ветеринарно-санитарную экспертизу органов, а сыворотку крови исследовали серологически и их результаты сопоставляли с данными посмертной диагностики, после чего судили об активности и специфичности фасциолового антигена. Результаты этих исследований представлены в таблице 20.
Из таблицы видно, что как молодняк до 2-х лет (50 голов), а так же нетели и коровы (80 гол.) свободные от гельминтов, показали отрицательные результаты при серологическом исследовании. Из инвазированных фасциолами 58 животных (острая форма) в ИФА положительно реагировали 56 (96,6 %), в РСК – 53 (91,4 %). При исследовании 144 голов крупного рогатого скота, инвазированного половозрелыми фасциолами, в ИФА положительно реагировали 137, что составляет 95,1 % от числа инвазированного крупного рогатого скота. В РСК реакция была положительная у 130 (90,2 %) животных.
Таким образом, диагностическая эффективность ИФА при остром течении фасциолеза равна 96,6 %, при хроническом – 95,1 %, а показатели РСК составляют соответственно 91,4 % и 90,2 %.
При изучении специфичности нами были исследованы серологически 45 инвазированных дикроцелиозом животных. При этом положительные результаты были отмечены у 1 (2,2 %), а в РСК у 2 (4,4 %) животных.
При исследовании 33 голов крупного рогатого скота, инвазированного ларвальным эхинококкозом, в ИФА позитивные показания отметили у двух (6,1%), в РСК у трех животных (9,1 %).
Таким образом, у крупного рогатого скота, инвазированного дикроцелиозом и ларвальным эхинококкозом, при исследовании сывороток их крови в ИФА, а также в РСК с фасциоловым антигеном могут быть перекрестные реакции.
Глава 8. Аллергическая диагностика фасциолеза крупного рогатого скота
При изучении сравнительной эффективности аллергической пробы, РСК и копрологического метода исследований при фасциолезе крупного рогатого скота использовали аллерген, изготовленный по методу В.Г. Эврановой (1956).
Содержание белка в аллергенах определяли спектрофотометрическим методом на СФ-4А при длине волн 280 нм.
Стерильность аллергенов устанавливали высевами на мясопептонный агар и мясопептонный бульон с выдержкой в термостате в течение 10 дней.
Токсичность аллергена проверяли на 20 белых мышах путем подкожного введения по 0,5 мл. Мыши находились под наблюдением 10 суток.
Специфичность аллергенов изучали на 10 интактных кроликах, 20 телятах 4 – 6 месячного возраста, а активность – на 200 коровах и 40 нетелях в неблагополучном по фасциолезу хозяйстве.
Препараты вводили кроликам в область брюшка (0,1 мл), а крупному рогатому скоту в среднюю треть шеи (0,2 мл), предварительно подготовив место инъекции.
Реакцию учитывали через 1,5 – 2 и 24 часа и оценивали по следующей шкале: утолщение кожной складки на 5 мм и более – положительная реакция; утолщение кожной складки до 4 мм – отрицательная реакция.
Посевы полученных аллергенов при инкубировании в течение 10 дней в термостате оставались стерильными. Подкожным введением аллергенов белым мышам была установлена их безвредность.
При внутрикожном введении аллергена 10 здоровым кроликам и 20
телятам 4 – 6 месячного возраста реакция на месте введения препарата была отрицательной.
Разрешающую способность аллергической пробы при фасциолезе изучали в 2-х опытах в коллективном предприятии «Алга» Кукморского района Республики Татарстан, который является неблагополучным по фасциолезу. Первый опыт проводили в октябре месяце 2000 года, а второй – феврале 2001 года. Одновременно с аллергическим исследованием у животных брали кровь для серологического анализа и пробы фекалий для копрологического исследования. Всего было обследовано разными методами 200 коров старше
4-х лет и 40 нетелей.
Результаты аллергического, серологического и копрологического исследований на фасциолез представлены в табл. 21 и рис. 9.
Из таблицы видно, что из 200 коров в октябре месяце реагировали на фасциоловый аллерген 30 (15 %), а в реакции связывания комплемента (РСК) с фасциоловым антигеном выявлены позитивные показания у 36 (18 %). При исследовании проб фекалий методом последовательных смывов яйца фасциол
не были обнаружены ни в одной пробе. С помощью усовершенствованного метода Котельникова-Вареничева у 4 (2 %) животных были выявлены яйца фасциол.
При исследовании 40 нетелей в этот же период на фасциоловый аллерген реагировали положительно 7 (17,5 %). В РСК позитивные показания отметили у 8 (20 %) животных. При копроскопии методом последовательных смывов яйца не установили ни в одной пробе. При исследовании усовершенствованным методом Котельникова-Вареничева яйца фасциол обнаруживали в 2-х пробах (5%).
В феврале месяце из исследованных 200 коров реагировали положительно на фасциоловый аллерген 20 (10 %). В РСК с фасциоловым антигеном позитивные показания установили у 32-х (16 %) животных. При исследовании проб фекалий от этих животных методом
