Глава 8. Аллергическая диагностика фасциолеза крупного рогатого скота
При изучении сравнительной эффективности аллергической пробы, РСК и копрологического метода исследований при фасциолезе крупного рогатого скота использовали аллерген, изготовленный по методу В.Г. Эврановой (1956).
Содержание белка в аллергенах определяли спектрофотометрическим методом на СФ-4А при длине волн 280 нм.
Стерильность аллергенов устанавливали высевами на мясопептонный агар и мясопептонный бульон с выдержкой в термостате в течение 10 дней.
Токсичность аллергена проверяли на 20 белых мышах путем подкожного введения по 0,5 мл. Мыши находились под наблюдением 10 суток.
Специфичность аллергенов изучали на 10 интактных кроликах, 20 телятах 4 – 6 месячного возраста, а активность – на 200 коровах и 40 нетелях в неблагополучном по фасциолезу хозяйстве.
Препараты вводили кроликам в область брюшка (0,1 мл), а крупному рогатому скоту в среднюю треть шеи (0,2 мл), предварительно подготовив место инъекции.
Реакцию учитывали через 1,5 – 2 и 24 часа и оценивали по следующей шкале: утолщение кожной складки на 5 мм и более – положительная реакция; утолщение кожной складки до 4 мм – отрицательная реакция.
Посевы полученных аллергенов при инкубировании в течение 10 дней в термостате оставались стерильными. Подкожным введением аллергенов белым мышам была установлена их безвредность.
При внутрикожном введении аллергена 10 здоровым кроликам и 20
телятам 4 – 6 месячного возраста реакция на месте введения препарата была отрицательной.
Разрешающую способность аллергической пробы при фасциолезе изучали в 2-х опытах в коллективном предприятии «Алга» Кукморского района Республики Татарстан, который является неблагополучным по фасциолезу. Первый опыт проводили в октябре месяце 2000 года, а второй – феврале 2001 года. Одновременно с аллергическим исследованием у животных брали кровь для серологического анализа и пробы фекалий для копрологического исследования. Всего было обследовано разными методами 200 коров старше
4-х лет и 40 нетелей.
Результаты аллергического, серологического и копрологического исследований на фасциолез представлены в табл. 21 и рис. 9.
Из таблицы видно, что из 200 коров в октябре месяце реагировали на фасциоловый аллерген 30 (15 %), а в реакции связывания комплемента (РСК) с фасциоловым антигеном выявлены позитивные показания у 36 (18 %). При исследовании проб фекалий методом последовательных смывов яйца фасциол
не были обнаружены ни в одной пробе. С помощью усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева у 4 (2 %) животных были выявлены яйца фасциол.
При исследовании 40 нетелей в этот же период на фасциоловый аллерген реагировали положительно 7 (17,5 %). В РСК позитивные показания отметили у 8 (20 %) животных. При копроскопии методом последовательных смывов яйца не установили ни в одной пробе. При исследовании усовершенствованным методом Котельникова-Вареничева яйца фасциол обнаруживали в 2-х пробах (5%).
В феврале месяце из исследованных 200 коров реагировали положительно на фасциоловый аллерген 20 (10 %). В РСК с фасциоловым антигеном позитивные показания установили у 32-х (16 %) животных. При исследовании проб фекалий от этих животных методом
последовательных смывов фасциолез обнаружили у 5 коров (2,5 %). С помощью усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева яйца фасциол выявили в 26 пробах (13 %).
Из 40 нетелей за этот период с фасциоловым аллергеном реагировали положительно 5 (12,5 %) животных. В РСК позитивные показания отметили у 7 голов (17,5 %). При копроскопии методом последовательных смывов яйца фасциол выявили у 3 нетелей (7,5 %). Использование усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева дало возможность выявить фасциолез у 6 животных (15 %).
При сопоставлении результатов аллергического и серологического исследований крупного рогатого скота, проведенного в октябре месяце (в период острой инвазии), установлено, что у 29 из 30 коров (96,6 %) и у 6 из 7 телок (85,7 %), которые реагировали в аллергической пробе, в сыворотке крови были обнаружены комплементсвязывающиеся антитела. Следует отметить, что количество животных, реагирующих аллергически было меньше, чем серологически. Так, у 6 коров (3 %) и у 1 (2,5 %) нетеля диагноз на фасциолез был установлен только серологически. Аналогичная закономерность отмечена также и во втором опыте положительно на фасциоловый аллерген 20 (10 %). В РСК с фасциоловым антигеном позитивные показания установили у 32-х (16 %) животных. При исследовании проб фекалий от этих животных методом последовательных смывов фасциолез обнаружили у 5 коров (2,5 %). С помощью усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева яйца фасциол выявили в 26 пробах (13 %).
Из 40 нетелей за этот период с фасциоловым аллергеном реагировали положительно 5 (12,5 %) животных. В РСК позитивные показания отметили у 7 голов (17,5 %). При копроскопии методом последовательных смывов яйца фасциол выявили у 3 нетелей (7,5 %). Использование усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева дало возможность выявить фасциолез у 6 животных (15 %).
