материала. Поэтому изыскание наиболее оптимальных флотационных жидкостей и эффективных гельминтоовоскопических методов диагностики трематодозов остается актуальной проблемой.
Кроме того, анализ данных проведенных исследований показывает, что наиболее высокую диагностическую эффективность проявляют те гельминтоовоскопические методы, у которых в состав флотационных жидкостей входит хлорид цинка. Это такие методы как КотельниковаВареничева и Сафиуллина.
В целях усовершенствования гельминтоовоскопических методов диагностики фасциолеза мы апробировали разные флотационные жидкости из хлорида цинка, приготовленные как из одного ингредиента, так и в комбинации с насыщенным раствором хлорида натрия, отрабатывая их оптимальное соотношение. Нами был модифицирован комбинированный метод Котельникова-Вареничева с насыщенным раствором хлорида цинка (на 1 л воды 2 кг ZnCl2, имеющий плотность 1,82 при 20о С), который приняли за базовый. К этому раствору добавляли насыщенный раствор поваренной соли (второй базовый раствор – на 1 л воды 420 г NaCl), имеющий плотность 1,19 при 20о С в соотношениях 1:0,5, 1:1, 1:1,5, 1:2, 1:2,5, 1:3, 1:4. Собранные из маток гельминтов яйца фасциол (100 экз.) закладывали в пробы фекалий крупного рогатого скота весом 1 г, которые были свободны от яиц трематод. Затем в стаканчики заливали воду в объеме 30 мл, отстаивали 10 мин, надосадочную жидкость сливали, а осадок вносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 2- х минут. После надосадочную жидкость сливали, а в осадок заливали флотационную жидкость, размешивали палочкой и снова центрифугировали 2 мин. при 1500 об/мин. Поверхностную пленку снимали металлической петлей, переносили в сетку Акбаева с последующим просмотром под малым увеличением микроскопа.
В целях стандартизации исследований в работе использовали один и тот же материал, идентичную посуду (стаканчики объемом 30 мл,
центрифужные пробирки объемом 10 мл), отстаивали и центрифугировали пробы в течение одного и того же времени. Работали петлями одинакового диаметра (0,9 мл), подсчет яиц вели в сетке Акбаева, внося в нее 0,2 мл (5 капель) поверхностной пленки. Таким образом, каждую пробу исследовали в сетке Акбаева 5 раз, внося в общей сложности 25 капель (1 мл) поверхностного слоя пленки. Зная количество заложенных в пробах фекалий яиц трематод, оценку осуществляли количественным методом. Все исследования проводили в десяти повторностях, а полученные результаты подвергали статистическому анализу. В качестве контрольного метода использовали седиментационный метод последовательных смывов и комбинированный метод Демидова.
Данные о сравнительной эффективности метода КотельниковаВареничева с различными моно- и комбинированными флотационными жидкостями в сравнении с методами Демидова и последовательных смывов при диагностике трематодозов приведены в таблице 10.
Данные таблицы показывают, что по методу КотельниковаВареничева с насыщенным раствором хлорида цинка было выявлено в среднем 18% яиц фасциол в 1 мл поверхности взвеси. При использовании базисных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 1:0,5 было обнаружено в среднем 32 % яиц фасциол. Комбинированный раствор этих же солей в соотношении 1:1 дал возможность обнаружить 21 ± 0,7 % яиц, а флотационные растворы в соотношении 1:1,5 и 1:2 – в среднем 19 % заложенных яиц фасциол.
При использовании комбинированных растворов с более низким удельным весом (1,32 – 1,41) яйца фасциол не всплывали на поверхность жидкости. Так, при соотношении базисных растворов 1:2,5 было обнаружено в среднем 1 % яиц фасциол, в соотношении 1:3 и 1:4 яйца фасциол в этих растворах не были выявлены.
- Сравнительная эффективность метода Котельникова-Вареничева с различными моно- и комбинированными флотационными жидкостями в сравнении с методами Демидова и последовательных смывов при диагностике фасциолеза
| № п/п | Методы исследований | Использ ованный реактив | Соотнош ение базисн ых раство ров | Удель ный вес раств ора | Количес тво залож енных в 1 пробе яиц фасци ол | Количест во обнару женных в 1 пробе яиц фасцио л | Процент выявленны яиц фасциол |
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. | Котельникова- Вареничева – // – – // – – // – – // – – // – – // – – // – Демидова Последователь ных смывов | ZnCl2 ZnCl2+Na Cl – // – – // – – // – – // – – // – – // – NaCl H2O | – 1:0,5 1:1 1:1,5 1:2 1:2,5 1:3 1:4 – – | 1,82 1,73 1,66 1,60 1,49 1,41 1,38 1,32 1,19 1,0 | 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 | 18±0,6 32±1,1 21±0,7 19±0,8 19±1,1 1±0,02 – – 1±0,02 1±0,02 | 18±0,6 32±1,1 21±0,7 19±0,8 19±1,1 1±0,02 – – 1±0,02 1±0,02 |
