Подготовка инструментов к работе
Техник надевает белый халат, колпак или косынку. Моет стол и руки. Оператор снимает с микроскопа чехол, по необходимости протирает, подключает электроосветитель, регулирует освещенность в микроскопе, делая ее неярко-матовой; предметные и покровные стекла кладет на обогревательный столик микроскопа.
Готовит термостатированную водяную баню температурой 38°С, опускает в нее термометр.
На чистый стол ставит тампонницу с тампонами, пропитанными 96%-ным спиртом.
На край стола кладет перчатки, канцелярские скрепки, пипетки, ампулы, салфетки и другие необходимые для осеменения инструменты согласно технологии.
Пинцетом достает первый спиртовой тампон, обрабатывает пальцы рук от кончиков пальцев к ладони, свободную часть стола и выбрасывает тампон. Пинцетом берет второй тампон, обрабатывает подставку для инструментов, протирая сначала среднюю часть, а затем боковые и нижнюю (все в одном направлении), ставит на стол, тампон выбрасывает. Третьим тампоном обрабатывает стеклянную палочку, пинцет, корнцанг, ножницы, осеменительный инструмент, ампулу с цитратом (все по направлению сверху вниз), выбрасывает его.
Обработанные инструменты кладет на подставку, а ампулу цитрата вскрывает резаком, так, чтобы в отверстие свободно входила гранула. Помещает ее в водяную баню или на столик Морозова для подогрева на 2-3 мин. Нельзя вскрывать ампулы, разбивая их по наружной стенке, так как стекло, попавшее в цитрат, может травмировать слизистую оболочку матки.
Банк спермы ОАО «ГЦВ»
35
Процесс подготовки инструментов к работе
• Начало работы
UJ H j
Дезинфекция рук перед работой
Дезинфекция подставки
Дезинфекция инструментов
Дезинфекция пакета с чехлами
Извлечение защитного чехла из пакета
Оттаивание спермы
Оттаивание спермы в открытых гранулах. Четвертым тампоном оператор обрабатывает пакет с пипетками (чехлами). Угол пакета надрезает стерильными ножницами или прорывает концом пипетки.
Выдвигает пипетку на 1/3 длины, соединяет ее со стерильным шприцом (или с полиэтиленовой ампулой) с помощью муфты.
Извлекает пипетку из пакета и кладет ее на подставку. Открытый угол пакета закрепляет канцелярской скрепкой.
Техник надевает защитные очки и перчатки, открывает сосуд Дьюара, быстро подтягивает к верхней трети горловины (не более 5 с) канистру с тубой и вскрывает ее. Извлекает стерильным, предварительно охлажденным в азоте, пинцетом (корнцангом) гранулу и переносит ее в подготовленную ампулу или флакон с раствором цитрата. Тубу с оставшимся семенем сразу закрывает и опускает в сосуд Дьюара в положение хранения. Закрывает сосуд крышкой. Эти манипуляции должны занимать не более 5 с.
Оттаивать гранулу необходимо при температуре +38°С в течение 8-10 с, осторожным вращательным движением перемещая ампулу со спермой в водяной бане до тонкого ледяного стерженька. После оттаивания ампулу со спермой насухо вытирают стерильной салфеткой, ставят в штатив из теплоизолирующего материала и определяют качество спермы. Категорически запрещается оттаивать в одной ампуле более одной гранулы, а также оставлять оттаянную сперму в водяной бане. При заправке пипетки поршень шприца, соединенного с ней, следует отвести на 1/3, создав тем самым достаточный запас воздуха для выталкивания всей спермы из пипетки. Только после этого набирают сперму, не допуская ее попадания в шприц. Для проверки герметичности инструмент располагают вертикально: столбик семени должен остаться на месте.
Для осеменения коров спермой, замороженной в открытых гранулах, используют стерильные одноразовые полистироловые пипетки, соединенные полиэтиленовым переходником или эластичной трубкой длиной 30-50 мм со шприцом на 2-5 мл.
