Размещение губки не рекомендуется, когда речь идет о молодых козах, которые еще не рожали, так как разрыв девственной плевы при введении губки приведет к налипанию боковых частей губки к внутренним стенкам влагалища при удалении губки. Альтернативой является разрыв девственной плевы с помощью накладывателя губки и размещение губки через неделю.
Стоимость синхронизации эструса с помощью использования губок и eCG составляет около 1 доллара на одну козу.
В случае ангорских коз, 60 мг медроксипрогестерона ацетата (MAP) использовалось в течение 17 дней в сочетании с методом «эффекта самца» (4% пробников в течение 48 часов), до удаления губки. В общей сложности у 80-90% самок наблюдался эструс между 24 и 72 часами после удаления губки.
Существует альтернативный вариант этого метода, который позволяет сократить временной интервал между введением и удалением губки до 11 дней. Для него требуется применение 100 мг клопростенола (простагландинов) и соответствующей дозы eCG, за 48 часов до удаления пессариев (маточных колец). Применение простагландинов на 9 день после введения губки сокращает биологическую активность желтых тел, которые по-прежнему функциональны.
Обращение со свежей спермой
Искусственное осеменение свежей спермой означает немедленное использование полученного эякулята путем помещения его в половые пути самок. После проведения анализа спермы и удостоверения в ее пригодности, а именно соответствия минимальным требованиям для использования, она может быть разбавлена либо разделена на фракции для получения 100 миллионов сперматозоидов на одну дозу, в объеме не превышающем 0,25 см3 на одну дозу. Так, например, эякулят, содержащий 3000 млн./см3 сперматозоидов, может быть использован для оплодотворения 30 самок.
Сперма может быть использована в чистом виде без разбавления из расчета 0,03 см3 на одну козу (1см3 /30) или в разбавленном виде путем добавления 10% коровьего снятого молока. Разбавление увеличивает сохранность спермы (в качестве информации: примерно 1 час между получением эякулята и последним осеменением). Кроме того, в этом случае легче осуществлять дозировку. Например в случае значений, указанных выше, и добавления 2 см3 разбавителя, получают 30 доз для осеменения по 0,1 см3 на одно животное.
Разбавитель предварительно подогревают до 92-94ºС в течение 10 минут, чтобы инактивировать сперматолитический фактор – лактенин – присутствующий в белковой фракции молока. Затем его охлаждают до 2830°С и добавляют к эякуляту, разливая по стенкам трубки и смешивая колебательными движениями.
Очень важно определять подвижность сперматозоидов через каждые 5 или 6 осеменений. Это гарантирует то, что общая плодовитость сохраняется на прежнем уровне и не претерпела каких-либо изменений в результате незамеченных технических случайностей (перемешивания с водой, тепловой нагрузки и т.д.).
Свежая разбавленная сперма козла, охлажденная до 5ºC, не должна храниться более 8-12 часов, так как она теряет свою оплодотворяющую способность. Разбавитель готовят при помощи 10% снятого молока, 1% глюкозы и добавления небольшого количества антибиотиков. Контрольные дозы охлажденной спермы для осеменения содержат 150 миллионов сперматозоидов на козу.
Обращение с замороженной спермой
Размораживание замороженной спермы осуществляется при температуре 36ºC. После размораживания ее следует быстро использовать. Если сперма была заморожена в виде гранул, то размораживание может быть осуществлено в сухих гемолитических пробирках, подогретых до указанной температуры, на водяной бане.
Дозы, замороженные в соломинках, размораживают непосредственно на водяной бане. Через 30 секунд соломинки вынимаются из ванночки и высушиваются одноразовым бумажным полотенцем. Оба конца отрезаются для выпуска спермы в гемолитическую пробирку. Важно, чтобы контейнеры не поднимались выше открытого конца термоса с жидким азотом в процессе процедуры размораживания.
Следует учитывать, что действия, связанные с искусственным осеменением, должны проводиться в среде с кондиционированным воздухом при температуре 25ºC.
Термос с жидким азотом имеет двойные стенки (внешнюювнутреннюю), разделенные вакуумом, для сохранения холодной температуры. Внутри термоса температура стабильная, пока поддерживается минимум 12-14 см азота. Для определения количества содержимого используется деревянная линейка, окрашенная в черный цвет. Линейку погружают на 30 секунд, вынимают и трясут до появления белого замерзшего слоя, и высота этого замерзшего слоя соответствует уровню жидкого азота. Следует учитывать, что при уменьшении объема возрастает потеря азота при испарении.
Особенное внимание следует обращать при использовании жидкого азота, так как прямой или косвенный контакт с такими низкими температурами может вызвать серьезные травмы.
Цервикальное искусственное осеменение
У коз, в отличие от овец, цервикальное искусственное осеменение может быть осуществлено с использованием как свежей, так и
замороженной спермы. Из-за трудностей, возникающих при внедрении оболочки для осеменения через шейку матки, помимо сокращения жизнеспособности сперматозоидов в результате замораживания и размораживания, необходимо увеличение числа сперматозоидов на дозу при использовании замороженной спермы по сравнению со свежей спермой (200 и 100 миллионов сперматозоидов соответственно).
Место, где проводится осеменение, должно быть чистым и свободным от воздушных потоков, температура должна составлять 2025ºC. Самки заключаются как можно быстрее в загоны или коридоры для скота, в стоячем положении, чтобы избежать ненужного стресса. Коридоры могут быть построены на полу сарая или приподняты над полом на более удобную высоту для осеменатора. Метод, позволяющий обеспечить наиболее удобное расположение коз для цервикального осеменения, называется методом «над перилами». Самки представляются для цервикального осеменения ассистентом, стоящим в коридоре и поднимающим задние конечности животного над перилами.
Вульву очищают одноразовым бумажным полотенцем, и небольшое количество вазелина наносится на влагалищное зеркало для облегчения введения. В то время как одна рука держит хвост животного, другая медленно вводит влагалищное зеркало в спинном направлении (животного). После введения внутрь на несколько сантиметров его необходимо направить горизонтально в нижнюю часть влагалища. Шейка матки может быть обнаружена посредством мягкого манипулирования влагалищным зеркалом в сторону или вниз. Если присутствует обильная слизь, то ее можно абсорбировать и удалить с помощью пластиковой пипетки или шприца. Когда это сделано, помощник передает сперму. Пипетка для осеменения Шейка матки Яичник Влагалищное Матка зеркало яйцевод
Рисунок А. Цервикальное искусственное осеменение.
