Параллельно стандартным флотационным и седиментационным методами, методом обогащения, а так же модифицированным методом Като (1958) проводилось исследование 100 проб фекалий крупного рогатого скота, овец, свиней, кошек, собак. Чувствительность стандартных методов и модифицированного метода Като при исследовании фекалий крупного рогатого скота составила соответственно 56 и 16 %, фекалий овец 89 и 42 %, фекалий жвачных в целом 72,5 и 29 %, свиней 43 и 47 %, плотоядных 30 и 34 %, а после обогащения фекалий крупного рогатого скота 90 и 60 %, фекалий овец 90 и 70%, составив в целом по опыту 83,3 и 63,3 %. Из опыта следует, что метод Като для копрологического исследования фекалий крупного рогатого скота и овец не пригоден из-за низкой диагностической чувствительности, но его можно использовать при исследовании фекалий свиней и плотоядных.
Р.Т. Сафиуллин (2001) дал сравнительную оценку эффективности копрологических методов диагностики нематодозов свиней: Фюллеборна, Дарлинга, Калантаряна, Маллори, Котельникова-Хренова, Щербовича и Сафиуллина. Наиболее эффективным и экономичным оказалось использование флотационных смесей – сульфата магния с нитратом натрия и хлорида цинка с хлоридом натрия, предложенным автором.
Вместе с тем, независимо от чувствительности, гельминтоовоскопические методы оказываются не эффективными, когда заболевание вызвано неполовозрелыми стадиями фасциол. Поэтому необходимо изыскивать методы диагностики гельминтозов животных на всех стадиях развития возбудителя.
Серологическая диагностика. В литературе имеется значительное количество сообщений о возможности использования различных иммунобиологических методов диагностики гельминтозов.
Из них заслуживают внимания реакция связывания комплемента (РСК), иммуноферментный анализ (ИФА), аллергическая проба и другие методы.
В.Г. Эвранова (1956) сообщает, что из всех иммунобиологических реакций, при фасциолезе крупного рогатого скота дает удовлетворительный результат реакция преципитации.
К числу первых иммунологических методов относится РСК, которая впервые в гельминтологии была апробирована в 1911 году Strobel.
Реакцию связывания комплемента при гельминтозах изучали многие исследователи (А.А. Маркарян, 1960; П.Ф. Полуэктова, 1972; О.Г. Полетаева, Э.Г. Заточкина, 1974; С.Н. Белозеров, Т.С. Подседловская, 1985; А.Я. Сапунов, 1995; Т.А. Козлова, 1999; Т.С. Золоткова, М.Д. Новак, 2000; I.C. Petithorу, 1973; R. Tiner, 1975; B. Pesson, N. Leder, G. Madulo – Leblond, 1979 et al).
А.И. Маркарян (1960) применил иммунологические реакции для ранней диагностики и определения сроков заражения аскаридозом детей. Им установлено, что чувствительность реакции агглютинации с кармином не много уступает реакции микропреципитации на личинках. Эозинофилия является далеко не постоянным показателем аскаридоза.
П.Ф. Полуэктова (1972) изучала динамику накопления гуморальных антител у экспериментально суперинвазированных аскаридами поросят с помощью РСК. В качестве антигена использовала обезжиренные цельные солевые экстракты половозрелых аскарид и их маток, приготовленные по методике, описанной В.К. Бережко (1969) в модификации автора. Установлено, что в РСК антитела выявлялись на 7 – 10 день после первичного заражения поросят аскаридами. При суперинвазировании антитела достигали высокого уровня в период с 21 по 42 день и снижались до 0 к 117 – 132 дню инвазии.
О.Г. Полетаева, Э.Г. Заточкина (1974) использовали реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) для определения длительности сезона заражения в очаге аскаридоза. РНГА с аскаридным диагностикумом автор рекомендует в целях определения риска заражения и длительности эпидемического сезона.
А.Я. Сапунов (1995) показал реальную возможность и целесообразность использования серологических методов исследования (РИФ, РЭМА и др.) для изучения в свиноводческих хозяйствах эпизоотической ситуации по паразитоценозам, выявления и последующего удаления из стада не пригодных для воспроизводства инвазированных животных.
Г.А. Козлова (1999) разработала тест-систему для диагностики трихинеллеза свиней иммуноферментной реакцией с антигеном, очищенным моноклональными антителами. Динамика иммунного ответа у свиней, зараженных личинками Т. pseudospiralis при применении тест-системы испытуемым и контрольным антигенами, характеризовалась появлением специфических антител на 25 – 38 и их максимальным уровнем на 85 – 100 дни после заражения.
К настоящему времени накопилось большое количество фактического экспериментального материала, свидетельствующего об эффективности иммунобиологических диагностических методов. По данным Н.В. Демидова (1965), в некоторых странах (Югославия, Япония, Франция, страны Латинской Америки и др.) антигены из фациол уже применяются в практике медицины и ветеринарии для диагностики фасциолеза.
Наличие специфических антител в крови овец, зараженных фасциолезом, впервые было доказано одновременно Вейнтбергом и Пикканаро (1909). Впервые опыты по иммунобиологической диагностике фасциолеза провел в 1921 году Сервенти, используя в качестве антигена алкогольный экстракт из половозрелых фасциол (по Демидову, 1965).
На современном этапе изучения фасциолеза многими отечественными и зарубежными исследователями Л.Д. Мартыненко, А.И. Понамарева, А.М. Сухоруков, (1981); I. Frada de Azevedo (1965), P. Ambroise – Thomas, Kien Truong Thai et al (1967), G. Kagan Irving (1974), J. Kadhmin, al-Attar M (1974), A. Locatelli, T. Simonic (1974), K. Gladusz- Pawiak (1977), E. J. Ruitenberg, A. Capron, D. Bout, F. Knapen (1977), D. Berden, N. Hammet (1978), G. AR.
32
