В помощь специалистам по воспроизводству стада крупного рогатого скота

сутки, разбавленное одной средой, смешанное в одном приборе (сосуде), замороженное за один технологический цикл и оформленное одним документом о качестве. В документе о качестве должны быть указаны: наименование предприятия изготовителя и его товарный знак; наименование продукции; форма упаковки спермодоз; номер серии; дата изготовления продукции; номер документа о качестве; дата выдачи документа о качестве;

количество доз в серии; результаты испытаний спермы;

штамп ОБК (ЛБК) или подпись контролера предприятияизготовителя; обозначение настоящего стандарта.

• 2.2. Для контроля качества спермы от каждой серии отбирают 10 доз.

• 2.3. При неудовлетворительных результатах испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на таком количестве доз, которое необходимо для проведения этого испытания. Результаты повторных испытаний распространяют на всю серию.

3. Методы испытаний

3.1. Подготовка к испытаниям

3.1.1. Для оттаивания спермы, замороженной в соломинках и в облицованных гранулах, их вынимают корнцангом или пинцетом из сосуда Дьюара и быстро погружают в водяную баню при температуре (38^о С).

Соломинки и облицованные гранулы вытирают стерильным полотенцем или марлей, оба конца протирают спиртовым тампоном и стерильными ножницами отрезают концы.

Для проведения микробиологических исследований три дозы оттаянной спермы сливают в стеклянные для медицинских целей стерильные флаконы или в стеклянные пробирки вместимостью 1.0 – 3.0 см³ .

Для проведения биологических исследований сперму берут непосредственно из соломинок.

3.1.2. От доз, отобранных по п. 2.2., 5 доз оставляют на случай возникновения разногласий в оценке качества спермы и хранят в течение трех месяцев, после чего используют для искусственного осеменения.

3.1.3. Необлицованные гранулы замороженной спермы стерильным пинцетом переносят в стерильные ампулы или флаконы со стерильным 2,9%-ным раствором нейтрализованного цитрата натрия и оттаивают в водяной бане при температуре 38^о С, тщательно перемешивая круговыми движениями до ее полного растворения.

3.2. Проведение испытаний

3.2.1. Внешний вид и цвет определяют осмотром спермы в проходящем свете при естественном или искусственном освещении.

3.2.2. Определение подвижности спермиев (содержания спермиев с ППД) проводят по ГОСТ 20909.4 – 75 со следующими дополнениями: при определении подвижности спермиев в оттаянных соломинках к сперме добавляют 2,9%-ный раствор цитрата натрия; при определении этого показателя в сперме, фасованной в необлицованные гранулы и облицованные гранулы, раствор цитрата натрия к сперме не добавляют.

3.2.3. Количество спермиев с прямолинейным поступательным движением в дозе определяют, подсчетом спермиев в 1 см³ по ГОСТ 20909.5 – 75 со следующими дополнениями: сперму разбавляют в 10 или 20 раз, набирая ее в лейкоцитарный смеситель до отметки 0,5 или 1,0 и заполняют меланжер 3%-ным раствором хлористого натрия до отметки :1.

Количество спермиев с прямолинейным поступательным движением ( КСППД ) в дозе по формуле:

КСППД = СППД * Д

где СППД – количество спермиев с ППД в 1 см³ , млн.; Д – доза спермы, см³ .

3.2.4. Объем дозы определяют чистой, стерильной, градуированной стеклянной пипеткой по ГОСТ 20909 – 74.

3.2.5. Определение абсолютной выживаемости (S) и выживаемости спермиев в часах – по ГОСТ 20909.4 – 75. 3.2.6 Общее количество микробных тел – по ГОСТ 20909.4 – 75. 3.2.7. Коли-титр – по ГОСТ 20909.2 – 75.

3.2.8. Патогенные и условно патогенные бактерии, грибы, вирусы, микоплазмы и другие микроорганизмы – по ГОСТ 23745 – 79 и по методикам, утвержденным в установленном порядке.

4. Упаковка, маркировка и хранение

• 4.1. Сперму, замороженную в соломинках, облицованных и необлицованных гранулах упаковывают в тубы, стаканы или контейнеры.

• 4.2. Каждую упаковочную единицу маркируют с указанием наименования продукции, номера серии, клички и инвентарного номера быка, количества доз, даты замораживания, предприятия-изготовителя и его товарного знака, штампа и подписи контролера.

Каждую дозу спермы, замороженной в соломинках и в облицованных гранулах, маркируют с указанием номера быка, номера серии и даты изготовления.

• 4.3. Замороженную сперму хранят в сосудах Дьюара различной вместимости и конструкции (СДС-5, СДС-20, Харьков-34А и др.) с содержанием в них жидкого азота по ГОСТ 9293 – 74 не менее 1/3 объема.