Продолжение · 11
Прямой подсчет соматических клеток считается наиболее точным показателем диагностики мастита. Международная молочная федерация приняла решение считать нормальным наличие в 1мл сборного молока до 500 тыс. соматических клеток.
Метод Прескотта и Бритта считается арбитражным в международном масштабе, он является контрольным при автоматическом подсчете соматических клеток в молоке. Он основан на свойстве ядер соматических клеток ярко окрашиваться специфическими красителями. После
окрашивания (по Романовкому-Гимза) и высушивания мазок молока микроскопируют под иммерсионным объективом. В каждом мазке просматривают 100 полей зрения. Подсчитывают число клеток, умножают его на коэффициент для пересчета с учетом объектива и окуляра и определяют количество клеток в 1 мл молока.
Камерный метод заключается в подсчете соматических клеток в камере Горяева. Сначала необходимо растворить жировые шарики этиловым спиртом или формалином, синтанолом ДС-10 и покрасить пробу, затем под микроскопом подсчитывают количество соматических клеток во всей камере.
Расчет числа клеток проводят по формуле:
Х = (1000∙50а)/ V,
где Х- количество соматических клеток в 1 мл молока; 1000 – множитель, приводящий результат к объему 1 мл; 50 – разведение молока; а – сумма клеток в определенном объеме камеры; V– объем камеры.
Подсчет клеток с помощью прибора Культера. Данный прибор представляет собой электронный счетчик с капиллярной трубкой диаметром 100 мкм, подсчитывающий объем молока 0,1 или 0,5 мл (модель F, FN). Сначала проводят калибровку согласно инструкции изготовителя с применением стандартной суспензии частиц. Калибровку проводят по нескольким образцам молока, содержащего от 300 тыс. до 1 млн. клеток в 1 мл, что предварительно определяется под микроскопом. Модельный диаметр соматических клеток должен находиться между 5,45 и 6,25 мкм (рабочий режим счетчика). Реактив для подсчета соматических клеток, в состав которого входят вещества, способствующие растворению жировых шариков (синтанол ДС-10) и делающие раствор электролитичным (хлористый натрий), пропускают через стеклянный фильтр. Подсчет клеток в смеси молока с эмульгирующим электролитом проводят в пределах одного часа при температуре 15-25°С.
Во время подсчета электрод, погружающийся в трубку измерительного прибора, должен находиться ниже поверхности жидкости.
К 9,9 мл синтанола добавляют 0,1 мл фиксированного формалином молока. Образец подогревают при 80°С в течение 10 мин в водяной бане и охлаждают. После этого под трубку подводят стаканчик с 10 мл приготовленного молока. Включают прибор, предварительно поставив его на соответствующий рабочий режим. Результаты подсчета видны на табло (соматических клеток, тыс. на 1 мл молока).
Подсчет соматических клеток на приборе Фоссоматик. Метод основан на образовании флуоресцентного комплекса при взаимодействии люминесцентного красителя с ДНК ядра клетки, поэтому он является специфическим, так как подсчитываются только клетки, имеющие в своей структуре ядро. Фоссоматик – электронный прибор, предназначенный для подсчета соматических клеток в сыром и консервированном молоке.
Бактериологические методы диагностики мастита. Для бактериологического анализа молока на мастит с соблюдением правил асептики отбирают пробы из четвертей вымени, подозреваемых в заболевании. Для посева применяют обычные или элективные питательные среды. Чаще всего используется кровяной мясо-пептонный агар.
Для идентификации выросших культур изучают их свойства. Крупные выпуклые колонии, вне зависимости от наличия зоны гемолиза, ориентировочно относят к стафилококкам; мелкие росинчатые – к стрептококкам; серые и круглые колонии (блестящие и плоские) обычно указывают на рост бактерий группы кишечных палочек. Появление колоний с зеленым оттенком предполагает наличие синегнойной палочки. Слизистые гладкие или матовые колонии характерны для споровой микрофлоры, что свидетельствует о механическом загрязнении молока.
Для выделения и идентификации стрептококков применяют среды
Эдвардса, ТКТ и Карташовой. Из серологических методов идентификации микроорганизмов используется иммунофлюоресценция со специфическими сыворотками.
Для выделения из молока и идентификации стафилококков используют, главным образом, ДНК-новокаиновый агар, тесты Шермана, а БГКП – агары Эндо и Левина, а также жидкую элективную питательную среду Карташовой.
8. Ветеринарно-санитарная оценка молока при маститах
8. Ветеринарно-санитарная оценка молока при маститах
Ветеринарно-санитарная оценка молока при маститах зависит от глубины и характера болезни вымени.
Ветеринарно-санитарная оценка молока предусматривает опасность продукта и микроорганизмов, которые могут быть в сыром молоке при разных формах мастита. Возбудителями маститов чаще всего являются Str. uberia, Е. coli, Sir. agalactiae, Str. dysgalactiae, Staph. aureus, B. proteus vulgaris, B. pyogenes, В. cereus, Cl. perfingens, микроскопические грибы и другие микроорганизмы. Патогенные стафилококки, клостридии и стрептококки, содержащиеся в молоке, могут стать причиной заболевания людей ангиной, скарлатиной, отитом, пневмонией, менингитом и пищевых отравлений, так как применяемые режимы обеззараживания молока не инактивируют полностью микробные токсины. Гноеродные микроорганизмы обусловливают развитие гнойно-некротического воспаления в органах и тканях человека.
Распознавание и ветеринарно-санитарную экспертизу молока больных животных проводят комплексно. При изучении ветеринарных сопроводительных документов учитывают эпизоотическое благополучие местности и результаты исследований на скрытый мастит. При клиническом осмотре коров обращают внимание на клинические признаки, характерные для инфекционных, инвазионных и незаразных болезней. Для выявления молока, полученного от больных животных, проводят его органолептическое, физико-химическое и микробиологическое исследования.
У больных маститом животных снижается секреция молока и ухудшается его качество. Молоко, полученное от больных животных, представляет опасность для человека, поскольку может содержать возбудителей инфекционных болезней животных, бактериальные токсины, лекарственные препараты, токсичные метаболиты.
Физико-химические и органолептические показатели молока коров, больных маститом, претерпевают значительные изменения и не отвечают требованиям стандарта.
В молоке больных маститом коров уменьшается количество казеина, лактозы, жира и обезжиренного сухого вещества, снижаются плотность и способность к свертыванию. Увеличивается содержание хлора, альбумина, уменьшается диаметр жировых шариков.
При выраженной клинической картине болезни молоко часто приобретает творожистую консистенцию, синеватый или желтоватый цвет, соленый привкус, в нем могут быть хлопья, гной, слизь, кровь. Такое молоко после кипячения подлежит уничтожению. Если у коровы отмечается ограниченный одной-двумя долями мастит, то уничтожают только молоко из пораженных долей. Молоко из непораженных долей используют после кипячения для кормления животных. Такое молоко сдаивается в отдельные ведра, или другие емкости, которые моют и дезинфицируют после дойки и освобождения от молока.
При субклиническом мастите отдельных долей вымени молоко в сыром виде на пищевые цели не используется, так как в нем повышено содержание соматических клеток и микроорганизмов. Такое молоко должно подвергаться кипячению или пастеризации по режимам, определяемым ветеринарной службой или Правилами ветеринарно-санитарной экспертизы молока и молочных продуктов. Пастеризация или кипячение молока должны проводиться под контролем ветеринарных специалистов. При сдаче пастеризованного молока проверяется эффективность (соблюдение режимов) пастеризации в соответствии с нормативными документами
Для доения коров, больных маститом, используют переносные доильные ведра, которые дезинфицируют после каждой дойки. Молоко от этих коров из непораженных четвертей вымени собирают в отдельную емкость, пастеризуют при 85°С в течение 30 минут или кипятят и используют в хозяйстве для кормления животных. Молоко из пораженных четвертей вымени уничтожают после кипячения.
Для выявления животных, больных маститом, всех коров на ферме следует ежедневно подвергать клиническому осмотру во время доения и один раз в месяц исследовать пробы молока из каждой доли вымени.
9. Источники микробного обсеменения молока
9. Источники микробного обсеменения молока
Молоко – хорошая питательная среда для микроорганизмов, попадающих в него из различных источников.
Вымя коровы – основной источник микробного обсеменения молока. В молоко попадает большое количество микробов при плохом подмывании вымени коровы. Во входных отверстиях сосков содержится большое количество микроорганизмов, и если первые струйки молока не сдаивают в отдельную посуду, происходит значительное повышение бактериальной обсемененности молока. Сдаивание в отдельную посуду первых струек молока имеет большое практическое значение: по ним можно установить заболевание коров маститом (хлопья, кровь, гной). Больных животных доят в последнюю очередь, и молоко от них нельзя смешивать с общим удоем.
Кожа и волосяной покров животного, загрязненные частицами навоза, подстилки, грязи, пылью, в которых находится большое количество бактерий, являются потенциальным источником обсеменения молока. Эта микрофлора в основном представлена бактериями из группы кишечной
палочки, вызывающими порчу молока и молочных продуктов. Чтобы избежать этого, необходимо регулярно чистить животных.
Подстилка может способствовать дополнительному обсеменению молока маслянокислыми и гнилостными бактериями. В связи с этим подстилку своевременно убирают со скотного двора и заменяют свежей. Недопустимо попадание в молоко частиц подстилки.
Насекомые, особенно мухи, на своем теле содержат большое
количество разнообразной микрофлоры. Для борьбы с мухами необходимо использовать химические средства, устанавливать металлические сетки на окнах, содержать в чистоте скотные дворы.
Воздух молочной фермы может иметь значительное количество микроорганизмов непосредственно после уборки помещения и раздачи кормов. При оседании пыли вместе с ней в молоко могут попадать и бактерии. Поэтому уборку помещения и раздачу кормов следует проводить за 1-1,5 часа до доения или после него, а в помещении предусматривается хорошая вентиляция и проветривание.
Молочная посуда, аппаратура и фильтрующие материалы могут быть источником дополнительной бактериальной обсемененности молока, если нарушаются санитарно-гигиенические правила их использования, промывки и дезинфекции. Тщательно отслеживают качество и гигиеническое состояние фильтрующих материалов, следят за чистотой фляг, молокомеров, металлического оборудования. Необходимо применять высокоэффективные щелочные, кислые моющие или моюще-дезинфицирующие средства и технологические режимы их использования в соответствии с разработанными рекомендациями. Несвоевременная и некачественная очистка, и дезинфекция доильно-молочного оборудования отражается на здоровье вымени и снижает качество молока.
Корм может быть источником микробного обсеменения молока.
Технологические процессы доения и раздачи кормов не должны совпадать. При скармливании некачественных кормов у лактирующих коров могут возникать желудочно-кишечные расстройства, приводящие к повышению обсемененности молока.
Обслуживающий персонал и операторы машинного доения коров при несоблюдении санитарно-гигиенических правил и заболеваниях могут вызывать увеличение бактериальной загрязненности молока. Работники ферм обязаны постоянно следить за санитарным состоянием одежды и обуви.
Таким образом, вследствие нарушения технологических процессов и зоогигиенических правил производства молока, происходит снижение резистентности тканей и защитных систем вымени, и создаются условия для проникновения в молочную железу патогенной микрофлоры. Эти процессы происходят в результате действия человеческого фактора, который следует считать основным в возникновении и распространении мастита у коров, как на мелких фермах, так и на специализированных молочных комплексах.
Следует отметить, что микробные нагрузки на животных зависят от санитарно-гигиенических условий на молочных фермах.
В целях обеспечения и поддержания должного санитарного состояния территорий молочных ферм необходимо постоянно следить за их чистотой и благоустройством. Не реже одного раза в месяц следует проводить санитарный день для тщательной очистки стен, кормушек, автопоилок и другого оборудования в производственных, бытовых и вспомогательных помещениях. После механической очистки проводят дезинфекцию. Кормушки, загрязненные места стен, перегородок, столбов белят взвесью свежегашеной извести.
Ветеринарные специалисты осматривают дойных коров, обращая особое внимание на состояние вымени, сосков, и проверяют качество санитарной очистки помещений и территорий.
На всей территории, в помещениях молочных ферм проводят мероприятия по борьбе с грызунами, в соответствии с действующими инструкциями.
В молочном и доильном залах систематически очищают и белят взвесью свежегашеной извести стены, ежедневно моют полы.
Дезинфекцию проводят 2 раза в месяц. Для этого используют раствор гипохлора или гипохлорита кальция (натрия) с содержанием 3% активного хлора. При стойловом содержании животных подстилка подлежит ежедневной замене. Систематически по мере загрязнения доярки обязаны проводить чистку кожного покрова и обмывание задних конечностей дойных
коров.
Коров доят строго в определенное время, предусмотренное распорядком дня фермы. Доярки и операторы машинного доения перед обработкой вымени коров обязаны вымыть теплой водой с мылом руки, вытереть их чистым полотенцем и надеть чистый комбинезон или халат и косынку.
При помощи пистолета-распылителя или специально выделенного для этой цели маркированного ведра проводят преддоильную обработку вымени. Воду в ведре меняют после каждого животного.
Обсушивают вымя чистой индивидуальной салфеткой или используют 2-4 полотенца, которые в период доения должны находиться в моюще-дезинфицирующем растворе с содержанием 0,03% активного хлора. Перед обсушиванием вымени полотенце предварительно прополаскивают в теплой воде и отжимают. После обсушивания осуществляют массаж вымени.
