9. Сравнительная эффективность различных гельминтоовоскопических
методов диагностики трематодозов крупного рогатого скота с искусственной
закладкой яиц
| № п/п | Методы исследований | Реактив | Удельн ый вес раствор а | Количе ство заложе нных в 1 пробе яиц фасцио л | Количест во обнаруж енных в 1 пробе яиц фасциол | Процент выявленн ых яиц фасциол | |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Хим. формула | Норма расход а на 1 л | ||||||
| 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. | Котельникова- Хренова Вишняускаса Щербовича Щербовича Щербовича Вереты Вольфа Маллори Котельникова -Вареничева Сафиуллина Демидова Последователь- ных смывов | Pb(NO3)2 ZnSO4 NaNO3 MgSO4 Na2S2O3 NH4NO3+NaCl K2CO3 C12H22O11 ZnCl2 ZnCl2+NaCl NaCl H2O | 650 450 1000 920 1750 550+250 600 1670 2000 666+280 420 1000 | 1.5 1.39 1.38 1.28 1.40 1.27 1.42 1.28 1.82 1.49 1.19 1.0 | 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 | 1,5±0,02 0,5±0,01 – 2,1±0,06 2,8±0,14 0,7±0,02 2,2±0,07 – 20,0±1,0 14,0±0,6 1,4±0,05 1,0±0,03 | 1,5±0,02 0,5±0,01 – 2,1±0,06 2,8±0,14 0,7±0,02 2,2±0,07 – 20,0±1,0 14,0±0,6 1,4±0,05 1,0±0,03 |
материала. Поэтому изыскание наиболее оптимальных флотационных жидкостей и эффективных гельминтоовоскопических методов диагностики трематодозов остается актуальной проблемой.
Кроме того, анализ данных проведенных исследований показывает, что наиболее высокую диагностическую эффективность проявляют те гельминтоовоскопические методы, у которых в состав флотационных жидкостей входит хлорид цинка. Это такие методы как КотельниковаВареничева и Сафиуллина.
В целях усовершенствования гельминтоовоскопических методов диагностики фасциолеза мы апробировали разные флотационные жидкости из хлорида цинка, приготовленные как из одного ингредиента, так и в комбинации с насыщенным раствором хлорида натрия, отрабатывая их оптимальное соотношение. Нами был модифицирован комбинированный метод Котельникова-Вареничева с насыщенным раствором хлорида цинка (на 1 л воды 2 кг ZnCl2, имеющий плотность 1,82 при 20о С), который приняли за базовый. К этому раствору добавляли насыщенный раствор поваренной соли (второй базовый раствор – на 1 л воды 420 г NaCl), имеющий плотность 1,19 при 20о С в соотношениях 1:0,5, 1:1, 1:1,5, 1:2, 1:2,5, 1:3, 1:4. Собранные из маток гельминтов яйца фасциол (100 экз.) закладывали в пробы фекалий крупного рогатого скота весом 1 г, которые были свободны от яиц трематод. Затем в стаканчики заливали воду в объеме 30 мл, отстаивали 10 мин, надосадочную жидкость сливали, а осадок вносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 2- х минут. После надосадочную жидкость сливали, а в осадок заливали флотационную жидкость, размешивали палочкой и снова центрифугировали 2 мин. при 1500 об/мин. Поверхностную пленку снимали металлической петлей, переносили в сетку Акбаева с последующим просмотром под малым увеличением микроскопа.
В целях стандартизации исследований в работе использовали один и тот же материал, идентичную посуду (стаканчики объемом 30 мл,
центрифужные пробирки объемом 10 мл), отстаивали и центрифугировали пробы в течение одного и того же времени. Работали петлями одинакового диаметра (0,9 мл), подсчет яиц вели в сетке Акбаева, внося в нее 0,2 мл (5 капель) поверхностной пленки. Таким образом, каждую пробу исследовали в сетке Акбаева 5 раз, внося в общей сложности 25 капель (1 мл) поверхностного слоя пленки. Зная количество заложенных в пробах фекалий яиц трематод, оценку осуществляли количественным методом. Все исследования проводили в десяти повторностях, а полученные результаты подвергали статистическому анализу. В качестве контрольного метода использовали седиментационный метод последовательных смывов и комбинированный метод Демидова.
Данные о сравнительной эффективности метода КотельниковаВареничева с различными моно- и комбинированными флотационными жидкостями в сравнении с методами Демидова и последовательных смывов при диагностике трематодозов приведены в таблице 10.
Данные таблицы показывают, что по методу КотельниковаВареничева с насыщенным раствором хлорида цинка было выявлено в среднем 18% яиц фасциол в 1 мл поверхности взвеси. При использовании базисных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 1:0,5 было обнаружено в среднем 32 % яиц фасциол. Комбинированный раствор этих же солей в соотношении 1:1 дал возможность обнаружить 21 ± 0,7 % яиц, а флотационные растворы в соотношении 1:1,5 и 1:2 – в среднем 19 % заложенных яиц фасциол.
При использовании комбинированных растворов с более низким удельным весом (1,32 – 1,41) яйца фасциол не всплывали на поверхность жидкости. Так, при соотношении базисных растворов 1:2,5 было обнаружено в среднем 1 % яиц фасциол, в соотношении 1:3 и 1:4 яйца фасциол в этих растворах не были выявлены.
