Если на спермопродукцию быков-производителей природно-климатический фактор из-за лучших условий кормления и содержания сказывается в меньшей степени, то коровы ему подвержены значительно сильнее. Достаточно отметить, что оплодотворяемость коров и телок в летний период на 10-20 % выше, чем в зимний, а по отдельным месяцам может достигать разницы до 40 %. Отдельные же случаи снижения оплодотворяемости в летний период, если это не связано с экстремальными погодными условиями, в основном обусловлены технологическими нарушениями искусственного осеменения и никакого отношения к сезонности не имеют. В странах или хозяйствах с высокоразвитым молочным скотоводством явление сезонного колебания оплодотворяемости менее ощутимо вследствие компенсирующего влияния кормления и содержания, но и там имеются проблемы многократных безрезультатных осеменений животных.
С целью повышения качества спермодоз, получаемых на племпредприятиях от быков-производителей, нами предлагается использовать акросомный тест, согласно которого повышение оплодотворяющей способности спермы проводится в рамках существующей технологии замораживания спермодоз. Для этого на племпредприятиях Республики Беларусь содержание и кормление быковпроизводителей, взятие от них эякулятов, оценка полученной спермы, ее разбавление и замораживание осуществляются согласно установленным правилам и инструкциям. Дополнительно предлагается осуществлять контроль за состоянием акросом спермиев и на основе полученных результатов корректировать общую концентрацию спермиев в дозе от 10 до 25 млн. с расчетом получения спермодоз с содержанием качественных (без нарушения акросом) спермиев не менее 9 млн. в дозе (табл. 39).
Таблица 39 – Концентрация спермиев с прямолинейнопоступательным движением (ППД) в дозе в зависимости от количества акросомных нарушений
| Количество спермиев с нарушениями ак- росом, % | Концентрация спермиев с ППД в дозе, млн. |
|---|---|
| 0-10 | 10 |
| 11-18 | 11 |
| 19-25 | 12 |
| 26-30 | 13 |
| 31-35 | 14 |
| 36-40 | 15 |
| 41-44 | 16 |
| 45-47 | 17 |
| 48-50 | 18 |
| 51-53 | 19 |
| 54-55 | 20 |
| 56-57 | 21 |
| 58-59 | 22 |
| 60-61 | 23 |
| 62-63 | 24 |
| 64-65 | 25 |
Определение наличия акросомных нарушений проводится при помощи микроскопа с темнопольным конденсором.∗
Чтобы получить отчетливое, не расплывчатое свечение контуров спермиев и акросом, следует отцентрировать луч света винтами конденсора прямо в линзу объектива. Затем наносят на предметное стекло каплю спермы, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом в светлом поле при опущенном конденсоре и прикрытой ирисовой диафрагме.
∗ При отсутствии данного микроскопа возможно применение микроскопа серии « Биолам» или другого с аналогичным конденсором. Для этого в откидную кольцевую диафрагму конденсора вставляется круглая пластина из прозрачного органического стекла, затемненного в центре светонепроницаемым круглым предметом диаметром 18,5 мм (наклеивается кружок копировальной бумаги).
После наведения на фокус вводят в ход лучей кольцевую диафрагму темного поля, открывают ирисовую диафрагму и, наблюдая в окуляр, медленно вращают винт кремальеры держателя конденсора, поднимая его до момента появления в поле зрения ярко светящихся контуров спермиев на темном фоне.
Однажды правильно настроенное освещение и фокусировка конденсора приемлемы для последующих серийных определений качества спермы без дополнительной настройки. Для быстрейшего наведения на фокус при смене образцов предметные стекла подбирают одинаковой толщины.
В практических условиях важно определить наличие поврежденных акросом не только на неподвижных, но и на движущихся спермиях, непосредственно участвующих в оплодотворении ооцитов, так как обладающие прямолинейно-поступательным движением половые клетки не всегда являются биологически полноценными, т. е. способными к оплодотворению.
Потеря оплодотворяющей способности нередко связана с нарушением структуры акросомы спермиев, в которой содержатся ферменты гиалуронидаза и акрозин. С целью замедления скорости их поступательного движения и вращения по продольной оси мы применили белок куриного яйца. Движение спермиев в нем замедляется настолько, что можно отчетливо различить состояние их акросом. Белок яйца бесцветный и прозрачный, имеет слоистую структуру, компоненты биологически активных веществ в нем содержатся в изотонической для спермиев концентрации.
Для оценки на предметное стекло наносят стеклянной палочкой одну маленькую каплю оттаянной спермы и рядом с ней при помощи однограммового шприца три капли из слоя жидкого белка такого же объема.
Капли белка и спермы тщательно перемешивают стек-
