Методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота

При производстве молочных продуктов используются различные режимы пастеризации. При производстве сметаны, масла, кисломолочных напитков, йогуртов чаще всего применяют пастеризацию при 85-87 °С с выдержкой 5-7мин или 90-95 °С с выдержкой 2- 3мин. Однако при производстве сыров такие температурные режимы пастеризации не приемлемы, так как ухудшают способность молока к сычужному свертыванию. В сыроделии используется режим - 72 °С с выдержкой 15с., что может быть недостаточно для инактивации ВЛКРС (Свириденко Г.М., 2003).

Существует мнение о том, что возможна активация «молчащих» вирусов, встроенных в геном человека и утративших участки генов gag, pol, env при поступлении этих участков с другим не дефектным вирусом (В.Н. Сюрин., Р.В. Белоусова, Н.В. Фолина, 1991, Б.С. Сенченко, А.Н. Трошин, Я.М. Кавунник, 1998).

Опасность присутствия ВЛКРС в продуктах питания подтверждается данными Y. Aida, M. Miyasaka, K. Okada (1989), показавшими, что при экспериментальном заражении овец развитие лимфосаркомы происходит чаще и быстрее, чем при аналогичном заражении крупного рогатого скота. Аналогичные данные приведены в работе F. Dequiedt, G. Cantor, Т. Valerie (1999).

Однако на протяжении многих лет сотрудники различных научных учреждений проводили обширные эпидемиологические и эпизоотические исследования, в результате которых взаимосвязи заболеваемости лейкозом животных и естественным инфицированием человека установлено не было, несмотря на то, что по структурному строению и функциональным особенностям ВЛКРС схож с вирусом Т-клеточного лейкоза человека. Длительные наблюдения за людьми, обслуживающими скот в неблагополучных по лейкозу хозяйствах, а также занятых на убое и переработке больного или инфицированного скота, повышенного риска заболеваемости не выявили (В. Мадисон, Л. Мадисон, 2006). В ряде работ иностранных авторов также получены отрицательные результаты при обследовании людей, работающих с больными животными и вирусным материалом. Так, в одном эксперименте при обследовании 400 больных лейкозами и опухолями были получены отрицательные результаты с антигеном вируса лейкоза КРС (Н.И. Петров, 2001). В исследованиях J. Lee, Y. Kim, Kang C.S. (2005) пробы крови от 517 больных различными онкологическими заболеваниями методом ПЦР были проанализированы на наличие ДНК провируса лейкоза крупного рогатого скота. Ни в одном случае положительный результат не получен.

В большинстве стра - членов Евросоюза приняты и выполняются на национальном уровне программы по искоренению наиболее распространенных инфекционных заболеваний сельскохозяйственных животных: инфекционного ринотрахеита, диареи, лейкоза КРС. Так, например, в Швеции программа по искоренению лейкоза была начата в 1990 году. На тот момент ситуация с распространением лейкоза в Швеции была наихудшей среди стран Западной Европы: 10% всех коров, возраст которых составлял более 2 лет были инфицированы ВЛКРС. В результате 10 – летнего выполнения программы по искоренению лейкоза Швеция имеет возможность объявить себя свободной от лейкоза (А. П. Лиманский, О. Ю. Лиманская, 2001).

Во Франции в 1988 г. была разработана и реализована новая программа ликвидации лейкоза. В течение года по результатам массового серологического исследования на лейкоз (85% скота в 79% стад страны) было выявлено и забито 110 тыс. животных. Общая стоимость программы составила 177,7 млн. франков (более 30 млн. долларов).

В последние 5 лет в Соединенных Штатах Америки была принята Национальная программа борьбы с лейкозом, которая субсидируется Федеральным правительством. Поводом данному событию послужили: тенденция роста заболеваемости, требования ужесточения мер борьбы с лейкозом со стороны стран ЕЭС, отказ от импортных закупок США племенного молодняка, спермы и эмбрионов.

Цель этой программы - через систему сертификация благополучия стад по лейкозу создать фермерам максимум благоприятствования при осуществлении импортноэкспортных операций.

Говоря о стратегическом подходе к проблеме лейкоза крупного рогатого скота в США, следует отметить, что в научных центрах соответствующего профиля рассматривались три возможных принципиальных подхода к решению проблемы:

• использование активных средств специфической защиты.

• серологическая диагностика (иммунодиффузия в геле агара (РИД) и иммуноферментный анализ (ИФА)) и удаление или убой инфицированных ВЛКРС животных.

• изменение технологии ведения животноводства, предусматривающее нейтрализацию основных факторов и путей передачи ВЛКРС от инфицированных животных.

Все три варианта отрабатывались на крупном рогатом скоте, содержащемся на экспериментальных базах Луизианского, Мичиганского университетов, Национального центра болезней животных (США), а также в отдельных научных центрах других стран.

По результатам проведенных исследований были сделаны выводы о том, что использование вакцины против лейкоза крупного рогатого скота (экспериментальный вариант) в настоящее время не представляется возможным. Появившиеся в печати сообщения об удачном испытании противолейкозных вакцин, подтверждены не были (А.Д. Альштеин, 2000, W.H. Ward, C.K. Dimmock, F.W. Eaves, 1992; R.C. Daniel, M.H. Gatei, M.F,Good, D.B. Boyle, M.F. Lavin, 1993). Наиболее эффективный (рекомбинантный) тип вакцины, разрабатываемый в Японии, находится сегодня в стадии экспериментальной проверки.

Второй вариант оздоровления был основан на применении серологического метода диагностики. Этот метод (РИД) достаточно хорошо отработан в производственных условиях и нашел широкое применение, прежде всего, в странах ЕЭС.

Третий вариант предполагал своевременное выявление инфицированных животных и выполнение технологических (хозяйственных) и специальных (ветеринарных и др.), мероприятий в строго определенной последовательности, предотвращающей распространение ВЛКРС от источника инфекции к восприимчивым животным.

Следует отметить, что последний вариант сопряжен с минимальными экономическими издержками, однако предполагает более длительные (до 5 лет) сроки оздоровления ферм от лейкоза.

Добровольные программы борьбы с лейкозом крупного рогатого скота разработаны и приняты в свое время в Канаде, Японии и некоторых других странах мира (Р.Ф. Галлиев, А.А. Руденко, Ф.Р. Валиев, 2003).

Основные положения этих программ включают ежегодное 2-3-х кратное исследование животных в РИД, отдельное (но не изолированное) содержание инфицированных животных, выбраковку коров (в том числе и по причине возраста, продуктивности) и интенсивную замену маточного стада неинфицированным молодняком. Такая программа при исключении горизонтальной передачи ВЛКРС, позволила за относительно короткое время вести эффективную оздоровительную работу в этих странах, причем с минимальными экономическими издержками. Однако программа подтвердила свою эффективность только в случае не высокой инфицированности стад ВЛКРС.

В Великобритании были прияты более радикальные меры борьбы с лейкозом крупного рогатого скота, позволившие добиться практически повсеместного оздоровления стад. При этом группа экспертов провела тщательную экономическую оценку стоимости выполненных работ, которая включала: количество инфицированных животных в одном стаде, число коров, павших по причине лейкоза, количество скота с клинико – гематологическими признаками, стоимость скота, выбракованного по причине вирусоносительства, затраты, связанные с выполнением процедур дезинфекции, стоимость последующего контроля благополучия. При оценке двух вариантов оздоровления была установлено, что в случае выявления (в РИД) и выбраковки только инфицированных животных, затраты составили 23,6 млн. фунтов стерлингов (около 40,0 млн. долларов). Ликвидация стад, неблагополучных по инфекции ВЛКРС, обошлась налогоплательщикам в 37,2 млн. фунтов стерлингов (более 60,0 млн. долларов).

Изложенные материалы свидетельствуют о том, что практически во всех экономически развитых странах разработаны и реализуются государственные программы оздоровительно-профилактических мероприятий по лейкозу крупного рогатого скота. В Российской Федерации эти программы разрабатываются лишь в отдельных регионах (М.И. Гулюкин, Г.А. Симонян, А.В. Шишкин, 2004; И.М. Донник, А.Т. Татарчук, Н.А. Корнилов, 2005) . По мнению П.Н.Смирнова (2007) в нашей стране оздоровленными от лейкоза КРС можно считать Ленинградскую, Вологодскую, Свердловскую области, республику Саха.

2. Наследственная предрасположенность к лейкозу у крупного рогатого скота и методы еѐ выявления

Инфекционные заболевания домашних животных оказывают существенное влияние на их продуктивность, жизнеспособность и рыночную ценность. Сумма этих эффектов приводит к значительным экономическим потерям, как отдельных производителей скота, так и агропромышленного комплекса в масштабах страны. Вследствие этого, значительные усилия затрачиваются на профилактику и лечение инфекционных заболеваний в животноводстве. Эти усилия с одной стороны являются чрезвычайно затратными за счет стоимости вакцин, антибиотиков, рабочей силы, а с другой имеют и ряд негативных эффектов, например, такие как фармацевтические остатки в пищевых продуктах и растущая резистентность бактерий к антибиотикам. Эти неблагоприятные последствия традиционных профилактических и лечебных мер обусловливают необходимость поиска новых, эффективных и менее дорогих подходов к предупреждению и контролю инфекционной патологии в сельскохозяйственном производстве. Кардинальное решение проблемы может заключаться в выяснении механизмов генетической резистентности к инфекционным заболеваниям у сельскохозяйственных животных и практическом приложении этой информации к их разведению.

Тот факт, что отдельные представители сельскохозяйственных животных, в одинаковой мере подвергавшиеся контакту с возбудителями инфекций, различаются чувствительностью к ним, был известен давно. Эффективное использование информации об естественной резистентности животных к инфекционным заболеваниям в сельскохозяйственной практике зависит от идентификации контролирующих ее геномных локусов. Накопление информации об организации геномов млекопитающих и бурный прогресс в технологиях анализа вариабельности генов создали реальные предпосылки для выявления таких локусов у сельскохозяйственных животных. В настоящее время среди защитных механизмов организма млекопитающих, включающихся при соприкосновении организма с возбудителями инфекционных заболеваний, выделяют: неиммунную неспецифическую резистентность, неспецифический и специфический иммунный ответ. Список генов, участвующих в реализации этих механизмов, уже сейчас достаточно широк и постоянно обновляется в связи с открытием дополнительных эффекторных и регуляторных молекул, ферментов и рецепторов, а также других клеточно-поверхностных и иных белков путей