Очень важно определять подвижность сперматозоидов через каждые 5 или 6 осеменений. Это гарантирует то, что общая плодовитость сохраняется на прежнем уровне и не претерпела каких-либо изменений в результате незамеченных технических случайностей (перемешивания с водой, тепловой нагрузки и т.д.).
Свежая разбавленная сперма козла, охлажденная до 5ºC, не должна храниться более 8-12 часов, так как она теряет свою оплодотворяющую способность. Разбавитель готовят при помощи 10% снятого молока, 1% глюкозы и добавления небольшого количества антибиотиков. Контрольные дозы охлажденной спермы для осеменения содержат 150 миллионов сперматозоидов на козу.
Обращение с замороженной спермой
Размораживание замороженной спермы осуществляется при температуре 36ºC. После размораживания ее следует быстро использовать. Если сперма была заморожена в виде гранул, то размораживание может быть осуществлено в сухих гемолитических пробирках, подогретых до указанной температуры, на водяной бане.
Дозы, замороженные в соломинках, размораживают непосредственно на водяной бане. Через 30 секунд соломинки вынимаются из ванночки и высушиваются одноразовым бумажным полотенцем. Оба конца отрезаются для выпуска спермы в гемолитическую пробирку. Важно, чтобы контейнеры не поднимались выше открытого конца термоса с жидким азотом в процессе процедуры размораживания.
Следует учитывать, что действия, связанные с искусственным осеменением, должны проводиться в среде с кондиционированным воздухом при температуре 25ºC.
Термос с жидким азотом имеет двойные стенки (внешнюювнутреннюю), разделенные вакуумом, для сохранения холодной температуры. Внутри термоса температура стабильная, пока поддерживается минимум 12-14 см азота. Для определения количества содержимого используется деревянная линейка, окрашенная в черный цвет. Линейку погружают на 30 секунд, вынимают и трясут до появления белого замерзшего слоя, и высота этого замерзшего слоя соответствует уровню жидкого азота. Следует учитывать, что при уменьшении объема возрастает потеря азота при испарении.
Особенное внимание следует обращать при использовании жидкого азота, так как прямой или косвенный контакт с такими низкими температурами может вызвать серьезные травмы.
Цервикальное искусственное осеменение
У коз, в отличие от овец, цервикальное искусственное осеменение может быть осуществлено с использованием как свежей, так и
замороженной спермы. Из-за трудностей, возникающих при внедрении оболочки для осеменения через шейку матки, помимо сокращения жизнеспособности сперматозоидов в результате замораживания и размораживания, необходимо увеличение числа сперматозоидов на дозу при использовании замороженной спермы по сравнению со свежей спермой (200 и 100 миллионов сперматозоидов соответственно).
Место, где проводится осеменение, должно быть чистым и свободным от воздушных потоков, температура должна составлять 2025ºC. Самки заключаются как можно быстрее в загоны или коридоры для скота, в стоячем положении, чтобы избежать ненужного стресса. Коридоры могут быть построены на полу сарая или приподняты над полом на более удобную высоту для осеменатора. Метод, позволяющий обеспечить наиболее удобное расположение коз для цервикального осеменения, называется методом «над перилами». Самки представляются для цервикального осеменения ассистентом, стоящим в коридоре и поднимающим задние конечности животного над перилами.
Вульву очищают одноразовым бумажным полотенцем, и небольшое количество вазелина наносится на влагалищное зеркало для облегчения введения. В то время как одна рука держит хвост животного, другая медленно вводит влагалищное зеркало в спинном направлении (животного). После введения внутрь на несколько сантиметров его необходимо направить горизонтально в нижнюю часть влагалища. Шейка матки может быть обнаружена посредством мягкого манипулирования влагалищным зеркалом в сторону или вниз. Если присутствует обильная слизь, то ее можно абсорбировать и удалить с помощью пластиковой пипетки или шприца. Когда это сделано, помощник передает сперму. Пипетка для осеменения Шейка матки Яичник Влагалищное Матка зеркало яйцевод
Рисунок А. Цервикальное искусственное осеменение.
После введения спермы желательно, чтобы козы оставались в положении осеменения в течение 2 или 3 минут, а затем были помещены в загон рядом с самцами на несколько часов. В случае молодых самок процесс введения влагалищного зеркала является очень травмирующим. Поэтому предпочтительнее осуществлять искусственное осеменение только путем введения пипетки для осеменения в вульву и выброса спермы в нижнюю часть влагалища.
Лапароскопическое искусственное осеменение
Эндоскопия выполняется путем введения оптической системы в организм животного через брюшной прокол; гибкий световод дает свет, позволяя рассматривать внутренние органы не прибегая к хирургии.
Когда проводится искусственное осеменение, данный метод известен как лапароскопия, так как он позволяет наблюдать внутренние половые органы через брюшную стенку. Небольшие отверстия делаются троакаром рядом с молочной железой, и доза спермы вводится через них. Осеменение состоит из введения половины дозы спермы в каждый рог матки с помощью пипетки с тонкой иглой на одном конце (рис. B).
Шприц для осеменения
Зажим Брюшная стенка
Эндоскоп
Рог матки
Яичник
Рисунок B. Лапароскопическое искусственное осеменение.
Данный метод осеменения посредством лапароскопии широко используется в отношении овец из-за низкого уровня беременности, получаемой при использовании замороженной спермы посредством цервикального осеменения (20-35%). Это связано с трудностями переноса шейки матки овцы с помощью пипетки для осеменения.
