Собранные из маток гельминтов яйца фасциол (50 экз.) закладывали в пробы фекалий крупного рогатого скота весом 1 г, которые были свободны от яиц трематод. Затем в стаканчики заливали 30 мл воды, отстаивали 10 мин, надосадочную жидкость сливали, а осадок вносили в центрифужные пробирки и центрифугировали при 3000 об/мин в течение 2-х мин. После надосадочную жидкость сливали, а в осадок заливали флотационную жидкость, тщательно размешивали палочкой и снова центрифугировали 2 мин при 1500 об/мин. Поверхностную пленку снимали металлической петлей, переносили в сетку Акбаева с последующим просмотром под малым увеличением микроскопа.
В целях стандартизации исследований в работе использовали один и тот же материал, идентичную посуду, отстаивали и центрифугировали пробы в течение одного и того же времени. Работали петлями одинакового диаметра (0,9 мл), подсчет яиц вели в сетке Акбаева, внося 0,2 мл (5 капель) поверхностной пленки. Таким образом, каждую пробу исследовали в сетке Акбаева 5 раз, внося в общей сложности 25 капель (1 мл) поверхностного слоя пленки. Зная количество заложенных в пробах фекалий яиц фасциол, оценку проводили количественным методом. Все исследования проводили в десяти повторностях, а полученные результаты подвергали статистическому анализу.
В качестве контрольного метода использовали седиментационный метод последовательных смывов.
Данные о диагностической эффективности метода Котельникова– Вареничева с различными комбинированными флотационными жидкостями в сравнении с седиментационным методом последовательных смывов диагностике фасциолеза представлены в таблице 11.
Из таблицы 11 видно, что седиментационный метод последовательных смывов выявил в среднем 1,2 % яиц фасциол. При использовании в качестве флотационной жидкости насыщенных растворов хлорида цинка и хлорида натрия в соотношении 2:1 по методу Котельникова-Вареничева удалось
11. Диагностическая эффективность метода Котельникова-Вареничева
с различными флотационными жидкостями при диагностике
фасциолеза
| № п/п | Соотношение базисных растворов | Удельн ый вес раствор а | Количест во заложенн ых в 1 пробе яиц фасциол | Количест во обнаруж енных в 1 пробе яиц фасциол | Процент выявлен ных яиц фасциол | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| ZnCl2 | NaCl | C12H22O11 | |||||
| 1. | 2 | 1 | – | 1,73 | 50 | 22,1±0,6 | 44,2±1,2 |
| 2. | 1 | 1 | – | 1,68 | 50 | 19,8±0,8 | 39,6±1,6 |
| 3. | 2 | 1 | 1 | 1,63 | 50 | 30,1±1,2 | 60,2±1,2 |
| 4. | 2 | 1 | 2 | 1,60 | 50 | 26,3±1,1 | 52,6±2,2 |
| 5. | 2 | 2 | 1 | 1,58 | 50 | 20,4±0,7 | 40,8±1,4 |
| 6. | 1 | 1 | 1 | 1,55 | 50 | 14,3±0,4 | 28,6±0,8 |
| Метод | последовательных | смывов | |||||
| 1,00 | 50 | 0,6±0,02 | 1,2±0,04 | ||||
выявить в среднем 44,2 % яиц фасциол в 1 мл поверхности взвеси. Эти же ингредиенты при соотношении 1:1 дали возможность обнаружить в среднем 39,6 % яиц фасциол.
Наиболее эффективной оказалась флотационная жидкость, состоящая из трех ингредиентов – насыщенных солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1. С помощью этой флотационной жидкости (удельный вес 1,63) по методу Котельникова-Вареничева было выявлено в среднем 60,2 % яиц фасциол.
При уменьшении удельного веса флотационной жидкости из трех ингредиентов снижалась и диагностическая эффективность этого метода. Так, при соотношении базисных растворов 2:1:2 (при удельном весе 1,60) было обнаружено в среднем 52,6 % фасциол, а соотношение ингредиентов 2:2:1 (при удельном весе 1,58) дало возможность выявить в среднем 40,8 % яиц гельминтов.
Наименьшее число яиц фасциол (28,6 %) выявлено с помощью флотационного раствора в соотношении ингредиентов 1:1:1, удельный вес которого составлял 1,55.
Таким образом, результаты проведенных исследований по изучению сравнительной эффективности гельминтоовоскопических методов при фасциолезе крупного рогатого скота показали, что наиболее высокой диагностической эффективностью обладает усовершенствованный копрологический метод Котельникова–Вареничева с использованием флотационной жидкости, состоящей из трех ингредиентов: насыщенных солей хлорида цинка, хлорида натрия и сахара в соотношении 2:1:1.
Глава 7. Совершенствование серологической диагностики фасциолеза
По мнению многих авторов, наиболее перспективными для прижизненной диагностики фасциолеза являются иммунологические методы,
