из триптофана, разжижают желатин, т.е. обладают протеолитической активностью, дают положительный результат на оксидазную пробу. При 24-часовой инкубации в лакмусовом молоке образуют темно-синюю полосу в верхней части пробирки, а при дальнейшей инкубации среда прогрессивно становится более щелочной. В течение шести дней появляются три отчетливо выраженные зоны: в верхней части — темно-синяя жидкость, средняя зона — лилового цвета, творожистая по консистенции, а нижний слой — коагулированный казеин бледно-лилового цвета.

Долгое время считалось, что возбудителем ИКК бактериальной этиологии являются только Moraxella bovis. Однако не всегда применение вакцин на основе антигенов данных бактерий было эффективно. Предполагалось, что это связано с существованием других бактерий, причастных к возникновению ИКК.

Летом 2002 г. при проведении испытаний эффективности антибиотиков на быках и молочных телках в Северной Калифорнии Angelos Т.А. выделил гемолитические грамотрицательные кокки от телят трех-девятимесячного возраста с признаками изъязвления роговицы глаз [17, 18]. С целью определения связи гемолитических грамотрицательных кокков с известными представителями рода Moraxella, были проведены обширные бактериологические, биохимические тесты и молекулярно-генетические анализы. Исследование последовательности 16$ рРНК и филогенетические анализы позволили отнести их в группу, объединяющую Moraxella bovis и Moraxella ovis. Процент гомологии между выделенными грамотрицательными кокками и бактериями Moraxella bovis и Moraxella ovis был высок — 96%. Angelos J.A. с соавторами предложили отнести их новому виду — Moraxella bovoculi, номенклатура которого опубликована 5 апреля 2005 г.

Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота, вызванный бактериями Moraxella bovoculi, наблюдали на одном из молочных комплексов Республики Татарстан. Клинические признаки болезни были схожи с таковыми при поражении бактериями Моraxella bovis. При бактериологическом исследовании смыва из конъюнктивального мешка глаза семимесячного больного теленка с признаками острого кератоконъюнктивита выделены гемолитические

изоляты бактерий, идентифицированные в дальнейшем как бактерии Moraxella Боуосий. Результаты изучения морфологических, культурально-биохимических, серологических и биологических свойств выделенного штамма позволили депонировать его во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве (Россия, 123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5, ФГБУ «ВГНКИ») под регистрационным номером: «Штамм Moraxella bovoculi «CX-46 №-ДЕП» инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота». Предварительно была определена нуклеотидная последовательность фрагмента 16$ pPHK штамма (с 246 по 1121 п.н. по полной нуклеотидной последовательности данного гена). При помощи программы Blast был проведен сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей штамма «СХ-Ч6 № -ДЕП» Moraxella bovoculi с последовательностями микроорганизмов, представленных на базах данных нуклеотидных последовательностей GenBank. При этом была установлена наибольшая гомология анализируемых последовательностей с геном 16S pPHK Moraxella Боуосий (99,9%).

Ha штамм получен патент РФ на изобретение №2521651 от 12.05.14, он признан производственным и предназначен для изготовления вакцины против ИКК КРС и диагностикумов. Штамм характеризуется следующими свойствами:

® клетки штамма при культивировании в течение 24 ч при температуре 37°C Ha кровяном мясопептонном агаре с содержанием 6-10% дефибринированной крови барана формируют колонии белого цвета диаметром< 1 мм, круглые, выпуклые, с ровными краями, влажной поверхностью и зоной В-гемолиза (рис. 3);

® в мазках, окрашенных по Граму, представляют собой грамотрицательные диплококки, с редко встречающимися кокками, диаметр клеток 0,7-1,3 мкм, смежные стороны клеток уплощены (рис. 4).

• i
  :
  fu
  j
  |
  1
  I
  WS : Ta
  

Рис. 3. Колонии бактерий

Moraxella bovoculi после 24-часовой инкубации на кровяном агаре

— -* Pe5 Sstтт YSa
hae . * ч
. Dee ом
Md ° . < Ye: en
«= о mi Ph eres, ee
"eo“no° ve t ete 4° MeetTsote #*1 Рис. 4. 24-часовая культура<br>5“ “es >. РР . .<br>. = sien te PA * yo Г бактерий Moraxella bovoculi.<br>[К “gel о, Ces с Окраска по Граму( х320)
5 *£% АО
т.. % arsJ ie ah
¥ Pr es * "2
ae & $. a $ 4
у . : rere +1
r%4 д. == = . e
> = NS DP: haeOa:ENa| 9 ‘

Moraxella bovoculi — факультативный аэроб, He ферментирует сахаров, не образует индол, не разжижает желатин, дает положительную реакцию на оксидазу и отрицательную — на пробу с лакмусовым молоком. Активно образует эндотоксин, переходящий в анатоксин под действием тепла и формалина. Продуцируемый токсин обладает гемолитическим и некротическим действиями. LD,, для белых мышей составляет 5х10* микробных клеток. Инактивированная формалином культура при подкожном введении индуцирует у телят образование специфических антител к бактериям Moraxella bovoculi, a также формирование специфического иммунитета.

Основные культурально-морфологические и биохимические свойства моракселл представленыв табл. 2.

Таблица 2

Культурально-морфологические и биологические свойства

бактерий рода Moraxella