Швейцарскими учеными K. Pfister, G. Keller, B. Baisiger (1986) было доказано, что метод ELIZA обладает высокой чувствительностью на ранней и поздней (8 и 20 нед.) стадиях развития паразита у экспериментально зараженных Fasciola hepatica животных. В неблагополучных 8 фермах выявлено 64 – 84 % положительно реагирующих животных, причем в период пастбищного сезона (май – октябрь) наблюдали высокие показатели ELIZA (200 – 400). Они делают заключение, что метод ELIZA можно применять для ранней диагностики фасциолеза и эпизоотологического обследования крупного рогатого скота в стаде.
I.J. Sinelair, D.A. Wassall (1986) проводили оценку растворимого экстракта взрослых фасциол и антигена, приготовленного из культуральной жидкости, в которой гельминты находились в течение 24 часов для постановки ELIZA – теста. С помощью антигена, приготовленного из культуральной жидкости, обнаружили специфические антитела к Fasciola hepatica в 91 сыворотке крови, а при использовании в качестве антигена растворимого экстракта взрослых фасциол положительные результаты получили в 33 случаях. Они отметают о возможности повышения чувствительности метода ELIZA в результате использования культурального антигена, содержащего продукты метаболизма Fasciola hepatica.
C. A. R. Marrero, N. Santiago, C.V. Hillyer (1988) также рекомендуют в целях диагностики фасциолеза иммуноферментный метод. Антиген готовили из промытых фасциол, инкубированных в забуференном физиологическом растворе при температуре 37о С в течение 3 часов. Культуральную среду центрифугировали, супернатант использовали свежим. Фракция антигена, обогащенная высокомолекулярными компонентами была реактивной ДОТ – иммуноферментном тесте. Иммуноферментный блот – методикой выявился острый и хронический фасциолез.
Зарубежными авторами C. Arriaga de Morilla, R. Paniagua, A.A. Ruiz – Navarrete (1989) было проведено сравнение точечного иммуно-ферментного
теста, реакции пассивной гемагглютицации и тонкослойного иммунологического теста для диагностики спонтанного и экспериментального фасциолеза у 31 овцы. Диагноз на фасциолез был подтвержден обнаружением взрослых фасциол в печени и яиц гельминта в фекалиях овец. Контролем служили 30 овец из благополучных по фасциолезу хозяйств, результаты копрологического исследования которых на наличие яиц гельминтов дали отрицательный результат. В качестве антигена при постановке перечисленных выше серологических тестов использовали метаболический (экскреторно-секреторный) антиген Fasciola hepatica. Наиболее чувствительным методом серологической диагностики оказался точечный иммуноферментный тест. Титры антител при этом были в 1000 – 2000 раз выше, чем титры антител, определяемые двумя другими серологическими реакциями.
Зарубежными учеными F. Ibarra, N. Montenego, Y. Vera, C. Boulard и другими (1998) проведено сравнение чувствительности и специфичности вариантов: ДОТ – ELIZA, непрямого ELIZA и ELIZA в сочетании с методом диффузии в геле (ДГ – ELIZA) для серологического обследования крупного рогатого скота на наличие антител к фасциолам в тропических условиях Мексики. Чувствительность непрямого варианта ELIZA была в пределах 96,5%, специфичность – 98,8 %, ДГ – ELIZA – 97,5 и 80 %, а ДОТ – ELIZA – 93,1 и 95,4 % соответственно. Делается вывод, что все испытанные ELIZA варианты являются высокочувствительными, специфичными и могут быть рекомендованы для серологического обследования крупного рогатого скота на наличие Fasciola hepatica.
Т.С. Золоткова, М.Д. Новак (2000) разработали антиген и изучили эффективность РНГА при фасциолезе. На основании широкого сероэпизоотологического мониторинга в комплексе с послеубойными исследованиями в хозяйствах Костромской области при фасциолезе крупного рогатого скота подтвердили высокую диагностическую ценность и
эффективность РНГА, оптимальное соотношение специфичности и чувствительности.
Аргентинские авторы A. Picardo Moriena, D. Jox Alvarez, A. Alicia Alvares и другие (2002) считают, что одним из перспективных методов диагностики фасциолеза крупного рогатого скота является ELIZA (сэдвичметод), используемый для обнаружения копроантигенов Fasciola hepatica в испражнениях посредством особых моноклональных антител, преимущество которого состоит в том, что позволяет качественно и количественно обнаружить антигены, с первого момента миграции фасциол в тканях печени до развития взрослых особей в желчных протоках и откладывания ими яиц в организме животных.
Таким образом, анализ литературы по серологической диагностике гельминтозов показывает, что в этих целях исследователями использовались различные реакции: реакция связывания комплемента, непрямой гемагглютинации, реакция агглютинации с латексом или кармином, реакция непрямой иммунофлуоресценции, реакция энзиммеченных антител, двойной диффузии в агаровом геле, иммунопероксидазный, иммуноферментный метод, комбинация непрямой реакции гемагглютинации и иммуноэлектрофореза и другие.
Однако, несмотря на то, что РСК относится к числу первых иммунологических методов, которая была апробирована еще в 1911 году, работ, касающихся разработки антигена для РСК и изучению диагностической эффективности этой реакции сравнительно мало.
Аллергическая диагностика. Аллергическое воздействие гельминтов на организм рассматривается как основной процесс патогенеза заболеваний. Известно, что в теле гельминтов (соматические) и их метаболитах (продукты обмена) содержатся полипептиды, аллергогеные и анафилактогенные протеины, а также гликолипиды и полисахариды. Эти вещества, первично попав в организм, вызывают сенсибилизацию.
