Спецодежду следует использовать только на пункте и при работе на ферме. Костюмы (халаты), колпаки (косынки) стирают не реже одного раза в неделю. Резиновые сапоги и фартуки моют теплой водой и обеззараживают 2%-ным раствором каустической соды.
Для предупреждения распространения заразных болезней оператор обязан выполнять следующие правила:
• до и после осеменения или обследования каждой коровы или телки тщательно мыть руки с мылом, а затем обрабатывать их ватным тампоном, смоченным 70%-ным этиловым спиртом;
• работать в специально предназначенных для осеменения перчатках (на каждое животное - перчатка);
• использовать для осеменения стерильные инструменты;
а использованные перчатки, пипетки, чехлы и т.п. складировать в специально отведенный контейнер для последующей утилизации;
• мыть и дезинфицировать сапоги и фартуки после работы и перед выездом на каждую ферму;
• при переезде с фермы на ферму перевозить с собой только сосуд Дьюара со спермой в жидком азоте. Инструменты и материалы для осеменения должны быть в каждой лаборатории.
Стерилизовать инструменты и материалы следует одним из следующих способов: кипячение, сухой жар, фламбирование (обжигание некоптящим пламенем), автоклавирование, обработка химическими средствами, облучение ультрафиолетовыми лучами.
Кипячением стерилизуют стеклянные шприцы, металлические инструменты. Для этого тщательно промытые шприцы разбирают, цилиндр оборачивают бинтом и прикрепляют к нему поршень. Инструменты помещают в стерилизатор, заливают на 2/3 объема дистиллированной водой, закрывают крышкой, доводят до кипения и кипятят в течение 20 мин. Не снимая крышки, дают остыть. Только после этого инструменты извлекают стерильным пинцетом; в шприцы вставляют поршни, заворачивают в стерильные салфетки и помешают в шкаф. Остатки воды с инструментов удаляют стерильными салфетками. Канал шприца освобождают от остатков воды стерильным 0,9%-ным раствором хлорида натрия, 1%-ным раствором бикарбоната натрия или 2,9%-ным раствором цитрата натрия. Влагалищные зеркала стерилизуют отдельно от посуды и инструментов.
Сухим жаром стерилизуют стеклянные инструменты, вату и марлю. Стерилизацию проводят в сушильном шкафу при температуре 160°С в течение 1 ч 30 мин или при 180°С в течение 1 ч. Отсчет срока стерилизации начинают, когда температура в шкафу достигнет нужного уровня. Перед началом стерилизации следует обернуть инструменты пергаментной бумагой или
фольгой. Так же поступают с ватой и марлевыми салфетками. Чистые сухие колбы, флаконы и др. накрывают фольгой или пергаментной бумагой, которую закрепляют нитками. Окончив стерилизацию, шкаф выключают, но открывают только после остывания до 50-60°С.
Фламбирование применяют для стерилизации металлических инструментов, но в том случае, когда нет возможности простерилизовать их другими способами или при необходимости быстрого обеззараживания, поскольку металлические инструменты, особенно режущие, от этого портятся. Для обжигания можно пользоваться газовой плитой, примусом, спиртовкой или тампоном, смоченным 96%-ным спиртом.
Автоклавирование используют для стерилизации инструментов из полимерных материалов, растворов, хлопчатобумажной спецодежды, салфеток, полотенец и др. Стерилизацию проводят в автоклавах согласно прилагаемым к ним инструкциям.
Полимерные зоошприцы для осеменения спермой в облицованных гранулах моют и стерилизуют для повторного (до 10 раз) использования путем их погружения в 0,5%-ный раствор хлорамина Б на 24 ч или облучением с помощью бактерицидных ламп в течение 40 мин на расстоянии 20 см от источника ультрафиолетовых лучей.
Использованные предметные и покровные стекла моют в теплой воде и протирают стерильной марлевой салфеткой.
Стерильные инструменты хранят в застекленных шкафах или в настольном ящике-витрине, оборудованном бактерицидной и электрической лампами. Нельзя хранить их на столе под марлей: это не защищает от микробного загрязнения.
Растворы хлорида натрия, цитрата натрия и бикарбоната натрия готовят ежедневно. Для приготовления 0,9%-ного хлорида натрия берут мерный цилиндр или колбу на 100 мл, наливают туда 40-50 мл дистиллированной воды, вносят 0,9 г хлорида натрия и перемешивают до полного растворения. Затем, доливая дистиллированную воду, доводят количество раствора до 100 мл. Аналогично готовят растворы цитрата и бикарбоната натрия, используя на 100 мл раствора 2,9 г цитрата натрия и 1 г бикарбоната натрия соответственно. Полученные растворы подогревают до 90-95°С и стерилизуют автоклавированием. Хранят в стерильных флаконах.
70%-ный раствор спирта готовят добавлением к 73 мл 96%-ного спиртаректификата 27 мл дистиллированной воды. Правильность приготовления проверяют спиртомером.
Для обработки наружных половых органов перед осеменением следует использовать раствор фурацилина, который готовят следующим образом: в 1 л кипящей воды растворяют 10 г хлористого натрия и 0,2 г фурацилина,
охлаждают и фильтруют. Хранят раствор фурацилина не более двух дней в бутылке из темного стекла или в затемненном месте.
Инструменты, предназначенные для использования на пастбище, после стерилизации оборачивают стерильными марлевыми салфетками, затем полиэтиленовой пленкой и укладывают в сумку. Еженедельно сумку моют горячим содовым раствором, прополаскивают горячей водой. При возвращении из неблагополучного хозяйства это делают немедленно в специально отведенном месте.
При обслуживании коров частного сектора или фермерских хозяйств у оператора должен быть отдельный комплект спецодежды и обуви, которые после каждого посещения следует чисто вымыть и содержать в отдельном шкафу.
Дезинфекцию сосудов Дьюара с профилактической целью проводят один раз в год согласно «Инструкции по дезинфекции криобиологических сельскохозяйственных сосудов», утвержденной Главным управлением ветеринарии МСХ СССР в 1983 г.
Хранение спермы
В пункте искусственного осеменения замороженную сперму хранят в сосудах Дьюара в жидком азоте при температуре -196°С. Канистры со спермой при хранении должны быть обязательно погружены в жидкий азот. Хранение спермы в парах азота недопустимо.
Объем жидкого азота в сосуде Дьюара должен составлять не менее 1/3 объема сосуда. Оператор обязан следить за уровнем жидкого азота и периодически проверять его. Для определения уровня жидкого азота рекомендуется пользоваться пластиковой (деревянной) мерной линейкой или деревянной палочкой длиной, соответствующей высоте сосуда. Предварительно продезинфицированную спиртовым тампоном линейку или палочку опускают внутрь, до дна сосуда на 5-6 с, заметив пальцем на ней верхний край горловины сосуда. После извлечения на воздухе часть линейки или палочки, которая была погружена в жидкий азот, покрывается инеем, по высоте которого определяют уровень азота в сосуде.
При работе с замороженной спермой следует строго придерживаться следующего правила: не допускать преждевременного оттаивания спермы и повторного ее замораживания.
Нельзя хранить весь запас спермы в одной канистре, чтобы не допускать изменения температурного режима хранения спермы при извлечении соломинок или гранул.
В пункте сосуды Дьюара должны быть установлены на деревянных подставках. Сосуды состоят из кожуха и внутреннего сосуда, подвешенно-
