комплементсвязывающих антител. По мнению автора, реакция очень удобна для исследования.
J. Kadhim, al-Attar M (1974) сообщают, что метод иммунодиффузии в геле приемлем для диагностики фасциолеза овец.
Булajuh Mиркo, Лалuh Рaдoмир, Moвcеjan Muoдpaг, Чуперлович Коста (1977) изучили сравнительную эффективность иммунобиологических реакций, предложенных для диагностики фасциолеза. Ими было установлено, что секреторно-экскреторный антиген из фасциол является наиболее удобным для иммунодиагностики фасциолеза у людей и животных. Реакция связывания комплемента и двойной диффузии в агаровом геле являются чувствительными реакциями. Реакция непрямой флуоресценции антител является очень чувствительной и удобной в случаях, когда в качестве антигенов используют срезы половозрелых фасциол или их мирацидии.
J. Ecket et al (1977) при исследовании крупного рогатого скота на фасциолез методом непрямой иммунофлуоресценции в модификации Хесса (1974) установили, что у копрологически положительных животных титры флюоресцирующих антител колебались от 1:20 до 1:640, у копрологически отрицательных не превышали 1:10.
Изучена пригодность реакции агглютинациии с латексом для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота (K. Gladysz – Pawiak, 1977). Антиген получали гомогенизацией половозрелых фасциол, с последующим многократным замораживанием и оттаиванием, диализацией, центрифугированием и сбором супернатанта. По мнению авторов, этот метод позволяет выявить до 81,7 % инвазированных животных. При интенсивной инвазии и хроническом течении результат был более высоким 90,5 – 91,8 %, а при низкой интенсивности и ранней инвазии – 68,5 – 76,8 %.
Немецкими учеными M. Grelck, F. Horchner (1977) проведена сравнительная оценка реакции иммунофлуоресценции и иммунопероксидазного метода при серологической диагностике фасциолеза крупного рогатого скота. В качестве антигена использовали замороженные
34
срезы фасциол. При испытании сывороток крови животных из эндемических очагов фасциолеза иммунофлуоресцентным методом антитела выявлены у тех животных, у которых были обнаружены фасциолы, но положительная реакция также была получена с рядом сывороток от животных, у которых отсутствовали фасциолы. При испытании тех же сывороток иммунопероксидазным методом положительные результаты были получены в 93 % случаев.
Реакция с сыворотками животных, не пораженных фасциолами, была отрицательная. Таким образом, авторы рекомендуют использовать для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота иммунопероксидазный метод.
Авторы B. Pesson, N. Leger, G. Madulo – Leblond (1979) рекомендуют в целях диагностики фасциолеза использовать комбинацию двух иммунологических реакций – непрямой гемагглютинации, обладающей высокой чувствительностью и иммуноэлектрофореза (РИЭФ), обладающего высокой специфичностью.
E. J. Ruitenberg, A. Capron, D. Bout, F. Knapen (1977) утверждают, что «ELISA» считается ценным серологическим тестом. Специфичность может быть повышена путем использования очищенного специфического антигена. Этот тест имеет особенную ценность в разграничении между ранними формами заболевания и поздними.
D. Burgen, N. Hammet (1978) считают, что РЭМА позволяет диагностировать антитела против фасциол уже начиная с пятой недели после заражения.
B. Pesson, N. Leger, G. Madulo – Leblond (1979) обращают внимание на дальнейшее развитие и широкое внедрение в практику количественной иммуноэнзимологии, в частности, энзиммеченного иммуносорбционного метода (ELIZA), обладающего высокой специфичностью и чувствительностью.
Швейцарскими учеными K. Pfister, G. Keller, B. Baisiger (1986) было доказано, что метод ELIZA обладает высокой чувствительностью на ранней и поздней (8 и 20 нед.) стадиях развития паразита у экспериментально зараженных Fasciola hepatica животных. В неблагополучных 8 фермах выявлено 64 – 84 % положительно реагирующих животных, причем в период пастбищного сезона (май – октябрь) наблюдали высокие показатели ELIZA (200 – 400). Они делают заключение, что метод ELIZA можно применять для ранней диагностики фасциолеза и эпизоотологического обследования крупного рогатого скота в стаде.
I.J. Sinelair, D.A. Wassall (1986) проводили оценку растворимого экстракта взрослых фасциол и антигена, приготовленного из культуральной жидкости, в которой гельминты находились в течение 24 часов для постановки ELIZA – теста. С помощью антигена, приготовленного из культуральной жидкости, обнаружили специфические антитела к Fasciola hepatica в 91 сыворотке крови, а при использовании в качестве антигена растворимого экстракта взрослых фасциол положительные результаты получили в 33 случаях. Они отметают о возможности повышения чувствительности метода ELIZA в результате использования культурального антигена, содержащего продукты метаболизма Fasciola hepatica.
C. A. R. Marrero, N. Santiago, C.V. Hillyer (1988) также рекомендуют в целях диагностики фасциолеза иммуноферментный метод. Антиген готовили из промытых фасциол, инкубированных в забуференном физиологическом растворе при температуре 37о С в течение 3 часов. Культуральную среду центрифугировали, супернатант использовали свежим. Фракция антигена, обогащенная высокомолекулярными компонентами была реактивной ДОТ – иммуноферментном тесте. Иммуноферментный блот – методикой выявился острый и хронический фасциолез.
Зарубежными авторами C. Arriaga de Morilla, R. Paniagua, A.A. Ruiz – Navarrete (1989) было проведено сравнение точечного иммуно-ферментного
