криогенному воздействию, то есть разрушаются при замораживании.
Для определения качества замороженно-оттаянной спермы быков производителей в настоящее время используют ряд показателей. Подвижность спермиев определяется по 10-бальной системе, когда 1 бал соответствует 10% спермиев, имеющих прямолинейно-поступательное движение. Кроме этого, как отмечает В.К. Милованов, сперму можно оценивать по показателям выживаемости и абсолютной живучести, когда сперма после оттаивания должна иметь выживаемость при температуре 38°С не менее 5 часов и абсолютную живучесть – 14 часов [189].
В неблагоприятных условиях повреждение акросом и изменение ультраструктуры спермиев происходит раньше, чем снижение их подвижности, что может служить ориентиром в определении и прогнозировании оплодотворяющей способности спермы. Предложенный в этой связи Соколовской И.И. тест определения биологической полноценности спермы по состоянию акросом не нашел пока еще широкого применения в практике, хотя многие исследователи констатируют его высокую положительную корреляцию с оплодотворяемостью коров. В результате сложности осуществления не нашли применения и другие методы диагностики. Согласно «Инструкции по искусственному осеменению коров и телок» (1999), в Республике Беларусь качество замороженно-оттаянной спермы быковпроизводителей определяется по двум показателям: подвижности и выживаемости.
В этой связи в практике использования замороженной спермы для осеменения коров чрезвычайно важным является вопрос недопущения снижения уже имеющейся ее оплодотворяющей способности. Для этого необходимы и ее проверка на качественное состояние по вышеуказанным параметрам и строгое соблюдение режимов оттаивания и использования.
Если на спермопродукцию быков-производителей природно-климатический фактор из-за лучших условий кормления и содержания сказывается в меньшей степени, то коровы ему подвержены значительно сильнее. Достаточно отметить, что оплодотворяемость коров и телок в летний период на 10-20 % выше, чем в зимний, а по отдельным месяцам может достигать разницы до 40 %. Отдельные же случаи снижения оплодотворяемости в летний период, если это не связано с экстремальными погодными условиями, в основном обусловлены технологическими нарушениями искусственного осеменения и никакого отношения к сезонности не имеют. В странах или хозяйствах с высокоразвитым молочным скотоводством явление сезонного колебания оплодотворяемости менее ощутимо вследствие компенсирующего влияния кормления и содержания, но и там имеются проблемы многократных безрезультатных осеменений животных.
С целью повышения качества спермодоз, получаемых на племпредприятиях от быков-производителей, нами предлагается использовать акросомный тест, согласно которого повышение оплодотворяющей способности спермы проводится в рамках существующей технологии замораживания спермодоз. Для этого на племпредприятиях Республики Беларусь содержание и кормление быковпроизводителей, взятие от них эякулятов, оценка полученной спермы, ее разбавление и замораживание осуществляются согласно установленным правилам и инструкциям. Дополнительно предлагается осуществлять контроль за состоянием акросом спермиев и на основе полученных результатов корректировать общую концентрацию спермиев в дозе от 10 до 25 млн. с расчетом получения спермодоз с содержанием качественных (без нарушения акросом) спермиев не менее 9 млн. в дозе (табл. 39).
Таблица 39 – Концентрация спермиев с прямолинейнопоступательным движением (ППД) в дозе в зависимости от количества акросомных нарушений
| Количество спермиев с нарушениями ак- росом, % | Концентрация спермиев с ППД в дозе, млн. |
|---|---|
| 0-10 | 10 |
| 11-18 | 11 |
| 19-25 | 12 |
| 26-30 | 13 |
| 31-35 | 14 |
| 36-40 | 15 |
| 41-44 | 16 |
| 45-47 | 17 |
| 48-50 | 18 |
| 51-53 | 19 |
| 54-55 | 20 |
| 56-57 | 21 |
| 58-59 | 22 |
| 60-61 | 23 |
| 62-63 | 24 |
| 64-65 | 25 |
Определение наличия акросомных нарушений проводится при помощи микроскопа с темнопольным конденсором.∗
Чтобы получить отчетливое, не расплывчатое свечение контуров спермиев и акросом, следует отцентрировать луч света винтами конденсора прямо в линзу объектива. Затем наносят на предметное стекло каплю спермы, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом в светлом поле при опущенном конденсоре и прикрытой ирисовой диафрагме.
∗ При отсутствии данного микроскопа возможно применение микроскопа серии « Биолам» или другого с аналогичным конденсором. Для этого в откидную кольцевую диафрагму конденсора вставляется круглая пластина из прозрачного органического стекла, затемненного в центре светонепроницаемым круглым предметом диаметром 18,5 мм (наклеивается кружок копировальной бумаги).
