работы со спермой.

Физиология и биохимия спермы

Состав спермы. Сперма состоит из двух частей различного происхож­дения: спермиев, образовавшихся в семеннике и созревших в придатке се­менника и плазмы, являющейся смесью секретов придаточных половых же­лез. Спермии - главная часть спермы. В них заложена наследственная осно­ва в виде молекулы ДНК. Однако и плазма играет важную роль, так как со­держит различные химические вещества и соединения, обеспечивающие изотоничность, буферность, а также соответствующее осмотическое давле­ние и рН.

Сперма содержит 85-97% воды и 3-15% сухих веществ. Сухой остаток на 9% состоит из белков и липидов. В сперме широко представлены биоло­гически активные вещества: ферменты (кислая и щелочная фосфатаза, гиалу-ронизада, гликозидаза, амилаза, липаза, протеазы, оксидазы и др.), антиаглю-тинины, простаглапдины, гормоны (апдрогены и эстрогены).

В сухом веществе спермы около 1% золы. Зольная часть содержит фос­фор, кальций, магний, калий, натрий, хлор, цинк, железо, медь и ряд других элементов.

Строение спермиев. У быка спермии составляют от 12 до 20% объема эякулята. Спермий состоит из головки, шейки, тела и хвоста. Головка со­держит наследственное вещество - дезоксирибонуклеиновую кислоту, пере­дающую потомству свойства родителей. Шейка, тело и хвост - двигательные части спермия. Длина спермиев быка равна 65-72 микрометрам (микрометр равен 0,001 мм). Длина головки - 9, шейки - 1, тела - 10-13 и хвоста - 44-53 мкм (микрометров). У спермиев быка на головку приходится 51% общей массы, на шейку + тело - 16, на хвост - 33%. По объему сперматозоид быка в 20 тыс. раз меньше яйцеклетки коровы.

Химический состав спермы. Спермии содержат около 25% сухого веще­ства и 75% воды. Из сухого вещества 85% приходится на белки, 13,2% на ли-пиды и 1,8% - на минеральные вещества. В спермиях имеется также значи­тельное количество фосфора (около 2,7%), а в головке содержание его дохо­дит до 4%. Головки спермиев содержат много нуклеиновых кислот, а хвосты - липиды и разнообразные ферменты, активно участвующие в жизненных про­цессах спермия.

В спермиях находятся следующие минеральные вещества: натрий, маг­ний, калий, кальций в виде солей фосфорной, хлористоводородной и серной кислот, а также в виде солей органических кислот.

Оболочка, одевающая спермий, имеет белковое происхождение и со­держит большое количество цистина и является таким же белковым образо­ванием, как и кератин кожи. Белок, содержащий серу, придает оболочке спермия прочность.

Виды движения спермиев. Способность двигаться - важное биологиче­ское свойство спермиев, которое необходимо для достижения ими места оп­лодотворения и проникновения в глубь яйцеклетки. Центр движения нахо­дится в шейке и теле спермия. При отрывании хвоста от тела, спермий становится неподвижным, тогда как спермии без головки могут продолжать дви­гаться.

Имеется несколько видов движения спермиев: прямолинейно-поступательное (спермии активно перемещаются вперед по прямой линии), манежное (спермии вращаются вокруг своей головки или перемещаются по кругу с радиусом, равным примерно длине спермия), колебательное (спермии на одном месте изгибаются вправо и влево). Прямолинейно-поступательное движение спермиев является нормальным, а манежное и колебательное отно­сится к анормальным.

Движение спермиев осуществляется при помощи хвоста. Он изгибается в одну сторону, а затем быстро выпрямляется. Такое движение хвоста быстро повторяется одно за другим. В результате отталкивания его от жидкости, в которой он находится, спермий продвигается вперед. В одну секунду хвост спермия быка при +37°С производит 9 ударов. Ложкообразная форма головки спермия при односторонних движениях хвоста обеспечивает вращение его вокруг своей продольной оси. Сочетание ударов хвоста с вращением вокруг оси приводит к прямолинейному поступательному движению спермия. Ско­рость движения спермиев быка около 5,6 мм/мин.

Нормальные спермии в медленно текущем потоке двигаются в одном направлении - против тока жидкости. Эта особенность называется реотакси­сом. Благодаря реотаксису спермии в яйцеводе двигаются навстречу с яйце­клеткой. В то же время неподвижные и мертвые спермии перемещаются вместе с током жидкости.

Все нормальные спермии имеют отрицательный электрический заряд. Наличие одноименного электрического заряда отталкивает спермиев друг от друга. Поэтому в густой сперме не происходит их столкновения или слипа­ния. Под влиянием электрического заряда спермии располагаются парал­лельно друг другу, что создает определенный порядок в их движении.

При снижении электрического заряда взаимное отталкивание спермиев ослабевает, и они агглютинируют, т.е. слипаются головками или всеми час­тями. Агглютинация может быть от разных причин: при увеличении кислот­ности спермы, при наличии в нем ионов металлов (кальция, магния, алюми­ния), которые ослабляют или полностью снижают отрицательный электриче­ский заряд спермиев. Склеивание может быть также при наличии агглюти­нинов - особых веществ, появляющихся при иммунизации организма самки чужеродными белками. Сперма с агглютинированными спермиями - показа­тель низкого качества, так как такие спермии не способны продвигаться в половых путях самки для встречи с яйцеклеткой.

Влияние на спермиев внешних факторов. После получения (извлечения из организма самца) спермии подвергаются воздействию факторов окру­жающей среды.

Действие света. Прямые солнечные лучи возбуждают движение сперми­ев, но быстро убивают их (за 20-40 мин). Неблагоприятен и сильный элек­трический свет. Рассеянный свет не оказывает вредного воздействия. Следовательно, и в процессе получения, разбавления и использования, сперму надо оберегать от прямого воздействия солнечного света.

Действие температуры. Жизнеспособность спермиев вне организма за­висит от температуры жидкости, в которой они находятся. Наиболее под­вижны спермии при температуре близкой к температуре тела животного (+37-39⁰ С). При температуре 45⁰ С спермии утрачивают свою оплодотворяю­щую способность вследствие инактивации ферментных систем, а при темпе­ратуре 48°С они погибают.

Продолжение · 4

При температуре ниже, чем температура тела животных, движение спермиев замедляется. При постепенном охлаждении спермы до температу­ры около 0⁰ С движение спермиев прекращается и они переходят в состояние анабиоза (неподвижное состояние спермиев, при котором они сохраняют жизнеспособность). При подогревании спермы до температуры 37-39⁰ С под­вижность их восстанавливается. При низких температурах спермии сохраня­ют жизнеспособность длительное время. Поэтому большинство методов хра­нения спермы связано с его охлаждением.

Однако резкое охлаждение спермы вызывает температурный шок или холодовой удар - гибель спермиев или их повреждение с потерей оплодотво­ряющей способности. Температурный шок наиболее сильно проявляется при быстром понижении температуры спермы - ниже 18⁰ С. Наиболее чувстви­тельна к понижению температуры свежеполученная сперма. После выдерж­ки спермы при комнатной температуре в течение 1-2 ч она становится менее чувствительна к быстрому понижению температуры. Чтобы избежать гибели спермиев от холодового удара, необходимо все работы со спермой прово­дить при температуре не ниже 18⁰ С.

Осмотическое давление. Спермии очень чувствительны к изменению осмотического давления, т.е. концентрации веществ в жидкости, в которой они находятся. Осмотическое давление в жидкости должно быть равным внутреннему осматическому давлению спермиев. Если спермии поместить в гипотонический раствор или в обыкновенную воду, они быстро погибнут вследствие повышения внутреннего давления. Под влиянием гипотоническо­го раствора хвостики спермиев набухают и закручиваются кольцом или по­лукольцом.

Если сперму смешать с гипертоническим раствором (например, 3%-й раствор хлористого натрия), спермии тоже погибнут, но уже от обезвожива­ния. Они сморщиваются, их хвостики приобретают зигзаговидную форму.

Исходя из этого, среда для разбавления спермы, а также рабочие раство­ры должны быть изотоничными сперме. К ним следует отнести 1%-й раствор хлористого натрия, 1%-й раствор двууглекислой соды, 2,9%-й раствор на­трия цитрата, 6,4%-й раствор глюкозы.

Кислотность среды. Все клеточные процессы в сперме происходят нормально только при определенных концентрациях водородных ионов (рН) среды. Свежеполученная сперма быка имеет нейтральную, или близкую к нейтральной (рН 6,7-7.0).

Накопление водородных ионов тормозит процессы жизнедеятельности спермиев. При рН 6,3-6,4 наступает кислотный анабиоз. Дальнейшее увели­чение кислотности вызывает гибель спермиев.

Сдвиг рН в щелочную сторону вначале активизирует спермии, но при рН 7,8-8,0 наступает их гибель.

Цельная сперма быка способна противостоять изменениям рН среды благодаря наличию в ее составе солей слабых кислот-карбонатов, фосфати-тов, цитратов. Это свойство называется буферностью. Буферность играет большую роль в обеспечении жизнедеятельности спермиев, предохраняя их от повреждений, связанных с резким изменением среды.

Действие солей. Большое влияние на жизнедеятельность спермиев ока­зывают растворы солей электролитов, т.е. растворы, проводящие электриче­ский ток.

В придатке семенника солей содержится в 10 раз меньше, чем в свеже-полученной сперме, поэтому спермии там могут храниться длительное вре­мя (до 2-х месяцев). При эякуляции концентрация солей в плазме повышает­ся, а они действуют возбуждающе на спермиев, что сокращает срок их жиз­ни.

Электролиты состоят из катионов и анионов. Одно- и двухвалентные ка­тионы существенно не изменяют выживаемость спермиев.

Анионы оказывают более сильное влияние, чем катионы, причем дейст­вие анионов зависит от валентности. Анионы хлоридов разрыхляют оболочку спермиев и разрушают липопротеидный покров, что ведет к гибели сперми­ев. Так, по данным М.В. Поповой, в сперме жеребца содержится 476 мг % хлоридов, а в семени баранов их всего 47 мг %. Этим можно объяснить низ­кую переживаемость спермиев жеребца вне организма (менее одних суток), тогда как спермии быка и барана могут жить вне организма 3-7 и более су­ток. Анионы фосфатов, сульфатов, цитратов, наоборот уплотняют оболочку спермиев и стабилизируют электрический потенциал. В связи с этим соли фосфорной, серной, лимонной кислот используются в составе сред для раз­бавления спермы.

Влияние сахаров. В противоположность солевым растворам на жизне­способность спермиев благоприятно действуют растворы различных сахаров, особенно фруктозы. Добавление сахарных растворов (фруктозы, глюкозы, сахарозы, лактозы и др.) в определенных концентрациях устраняют возбуж­дающее действие хлористых солей на спермиев, что увеличивает срок их жизни.

Влияние химических веществ и медикаментов. Большинство химиче­ских соединений токсичны для спермиев. Этим следует объяснить неудачи искусственного осеменения животных, когда его проводят в ветеринарных лечебницах, амбулаториях, или когда используют те же инструменты, кото­рые применяют во время лечебной работы.

Установлено, что спермиев быстро убивают сулема в дозе 0,000003 г, марганцевокислый калий в дозе 0,00004 г, лизол, креолин, уксусная кислота в дозе 0,0003 г на 1 г спермы (А.П.Студенцов и др., 1986). Щелочи и кислоты, эфир, нашатырный спирт, скипидар, являются сильными ядами для спер-миев. Окислы свинца, меди, железа, серебра также очень ядовиты для спер-миев. Поэтому в практике искусственного осеменения пользуются стеклян­ными, пластмассовыми, хромированными, никелированными инструмента­ми.

Следует также учитывать неблагоприятное действие на спермиев табач­ного дыма, паров одеколона, духов, чеснока, лука.

Наиболее приемлем для дезинфекции инструментов чистый спирт-ректификат, так как он легко удаляется (быстро испаряется) и хорошо рас­творяется в воде.

Из антимикробных средств малотоксичны нитрофураны (фурацилин, фуразолидон). Некоторые сульфаниламиды (стрептоцид) и большинство ан­тибиотиков в низких концентрациях безвредны и их используют в составе разбавителей для спермы.

Влияние микробной и грибковой загрязненности. Сперма является хо­рошей питательной средой для сохранения и размножения многих патоген­ных и непатогенных микроорганизмов. Количественный и качественный со­став микроорганизмов в сперме сильно колеблется в зависимости от здоро­вья, гигиенического состояния производителя, стерильности искусственной вагины, манежа, лаборатории, срока хранения спермы и многих других фак­торов. Особенно много микроорганизмов отмечается в воздухе помещения, где содержатся производители. По данным П. Маринова, у быков, выращен­ных в плохих гигиенических условиях, в 1 мл спермы содержится от 85 до 230 млн. микроорганизмов.

Для осеменения допускают сперму с содержанием в 1 мл не более 5 тыс. микробных тел при отсутствии патогенной микрофлоры и синегнойной палочки.

Источники энергии для движения спермиев. Движения спермиев требу­ют значительных затрат энергии. Основными ее источниками являются угле­воды (глюкоза, фруктоза, сорбит), липиды, свободные аминокислоты. Энер­гию спермии получают в результате трех сложных биохимических процес­сов: дыхания, гликолиза и распада аденозинтрифосфата (АТФ).

Дыхание - это получение энергии для движения и других жизненных процессов путем расщепления в присутствии кислорода различных пита­тельных веществ, таких как углеводы, жиры, белки. Наиболее легко при ды­хании в спермиях окисляются простые сахара (фруктоза и глюкоза). При на­личии фруктозы отмечается меньший расход липидов, а белки почти не рас­ходуются. Около 90% всей энергии спермии получают за счет дыхания.

Гликолиз (или фруктолиз)- это получение энергии путем расщепления сахароз в безкислородной среде. Несмотря на то, что при гликолизе спермии получают в 19 раз меньше энергии, чем при дыхании этот биохимический процесс имеет для спермиев важное значение, так как в половых путях самки кислорода нет.

Энергия, полученная в результате дыхания и гликолиза, аккумулируется в митохондриях спиральных нитей спермия в виде особого органического соединения - аденозинтрифосфата (АТФ). В хвосте спермия имеется специ­альный сократительный белок - спермозин и движутся спермии за счет энер­гии, которую отдает спермозину аденозинтрифосфат (АТФ).

Знать каким путем спермии получают энергию очень важно, так как ус­тановлено, что основная причина гибели спермиев вне организма - это рас­ходование энергии и накопление продуктов метаболизма или распада.

Методы оценки качества спермы

Понятие об оценке качества спермы включает в себя определение его биологической полноценности, т.е. способ­ности оплодотворить яйцеклетку и дать начало новому жизнеспособному по­томству. Методы определения оплодотворяющей способности спермы делят­ся на прямые и косвенные. К первой группе относится определение по ре­зультатам осеменения (отел, ректальное исследование через 2,5-3 месяца по­сле отела, отсутствие полового цикла). Как видно, для оценки спермы этими методами требуется длительное время. Поэтому в практике, наряду с прямы­ми, применяются косвенные методы. Эти методы позволяют быстро, в тече­ние 10-30 мин определять качество и количество спермиев, полученных в эя­куляте и назначить для осеменения такую дозу спермы, которая обеспечива­ла бы плодотворное осеменение, но не допускала ненужного перерасхода спермы. Ибо одним из необходимых условий получения максимального ко­личества приплода от ценных производителей - это рациональное использо­вание их спермы.

Ценность того или иного косвенного или предварительного метода оценки качества спермы определяется степенью его корреляции с показате­лем оплодотворяющей способности спермы.

Для прогнозирования оплодотворяющей способности спермы предло­жены физические, биохимические, биологические методы исследования. В их число входят органолептическая оценка по объему, запаху, цвету, конси­стенции, однородности, определение рН, осмотического давления, подвиж­ности, выживаемости спермиев, процента их с аномальной морфологией, ос­мотической резистентностью, устойчивости к холодовому удару, содержание аденозинтрифосфата, активности дегидрогеназ.

В практике искусственного осеменения наибольшее применение полу­чила оценка спермы по органолептическим признакам, концентрации, под­вижности и переживаемости.

Для определения качества спермы на чистое предметное стекло сте­рильной палочкой или пипеткой наносят каплю спермы, накрывают покров­ным стеклом и микроскопируют при увеличении 140-300 раз. Исследования проводят при температуре 38-40°С, для чего применяют специальные термо­статы или обогревательные столики (водяные, электрические).

Сперма может быть густой (средней густоты) - Г, редкой - Р, и без спер­миев - А - азоспермия.

Сперма густая - все поле зрения микроскопа густо заполнено спермия-ми. Соответствует приблизительно концентрации более 1 млрд. спермиев.

Сперма средняя - между спермиями имеются промежутки примерно равные длине спермия. Концентрация такой спермы от 600 млн. до 1 млрд. спермиев.

Сперма редкая - в поле зрения микроскопа промежутки между спер­миями превышают их длину. В 1 мл такой спермы содержится менее 600 млн. спермиев.

Для более точного определения концентрации спермиев применяют счетные камеры (Томма, Горяева и др.), фотоэлектрические колориметры или электрогемометры в соответствии с имеющимися наставлениями к этим приборам.

Активность (подвижность) спермы определяют по десятибалльной шкале. Чем она подвижнее, тем лучше качество спермы. Высшую оценку -10 баллов ставят, когда более 95% спермиев имеют прямолинейно-поступательное движение, 9 баллов соответственно - 90%, 8 баллов - 80% и т.д.

Если в поле зрения микроскопа видны спермии с манежным движением (при попадании в сперму воды), то такую сперму обозначают буквой М, с колебательным - К, а неподвижность их - Н. Окончательно оценивают каче­ство спермы с учетом густоты и активности, например: Г - 9 сперма густая, содержит 90% спермиев с прямолинейно-поступательным движением.

Микроскопическое исследование эякулята показывает, что среди нор­мальных спермиев всегда встречаются патологические формы в виде изоли­рованных головок и хвостиков, гигантских и карликовых спермиев, спермиев с двумя головками, с двумя хвостиками, с головками неправильной формы, с закрученными и ненормально искривленными хвостиками.

Присутствие в сперме большого количества спермиев с ненормальной формой называется тератоспермией. В качестве конкретных причин образо­вания уродливых форм спермиев отмечаются:

1. Поражение семенника и придатка (гигантские и карликовые спермия).

2. Длительные промежутки между коитусами (обуславливающие старе­ние и распад спермиев в придатке), отдельные головки, изолированные хво­стики.

3. Половое истощение производителя вследствие большой половой на­грузки или недостаточного кормления (спермии с протоплазматической кап­лей в области шейки, тела и хвоста, т.е. незрелые спермии).

Быки, дающие сперму с содержанием более 18% уродливых спермиев, должны рассматриваться как бесплодные.

Определение выживаемости (живучести) спермиев вне организма. Из­вестно, что чем дольше сохраняется жизнь спермиев, тем выше их оплодо­творяющая способность. В.К. Милованов (1962) предложил определять абсо­лютный показатель живучести спермы. Делается это так. Образец спермы, после разбавления эякулята, оставляют в холодильнике при 2-5⁰ С и ежеднев­но определяют активность спермиев при температуре 38-40⁰ С до полной их гибели. Суммировав все произведения времени (в часах), в течение которого наблюдалась та или иная активность, на активность спермиев ( в баллах), получают абсолютный показатель живучести. Для спермы быка он должен быть не ниже 1400. Максимальная продолжительность жизни спермиев (в ча­сах) должна быть для спермиев быка - не менее 200.

Для определения выживаемости спермиев после оттаивания применяют экспресс-метод. Сперму после оттаивания ставят на инкубацию в водяную баню при температуре 38°С. Фиксируют время оттаивания и одновременно определяют исходную подвижность спермиев. Через 5 часов оценку повто­ряют. Пригодной для осеменения считают сперму быка, исходная подвиж­ность которой не менее 4 баллов и выживаемость 5 ч.

Согласно действующим в настоящее время ГОСТам, свежеполученная сперма быка считается пригодной для разбавления, если она соответствует следующим требованиям:

Объем эякулята не менее 3,0 мл;

Цвет - молочно-белый или кремовый;

Консистенция сливкообразная;

Запах - нормальная сперма быка запаха не имеет;

Концентрация спермиев - не менее 0,4 млрд/мл;

Подвижность - не менее 8,0 баллов;

Выживаемость спермиев при 2-5°С после разбавления ГЦЖ средой:

Относительная - не ниже 249 ч;

Абсолютная - не ниже 1400 ч.

Количество спермиев с аномальной морфологией - не более 18%;

Количество патогенных микробов в 1 мл - не более 5000.

Разбавление, хранение и транспортировка спермы

Чтобы увеличить объем эякулята, а также для того, чтобы сохранить оплодотворяющую спо­собность спермиев на более длительный срок, при хранении их вне организ­ма сперму разбавляют специальными средами.

Для сохранения спермы вне организма нужно создавать условия, кото­рые тормозили бы расходование внутренних запасов в спермиях и не вызы­вали их гибель.

Синтетическая среда обычно состоит из трех компонентов. В состав среды для спермы быка входят:

Сахара (глюкоза, лактоза) - служат источником энергии для спермиев. Помимо этого они участвуют в поддержании осмотического давления, пони­жают электропроводность среды, предохраняют спермии от потерь электри­ческого заряда. С желтком куриного яйца образуют биокомплексы, защи­щающие мембрану спермиев от повреждений при охлаждении.

Цитрат натрия. Создает буферность среды, нейтрализует конечные про­дукты жизнедеятельности спермиев, связывая ионы кальция и тяжелых ме­таллов, обеспечивает снижение их уровня до оптимального.

Глицерин. Защитное действие глицерина связано с понижением точки замерзания растворов. Глицерин задерживает начало кристаллизации (основ­ной причины гибели клеток при замораживании), замедляет рост кристаллов, снижает осмотическое давление растворенных веществ при замораживании до эвтектической точки (-46,5⁰ С). Глицерин всегда находится в жидкой фазе раствора, вследствие чего концентрация осмотически активных веществ уменьшается, что и способствует сохранению клеток.

Желток куриных яиц. Содержит лецитин и липопротеины. Они создают на поверхности спермиев адсорбционный слой, предохраняющий спермии от холодового шока, который подстерегает спермии до температуры - 51⁰ С, то есть пока в сперме сохраняется жидкая фаза.

Спермосан ППК. Комплексный антибактериальный препарат, состоя­щий из пенициллина, полимиксина, канамицина. Такая комбинация эффек­тивно тормозит размножение микроорганизмов в сперме.

Для разбавления и кратковременного хранения спермы быка при темпе­ратуре +2-5⁰ С необходимы следующие компоненты: вода дистиллированная - 100 мл, глюкоза - 3 г, натрий лимоннокислый, трехзамещенный, пятивод-ный - 1,4 г, желток куриного яйца - 12 мл, спермосан ППК - 75000 ИЕ.

С момента получения спермы от производителя до разбавления должно пройти не более 10 мин. В зависимости от подвижности и концентрации спермиев сперму быка разбавляют так, чтобы в одной дозе при всех способах хранения перед осеменением было 10-15 млн. спермиев с прямолинейно-поступательным движением. Сперму быков, сохраненную при температуре +2-5⁰ С, используют для осеменения коров и телок в течение 3 суток с актив­ностью спермиев не ниже 7 баллов, а после хранения в замороженном со­стоянии - не ниже 4 баллов.

Температура синтетической среды перед разбавлением спермы должна быть одинаковой со спермой (27-35°С). Среду осторожно приливают к спер­ме, соблюдая правила асептики.

Для разбавления и замораживания спермы быка в форме гранул (капе­лек) применяют лактозо-желточную среду следующего состава: вода дистил­лированная - 100 мл, лактоза - 11,5 г, желток куриного яйца - 20 мл, глице­рин - 5 мл.

Продолжение · 5

Разбавляют сперму одномоментно, так чтобы в одной грануле (0,2 мл) после оттаивания содержалось не менее 15 млн. подвижных спермиев. Раз­бавленную сперму (температура 31±1,8°С) охлаждают при 2-5°С в течение 4 ч и замораживают на фторопластовых пластинках с лунками в специальных емкостях, заполненных жидким азотом. Наносят сперму на охлажденную пластину с помощью охлажденных шприцев или полиэтиленовой капельни­цы. После выдержки пластины в течение 1-2 мин над жидким азотом и затем в жидком азоте пластину поднимают до верхнего уровня емкости, охлажден­ной лопаткой сгребают гранулы в охлажденный контейнер или марлевый мешочек и переносят на хранение в специальное хранилище (КВ-620 и др.) емкостью 100-200 тыс. доз.

Более чем сорокалетний опыт применения в нашей стране заморажи­вания спермы в форме гранул наряду с несомненными достоинствами (про­стота, рациональное использование криогенного оборудования) имеет и не­достатки:

1. Большая доля низкопроизводительного труда при осуществлении ос­новных технологических операций.

2. Отсутствие маркировки необлицованных гранул спермы.

3. Прямой контакт с хладагентом (жидким азотом) при хранении гранул спермы в марлевых мешочках, приводит к адсорбции на поверхности гранул микроорганизмов и механических примесей.

Для устранения этих недостатков в нашей стране был разработан метод замораживания спермы в облицованных гранулах. Сущность его заключается в том, что разбавленной спермой заполняют топкую полимерную трубку, за­тем с помощью автоматического устройства ее делят на спермодозы с одно­временной герметизацией и маркировкой.

В 1975 г. Р. Кассу (Франция) для расфасовки спермы при замораживании впервые применил соломинки из полипропилена (пайеты) емкостью 0,5 мл. На бейсогальской станции искусственного осеменения (Литва) в 1981 г. вве­дена была в эксплуатацию технологическая линия по замораживанию спермы быков в полипропиленовых соломинках отечественного производства емко­стью 0,25 мл. Расфасовку проводят на специальной машине, которая автома­тически наполняет соломинки спермой и укупоривает стеклянными шарика­ми. Соломинки ставят в штативы по 30 штук и заключают в пластмассовые пеналы: их выдерживают 4 часа при температуре 4-5⁰ С, а затем переносят в газообразный азот (температура – 140⁰ С) на 3 мин. для замораживания.

Эта методика наиболее перспективна. Она позволяет достичь высокой степени асептизации, механизации и автоматизации на всех этапах техноло­гической обработки спермы, перевести замораживание спермы на промыш­ленную основу. Криоконсервация спермы в пайетах устраняет недостатки в технологии, присущие изготовлению как необлицованных, так и облицован­ных гранул, а также исключает потери спермы при оттаивании и осеменении самок.

Сперму, сохраняемую при 2-5°С, фасуют в одноразовые стерильные по­лиэтиленовые ампулы, полиэтиленовые пробирки объемом по 1 мл или во флаконы из-под антибиотиков. Полиэтиленовые ампулы запаивают, а про­бирки и флаконы закрывают стерильной нетоксичной пробкой и закрепляют ее резиновым кольцом. Сперму быка перевозят и хранят в широкогорлых пищевых или пластмассовых термосах.

Замороженную сперму перевозят и хранят в сосудах Дыюара марки СДС-50, СДС-20, СДС-5 и др. Эти сосуды представляют собой стальные или алюминиевые двустенные емкости с вакуумно-порошковой либо многослой­но вакуумной изоляцией.

Вместимость их варьирует от 5 до 50 л, суточный расход жидкого азота колеблется от 1 до 3% в зависимости от размеров сосу­дов и качества изоляции. Периодически сосуды пополняют жидким азотом. Азот доставляют на пункты искусственного осеменения в транспортных резервуарах на автомобилях - азотовозах.

Сохраняемая сперма должна быть полностью покрыта жидким азотом. Только в этом случае гарантируется сохранение оплодотворяющей способно­сти спермы в течение длительного времени. Установлено, что при подъеме канистр более чем на 10 см от уровня жидкого азота, температура сохраняе­мой спермы поднимается до -50-60⁰ С, а процессы рескристаллизации (обра­зование кристаллов при оттаивании), начинаются уже при температуре ми­нус 120-140°С, что ведет к снижению качества спермы. По этой же причине при перекладывании спермы из сосуда в сосуд нельзя держать емкости со спермой вне азота более 5-10 сек.

Оттаивание спермы

Оттаивать замороженную сперму нужно быстро, чтобы не образовались кристаллы, которые, как указывалось, губительно действуют на спермии. Для оттаивания спермы необходима водяная баня и специальный разбавитель. В качестве разбавителей в Приморском крае ис­пользуется 2,9 % раствор лимоннокислого натрия, расфасованный в стеклян­ные ампулы объемом 1 мл, а также желточный разбавитель (В.И. Коровко, 1974). Последний представляет собой разбавитель, который применяется для хранения спермы при температуре 2-5⁰ С, но замороженный в форме гранул на фторопластовой пластине объемом 0,4-0,5 мл. Этот разбавитель можно долго хранить, и он лучше защищает сперму после оттаивания от неблаго­приятных факторов внешней среды. Желточный разбавитель нужно оттаи­вать также быстро, как и сперму (при температуре +38-40⁰ С), чтобы он не потерял своих защитных свойств.

Оттаивание спермы в цитратном разбавителе проводят так:

1. Тщательно моют и стерилизуют кипячением или фломбированием нужное количество пенициллиновых флаконов и пробок к ним.

2. Ампулу с цитратным разбавителем протирают спиртовым тампоном, открывают ее и содержимое выливают во флакон.

3. В водяной бане создают температуру не ниже 43-45°С и помещают в нее флакон с разбавителем (1 мл).

4. После того, как разбавитель нагреется до температуры 38-40°С, в него помещают гранулу спермы для оттаивания (температура измеряется по тер­мометру, помещенному в водяную баню).

5. Во время оттаивания спермы (15-20 сек) флакон нужно слегка пока­чивать, не вынимая из водяной бани. Это делается для того, чтобы флакон со спермой постоянно соприкасался с теплыми слоями воды, а также для рав­номерного размещения спермиев в разбавителе.

Как только гранула полностью растворится, набрать сперму в шприц и немедленно использовать.

Оттаивание спермы в желточном разбавителе.

1. В водяной бане, имеющей температуру 45-50°С, помещают сухой, стерильный, пенициллиновый флакон (больше 50⁰ С нельзя, иначе желток свернется).

2. После нагревания флакона до температуры 42-23°С, в него помещают 2-3 гранулы желточного разбавителя (чтобы объем среды был 0,8-1,0 мл).

3. После того, как температура желточного разбавителя достигнет тем­пературы 38-40⁰ С, в него помещают гранулу спермы для оттаивания.

4. Как только сперма оттает - немедленно использовать.

После оттаивания держать сперму в водяной бане или на столе, а также в шприце нельзя, это снижает ее качество. Сразу в водяной бане опаивать сперму для двух-трех коров или телок также нельзя, так как нарушается тем­пературный режим оттаивания спермы, что ухудшает ее качество.

Оттаянная сперма подвержена действию холодового удара, ее нельзя снова замораживать, так как она погибнет. Необходимо после оттаивания оберегать сперму от прямых солнечных лучей, яркого электрического света, резкого снижения или повышения температуры, воды, пыли, лекарственных и пахучих веществ, так как все это снижает оплодотворяющую способность спермы.

Техника искусственного осеменения коров и телок

С тех пор как был разработан метод искусственного осеменения, техника введения спермы в половые пути самок непрерывно совершенствовалась. В настоящее время из­вестно 4 способа цервикального (в шейку матки) введения спермы.

1. Визоцервикальный. Эта техника осеменения была предложена в 30-е г. В.К. Миловановым. При этом способе после туалета в области вульвы про-стеррилизованное и увлажненное стерильным физраствором теплое гинеко­логическое зеркало с осветителем вводят во влагалище, раздвигают бранши, чтобы можно было видеть устье канала шейки матки, затем шприц-катетер направляют в канал шейки матки, продвигают на глубину 4-6 см и плавным нажимом на поршень шприца вводят дозу спермы.

Для дезинфекции шприца в лаборатории пункта должно быть шесть ба­нок с притертыми крышками емкостью 100 мл. В банку под номером 1,3 и 4 наливают стерильный свежеприготовленный 1% раствор натрия хлорида или 2,9 % раствор натрия цитрата, в банку № 2 - 70% спирт.

Если используется сперма одного быка, то проводят обработку только наружной поверхности шприца-катетера спиртовым тампоном (96% спир­том). Необходимо при этом соблюдать осторожность, чтобы капли спирта не попали с тампона в канал катетера.

При осеменении коров и телок спермой разных быков вначале протира­ют спиртовым тампоном наружную поверхность шприца-катетера, а затем 5-6 раз промывают его раствором из баночки № 1. После этого шприц-катетер обеззараживают 70 % спиртом из баночки № 2. Остатки спирта удаляют про­мыванием шприца-катетера теплым раствором из баночки № 3 и № 4 по 3-4 раза. После каждого промывания раствор из шприца выливают в толстостен­ную чашку. Закрыв канюлю шприца стерильной марлевой салфеткой, держа катетером вниз, движением поршня освобождают шприц от остатков раство­ра.

Можно простерилизовать шприцы-катетеры в сушильном шкафу в разо­бранном виде при температуре 130-180°С в течение 15-30 мин или прокипя­тить в дистиллированной воде.

В подготовленный шприц набирают сперму, после чего (катетером вверх) поршнем вытесняют пузырьки воздуха до появления капли спермы, которую берут на предметное стекло для исследования, а шприц помещают на стерильную подставку.

Влагалищное зеркало стерилизуют в кипящей дистиллированной воде и течение 15-20 мин с последующим просушиванием или фломбированием на некоптящем пламени спиртового тампона.

Перед осеменением стерильное влагалищное зеркало увлажняют теплым физиологическим раствором, а осветитель тщательно протирают спиртовым тампоном, смоченным 96% спиртом-ректификатом.

Телок осеменяют, как и коров, но используют при этом зеркало меньше­го размера. Этот способ прост, ему легко обучиться, однако подготовка инст­рументов, их мытье и стерилизация, ежедневное приготовление рабочих рас­творов требует больших затратах времени. Кроме того, гинекологическое зеркало служит источником термических и механических раздражений ре­цепторов половых путей, что вызывает ответные реакции самки, снижающие вероятность оплодотворения. Этот метод нельзя применить в тех регионах, где сперму быков замораживают в облицованные гранулы или пайеты.

2. Ректоцервикальный. Это наиболее распространенный из всех исполь­зуемых в скотоводстве техник осеменения, был предложен в 1938 г. датски­ми специалистами. В большинстве стран мира он является единственным способом, который в одинаковой мере пригоден как для осеменения коров и телок, так и для пересадки зародышей реципиенту.

Комплект инструментов для ректоцервикального осеменения предна­значен для одноразового применения и включает: полистироловую осемени -тельную пипетку длиной 42 см, полиэтиленовую ампулу или 2-граммовый нейлововый шприц с переходной муфтой и полиэтиленовую пятипалую пер­чатку.

Техник вначале проводит санитарную обработку половых органов жи­вотного. Затем пакет с осеменительными пипетками вскрывает, выдвигает одну пипетку и соединяет ее с 2-граммовым шприцем. Осеменительную пи­петку наполняет спермой.

Для осеменения этим способом руку в перчатке вводят в задний участок прямой кишки животного. Затем несколько отодвигают руку назад, и распо­лагают ее так, чтобы большой палец разместился в области промежности выше угла половой щели, а остальные четыре пальца надавливали на ниж­нюю стенку прямой кишки впереди ануса. Это приводит к раскрытию поло­вой щели. Подготовленный инструмент для осеменения вводится в половые пути по верхней стенке преддверия влагалища вначале под углом 30-40⁰, чтобы он не попал в отверстие мочеиспускательного канала, а затем - гори­зонтально до упора в свод влагалища. После полного введения инструмента во влагалище рукой через прямую кишку фиксируют шейку матки и направ­ляют осеменительную пипетку в цервикальный канал. Убедившись, что пи­петка попала в отверстие, легкими вращательными движениями натягивают шейку матки на пипетку до тех пор, пока передний ее конец войдет на глуби­ну 6-10 см. Нажатием на поршень шприца вводят сперму.

Если сперма расфасована в пайеты, то для ректоцервикального осемене­ния коров применяют катетер Кассу, состоящий из топкой металлической трубки, толкателя и фиксационного кольца. В этом случае техник после оттаивания пайеты отрезает ножницами лабораторную пробку, помещает пай-етy в переднюю часть катетера, надевает на него защитный чехол из пропи­лена и закрепляет фиксационным кольцом. Осеменение проводят описанным выше способом.

3. Маноцервикальный. Эта техника осеменения коров была предложена учеными Украины в 60-е года. В набор инструментов входят: полиэтилено­вая ампула для спермы, полиэтиленовый катетер длиной 7,5 см, перчатка трехпалая из полиэтиленовой пленки. При осеменении коров спермой в об­лицованных гранулах вместо катетера и ампулы используют зоошприц. Зоо-шприц имеет корпус, съемный флянец и толкатель.

Техника осеменения состоит в следующем: Ампулу извлекают из паке­та, колпачок ампулы срезают ножницами или скальпелем, подсоединяют ка­тетер. В осеменительный прибор, состоящий из ампулы и катетера, набирают сперму. После тщательного туалета области вульвы правую руку с надетой полиэтиленовой перчаткой осторожно вводят во влагалище, определяют пальпацией степень раскрытия канала шейки матки, массажируют влагалищ­ную ее часть. Не вынимая полностью руку из влагалища, другой рукой по­дают осеменительный прибор. Под контролем указательного пальца вводят катетер в канал шейки матки на глубину 1,5-2 см. Продолжая массаж шейки матки кончиками пальцев, подталкивают ампулу ладонью до тех пор, пока катетер полностью не войдет в канал (на глубину 6-7 см). Поднимают ампулу на 2-3 см (угол наклона 15-20°) и выдавливают из него сперму путем после­довательного сжатия, начиная от донышка. Не разжимая ампулу, руку с осеменительным прибором извлекают из влагалища постепенно, плавными дви­жениями (чтобы избежать возникновения вакуума во влагалище и вытекания спермы). После окончания работы осеменительный прибор и перчатку унич­тожают.

При маноцервикальном осеменении коров спермой в облицованных гра­нулах используют зоошприцы. Гранулу вкладывают в корпус инструмента, досылают ее толкателем до переднего упора и через выходное отверстие де­лают прокол оболочки гранулы стерильной иглой. После предварительной подготовки половых органов коровы инструмент вводят в канал шейки матки на глубину 6-7 см, после чего большим пальцем нажимают на упор толкателя и выталкивают сперму.

4. Вульвоцервикальная (итальянская) техника осеменения коров приме­няется в некоторых странах Средиземноморья, Японии, Прибалтики. Сущ­ность этой техники состоит в том, что шейку матки при помощи пулевых щипцов и специального расширителя подтягивают почти до преддверия вла­галища, затем сперму вводят пипеткой глубоко в канал шейки матки. Эффек­тивность осеменения этим методом высокая, но требуется два техника осе­менатора (В.К. Милованов, 1968).

Факторы, влияющие на результаты искусственного осеменения

ко­ров и телок

Знание и опыт техника-осеменатора. Своевременное и успешное осеме­нение животных во многом зависит от умелой работы техника-осеменатора, его знаний, опыта, отношения к порученному делу. Хорошо понимая это, опытные руководители и специалисты уделяют большое внимание подбору и подготовке техников, созданию для них нормальных условий работы. Прак­тика показывает, что если на должности техника добросовестный, знающий свое дело человек, то хозяйство из года в год получает высокие результаты в работе по воспроизводству стада. Основной секрет успеха передовых техни­ков в том, что они не только сами хорошо знают и строго соблюдают техно­логические правила искусственного осеменения, но и требуют, чтобы доярки, скотники-пастухи выполняли необходимые условия высокой оплодотворяе­мости коров (правильно готовили животных к отелу, не допускали грубого обращения с животными при доставке в пункт, обязательно выдерживали животных на привязи после осеменения и т.д.).

К сожалению, имеются еще хозяйства, где подбору и подготовке техни­ков не уделяется должного внимания. Такие хозяйства посылают на курсы людей, не имеющих среднего образования и опыта работы в животноводстве. А ведь для успешного проведения искусственного осеменения необходимо хорошо знать не только технологические правила работы, но и основы зоо­технии и ветеринарии. Известно, что техник обязан вести первичный зоотех­нический учет (ставить номера и регистрировать новорожденный молодняк, вести записи о результатах работы, определять время запуска и отела живот­ных и т.д.). Кроме того, метод искусственного осеменения беспрерывно усо­вершенствуется и усложняется. Все это требует, чтобы техник имел образо­вание не ниже 11 классов.

Работа техника является чрезвычайно ответственной, так как от его ра­боты зависит не только успех фермы, достигнутый на сегодняшний день, но и какая основа заложена на будущее. Известно, чем больше получают телят, тем лучше условия для увеличения производства молока и мяса.

Успех работы по искусственному осеменению зависит от опыта накоп­ленного в процессе работы. В.В. Кияткин провел анализ работы техников в Приморском крае за 1986 г. и установил, что техники-осеменаторы, имеющие стаж работы до 5-ти лет, получали по 84 теленка от 100 коров, при стаже работы от 5 до 10 лет - по 87 телят и при стаже работы свыше 10 лет по 89 телят от каждых 100 коров.

К сожалению, имеется еще немало хозяйств, где наблюдается большая текучесть кадров этой профессии. Объясняется это двумя причинами.

Во-первых, на должность техников подбирают людей, имеющих низкий уровень общеобразовательной подготовки и не имеющих опыта работы в животноводстве.