После заправки соломинки в осеменительный инструмент (А) необходимо отрезать ее конец с помощью стерильных ножниц (Б) и надеть санитарный чехол (В)
После надевания стерильного чехла на осеменительный инструмент поршнем вытравливают остатки воздуха из соломинки до появления капельки спермы, которую используют для оценки качества
Оценка активности спермы
Подвижность оттаянной спермы определяется при увеличении микроскопа 120-180 раз на термостатируемом столике при температуре 38-40°С.
На подогретое предметное стекло из осеменительного инструмента техник наносит небольшую каплю спермы. При использовании спермы в соломинках стеклянной палочкой рядом помещает каплю 2,9%-ного цитрата натрия, смешивает и накрывает подогретым покровным стеклом. При использовании спермы в облицованных гранулах, оболочка которых выполнена из прозрачного полимерного материала, качество спермы оценивают перед осеменением животных без предварительной разгерметизации спермодозы. Для этого гранулу, предварительно протерев стерильной салфеткой, размещают на предметном стекле и прижимают вторым предметным стеклом с помощью специального зажима. Участок гранулы, расположенный между стеклами, подводят под объектив микроскопа и оценивают сперму.
41
Подготовка препарата для оценки качества семени под микроскопом
Основным критерием, по которому оценивают качество спермы на пункте искусственного осеменения, является активное прямолинейнопоступательное движение (ППД) сперматозоидов. При оценке качества необходимо обращать внимание на наличие сперматозоидов с манежным движением (по кругу), с колебательными движениями (сперматозоид изгибается без продвижения вперед) и на агглютинацию (склеивание) сперматозоидов.
Подвижность сперматозоидов определяют по 10-балльной шкале в нескольких полях зрения. Высшую оценку (10 баллов) получает сперма, в которой практически все сперматозоиды (100%) имеют прямолинейнопоступательное движение (ППД). При оценке 4 балла примерно 4 сперматозоида из каждых 10 (т.е. 40%) имеют ППД и т.д. Другие виды движения сперматозоидов (манежное, колебательное) при оценке спермы по балльной системе не учитываются.
В соответствии с ГОСТом 2630-83 (изменения № I) «Сперма быков замороженная» после ее оттаивания должна соответствовать следующим требованиям: подвижность спермиев не ниже 4 баллов (40%), число спермиев с прямолинейным поступательным движением (ППД) в дозе не менее 15 млн, объем дозы 0,1-1 мл, выживаемость спермиев при 38°С не менее 5 ч, колититр отрицательный, патогенные микроорганизмы не допускаются.
От быков-производителей, проверенных по качеству потомства и признанных улучшателями, а также мясных пород, допускается к использованию сперма подвижностью не ниже 3 баллов (30%) и числом спермиев с прямолинейным поступательным движением в дозе не менее 10 млн.
При работе с оттаянной спермой следует помнить, что на жизнеспособность сперматозоидов влияют свет, температура, вода, спирт.
Используемые при искусственном осеменении одноразовые инструменты и материалы (пипетки, чехлы, перчатки, соломинки и т.д.) необходимо собирать в специальный контейнер (мусорный ящик) для дальнейшей утилизации.
Микроскопическая оценка качества спермы
Защита осеменительного инструмента с оцененной спермой перед осеменением
Пенал осеменатора
