Комбинированным методом Демидова и седиментационным методом последовательных смывов в 1 мл надосадочной жидкости было обнаружено в среднем 1 % яиц фасциол.
Кроме того, необходимо отметить, что из-за большого удельного веса базисного насыщенного раствора хлорида цинка по методу КотельниковаВареничева, поверхностная пленка после центрифугирования была сильно засорена не переваренными остатками корма, которые в определенной степени затрудняли просмотр материала и в конечном итоге влияли на диагностическую эффективность испытуемой флотационной жидкости.
У комбинированных растворов хлорида цинка с хлоридом натрия поверхностная пленка после центрифугирования оставалась чистой, нанесенные капли не подвергались кристаллизации в течение 3-х часов. Таким образом, проведенными исследованиями установили, что при гельминтоовоскопии яиц фасциол наиболее эффективным является метод Котельникова-Вареничева с использованием комбинированного флотационного раствора хлорида цинка с хлоридом натрия в соотношении 1:0,5. Использование насыщенных растворов солей в указанном соотношении позволил выявить в среднем 32 % фасциол в 1 мл поверхности взвеси.
Следующим этапом наших исследований явилось усовершенствование метода Котельникова-Вареничева при гельминтоовоскопии яиц фасциол, используя разные флотационные жидкости, приготовленные как из двух, так и из трех ингредиентов, отрабатывая при этом их оптимальное соотношение. Ингредиентами служили насыщенные растворы хлорида цинка (на 1 л воды 2 кг ZnCl2, имеющий плотность 1,82 при 20о С), хлорид натрия (на 1 л воды 420 г NaCl, имеющий плотность 1,19 при 20о С), сахара (на 1 л воды 1670 г, имеющий плотность 1,28 при 20о С). Диагностическую эффективность метода Котельникова–Вареничева определяли в разных соотношениях базовых растворов, которые использовались в качестве флотационных жидкостей.
Собранные из маток гельминтов яйца фасциол (50 экз.) закладывали в пробы фекалий крупного рогатого скота весом 1 г, которые были свободны от яиц трематод. Затем в стаканчики заливали 30 мл воды, отстаивали 10 мин, надосадочную жидкость сливали, а осадок вносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 2-х мин. После надосадочную жидкость сливали, а в осадок заливали флотационную жидкость, тщательно размешивали палочкой и снова центрифугировали 2 мин при 1500 об/мин. Поверхностную пленку снимали металлической петлей, переносили в сетку Акбаева с последующим просмотром под малым увеличением микроскопа.
В целях стандартизации исследований в работе использовали один и тот же материал, идентичную посуду, отстаивали и центрифугировали пробы в течение одного и того же времени. Работали петлями одинакового диаметра (0,9 мл), подсчет яиц вели в сетке Акбаева, внося 0,2 мл (5 капель) поверхностной пленки. Таким образом, каждую пробу исследовали в сетке Акбаева 5 раз, внося в общей сложности 25 капель (1 мл) поверхностного слоя пленки. Зная количество заложенных в пробах фекалий яиц фасциол, оценку проводили количественным методом. Все исследования проводили в десяти повторностях, а полученные результаты подвергали статистическому анализу.
В качестве контрольного метода использовали седиментационный метод последовательных смывов.
Данные о диагностической эффективности метода Котельникова– Вареничева с различными комбинированными флотационными жидкостями в сравнении с седиментационным методом последовательных смывов диагностике фасциолеза представлены в таблице 11.
Из таблицы 11 видно, что седиментационный метод последовательных смывов выявил в среднем 1,2 % яиц фасциол. При использовании в качестве флотационной жидкости насыщенных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 2:1 по методу Котельникова-Вареничева удалось
11. Диагностическая эффективность метода Котельникова-Вареничева
с различными флотационными жидкостями при диагностике
фасциолеза
| № п/п | Соотношение базисных растворов | Удельн ый вес раствор а | Количест во заложенн ых в 1 пробе яиц фасциол | Количест во обнаруж енных в 1 пробе яиц фасциол | Процент выявлен ных яиц фасциол | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ZnCl2 | NaCl | C12H22O11 | |||||
| 1. | 2 | 1 | – | 1,73 | 50 | 22,1±0,6 | 44,2±1,2 |
| 2. | 1 | 1 | – | 1,68 | 50 | 19,8±0,8 | 39,6±1,6 |
| 3. | 2 | 1 | 1 | 1,63 | 50 | 30,1±1,2 | 60,2±1,2 |
| 4. | 2 | 1 | 2 | 1,60 | 50 | 26,3±1,1 | 52,6±2,2 |
| 5. | 2 | 2 | 1 | 1,58 | 50 | 20,4±0,7 | 40,8±1,4 |
| 6. | 1 | 1 | 1 | 1,55 | 50 | 14,3±0,4 | 28,6±0,8 |
| Метод | последовательных | смывов | |||||
| 1,00 | 50 | 0,6±0,02 | 1,2±0,04 | ||||
