Методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота

щие российским племенным предприятиям; условия кормления и содержания были идентичными, работали одни и те же техники-осеменаторы. Полученные результаты согласуются с исследованиями, проведенными ранее. Таким образом, в хозяйстве была сформирована новая генетическая структура стада с повышенной устойчивостью к лейкозу КРС, по предварительным оценкам это более чем на 30% позволило сократить количество вирусоносителей среди телят.

На втором этапе оздоровления для выявления вирусоносителей был применѐн метод ПЦР диагностики у телят до 2 месячного возраста.

До использования ПЦР – диагностики специалистами хозяйства ОАО «Племзавод «Дружба» были учтены следующие требования, обязательные для ликвидации лейкоза:

1. Раздельное содержание РИД позитивных и РИД негативных животных

2. Раздельные отѐлы РИД позитивных и РИД негативных коров

3. Выпойка телят молозивом и сквашенным муравьиной кислотой молоком только от РИД негативных коров

4. Раздельное содержание телят в клетках до месячного возраста

5. Использование одноразового инструмента при ветеринарно- зоотехнических манипуляциях.

Перечисленные выше мероприятия способствовали снижению уровня инфицированности взрослого поголовья, однако не позволили ликвидировать заболевание в хозяйстве.

Проведенный нами анализ схем перемещения животных и путей распространения инфекции позволил предположить, что наиболее уязвимым этапом содержания является период с первого по шестой месяцы жизни. В этот период телята от РИД позитивных и РИД негативных коров содержатся совместно группами по 5- 10 голов, а выделить среди них инфицированных метод РИД не позволяет, так как имеет возрастные ограничения для использования (возраст до шести месяцев).

Метод ПЦР, хотя и имеет ряд недостатков, незаменим для использования именно в этот период жизни животных. Всего нами было проанализировано методом ПЦР в период с октября 2011 по март 2012 года 228 проб крови телят айрширской породы, принадлежащих ОАО «Племзавод «Дружба».

На рисунке 4 представлена электрофореграмма продуктов амплификации участка гена gag провируса лейкоза КРС величиной 347 пар нуклеотидов.

• 17 – отрицательный контроль

18 - положительный контроль амплификации

Анализ полученных результатов показал, что с использованием ПЦР удалось выявить 12 голов (или 5%) инфицированных телят. По результатам первого исследования (группа 50 голов, возраст 2 месяца и старше) выявили 4 вирусоносителя, причѐм оказалось, что вирусоносителями в равной мере были телята, полученные и от РИД позитивных и от РИД негативных коров.

Установлено, что эти вирусоносители контактировали с друг с другом. Это ещѐ раз подтверждает возможность перезаражения телят при совместном содержании. Нами было принято решение проводить ПЦР исследования у телят в возрасте 1 - 2 месяцев, до

объединения в группы.

При использовании этого подхода инфицированные телята от РИД – отрицательных коров больше не выявлялись.

Все ПЦР – положительные телята немедленно изолировались из стада.

РИД исследование группы телят, отрицательно прореагировавших в ПЦР (n=216) и достигших возраста 6 месяцев дало отрицательный результат в 100% случаев. Таким образом, в ОАО «Племзавод «Дружба» разработана эффективная схема оздоровления молодняка от лейкоза КРС.

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авилов В.М., Нахмансон В.М. Проблемы оздоровления крупного рогатого

скота от лейкоза // Ветеринария. – 1995. -№ 11. – С. 3-6

1. Альштеин А.Д. Подходы к созданию генно–инженерной вакцины против

лейкоза на основе вируса осповакцины// Тез. докл. II международной научн. конф.: Биотехнология в животноводстве и ветеринарии. – М., 2000. – С. 149 – 151

1. Апалькин В.А. Организация и проведение научно-обоснованных мероприя-

тий при оздоровлении от лейкоза КРС // Сборник научных трудов. Барнаул, - 1997. - С.3334.

1. Апалькин В.А., Гулюкин М.И., Петров Н.И. Лейкоз крупного рогатого ско-

та //Библиотечка «Практик». – Петролазер. – Санкт-Петербург.- 2005. – 106 с.

1. Белов А.Д., Рогожина Г.В. О патогенезе лейкозов крупного рогатого скота //

Ветеринария. -1997. - № 12. – С. 16- 19

1. Белявская В.А. и др. Возможности и ограничения использования ПЦР в ди-

агностике и генотипировании вируса лейкоза крупного рогатого скота // Сб.: Актуальные вопросы зоотехнической науки и практики как основа улучшения продуктивных качеств и здоровья сельскохозяйственных животных. – Ставрополь, 2003. – С.275 – 278

1. Берзяк А.Г., Ковалючко В.С., Гротевич В.С., Киричук Л.И. Опыт ускоренно-

го оздоровления племенного хозяйства от лейкоза. Ветеринария -№12. – 1990. – С. 13-15.

1. Бурба Л.Г. Кунаков А.А. Диагностика лейкозов сельскохозяйственных жи-

вотных.- М., Колос.- 1983. - 191 с.

1. Бурба, Л. Г. Валихов А.Ф., Горбатов В.А. Лейкозы и злокачественные опу-

холи животных / Л. Г. Бурба, А. Ф. Вахилов, В. А. Горбатов. – М. : Агропромиздат, 1988. – 399 с.

1. Бусол В.А., Лиманская О.Ю., Лиманский А.П. ПЦР–диагностика ВЛКРС //

Ветеринарная медицина. – 1998. –В. 74. –С. 35-44

1. Валихов А.Ф. Лейкозы и злокачественные опухоли животных //Под ред.

В.П.Шишкова и Л.Г.Бурбы. -М., 1988. -С. 173-194.

1. Галеев Р.Ф. Вирус лейкоза КРС (культуральные, инфекционные и иммуно-

логические свойства). – Уфа: Ветеринарная медицина. – 1999. – 147 с.

1. Галеев Р.Ф. Теоретическое обоснование, экспериментальное подтвержде-

ние путей передачи вируса лейкоза крупного рогатого скота, усовершенствование методов диагностики и мер борьбы с ним. - Автореф. дисс. докт. вет. наук. Казань. – 2000

1. Галеев Р.Ф., Руденко А.А., Валиев Ф.Р. Диагностика и профилактика лей-

коза КРС // Практик. - № 5-6. – 2003. – С.44 – 48

1. Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А., Ермилов А.А. Разработка и эксперименталь-

ная апробация высокочувствительной тест-системы диагностики вируса лейкоза крупного рогатого скота // Школа-практикум «Методы исследований в биотехнологии сельскохозяйственных животных». – ВИЖ. -2005.-134с С.18-22

1. Глазко В.И., Доманский Н.Н., Созинов А.А. Современные направления ис-

пользования ДНК-технологий//Цитология и генетика. – 1998.- Т. 32.- №5.-С.80-93

1. Горбунов А. П. Теоретические основы и практика оздоровления хозяйств от

лейкоза крупного рогатого скота. // Сборник научных трудов. Екатеринбург, - 2005. - С.23-28. 18. Гулюкин М. И. Состояние и перспективы борьбы с лейкозом крупного ро-

гатого скота // Ветеринария. – 1999. - № 12. – С. 3 – 8

1. Гулюкин М.И. , Замараева Н.В. Медико – биологические аспекты вируса

лейкоза КРС // Сб.: Актуальные вопросы диагностики, профилактики и борьбы с лейкозами сельскохозяйственных животных и птиц. – 2000. –Екатеринбург. –С. 12 – 25

1. Гулюкин М.И. и др. Дифференциальная диагностика гемабластозов круп-

ного рогатого скота // Бюл. ВИЭВ, - М.: 1996. – Вып. 77. – С. 46

1. Гулюкин М.И. и др. Разработка эффективных мероприятий против лейкоза

крупного рогатого скота // Ветеринария. – 2002. - № 12. – С. 3 – 8