ГНУ ВИЖ Россельхозакадемии - ОАО “ГЦВ” у y
Счетная камера изготовлена из плотного оптического стекла, откалибрована, поставляется в комплекте с прибором.
И бин И
$ ~ tomes .
Сборка камеры
Схема и внешний вид счетной камеры:
1 - нижняя часть, изготовленная из плоского оптического стекла (покровное стекло);
2 - верхняя часть (камера) специальной формы (в сборе с нижней частью создает в центре камеры область размером 35х6 мм и глубиной 200 мкм для заполнения образцом спермы);
3 - сквозное цилиндрическое отверстие для удобного и точного заполнения камеры образцом спермы
Сборку камеры проводят непосредственно перед началом работы, держа за боковые поверхности. В кюветное отделение вставляют камеру в собранном виде покровным стеклом вниз. Пазы на покровном стекле и камере должны совпадать. Отверстия для заполнение камеры должны выступать из кюветного отделения. Работа со спермоанализатором начинается по достижении термостоликом 38°С.
= a .
5 rs = * > +
4 2.
* en Г e
4
„= ы | =|4
И - \«
®г $ 1 -le
= *
>. *
- { з
. ef *
№. в .
— : os r и /
Качественный анализ Фотоанализ
Ya
SeВИЖ - ОАО “ГЦВ”eee
Следует хорошо перемешать образец аккуратным покачиванием, отобрать пробу - 50 мкл (без воздушных пузырей). При удачном заполнении камеры раздастся характерный звук. Через 2,5 мин в диалоговом окне появится результат проведенного измерения, одновременно автоматически производится новая запись с результатами в реестре проведенных исследований.
Фото- и видеодокументирование исследуемых образцов производится после измерения в анализаторе и снимается в цифровом микроскопе с использованием камеры глубиной 20 мкм.
® Пробоподготовка
Нативная сперма для подготовки образца разбавляется в 50 раз. Замороженную сперму следует оттаивать согласно общепринятой методике, довести объем до 1 мл 2,9%-ным цитратом натрия. Если результаты двух повторов резко отличаются друг от друга, то необходимо повторить исследования.
Акроскопический метод оценки качества
спермы
Метод основан на эффекте отраженного света, позволяющего отчетливо различать контуры неповрежденных и поврежденных сперматозоидов. Для данного исследования используют микроскопы МБИ-10, МБИ-6, МИК-1 и другие, укомплектованные темнопольным конденсором - ОИ-10. Для замедления движения сперматозоидов испо;: тъъзуется желатин (10%), применяемый в медицинской практике.
Метод применяется для определения полноценности сперматозоидов и оценки состояния их акросом, сохраняющих ферменты акрозин и гиалуронидазу, которые активно участвуют в процессе оплодотворения.
Г, а
в темном поле:
i cz a - полноценныи©
Wo}af oe сперматозоидТЕс сохранен-
ной акросомой;
- о - сперматозоид
г” и = 4 акросомой;с разрушенной
5109 сперматозоидов после
у‘4 6 id 0 ‚Se„ }_узнотинацпотери электр и ческогоя
HY заряда
- ei ,>)4 aesiaОАО “ГЦВ” - ВИЖ
PN
/ \&
\
Иммунобиологический метод оценки качества спермы (РИМЖ)
Данный метод оценки спермы проводится по реакции иммобилизации сперматозоидов в аутосыворотке крови.
Реакция основана на зависимом от комплемента взаимодействии вне организма циркулирующих в крови аутоантител к сперматозоидам с их поверхностными антигенами. Титр считается положительным, если произошло оседание сперматозоидов на дно лунки. Последовательность постановки* реакции представлена на фото.
И ОИ Pe =
C2e, 4 в \ р
Необходимые составляющие для постановки РИМЖ (общий вид)
ГА] р rs ?' иЕв = г
|a | Сен—\
* у т
АиБнативная сыворотка крови быка, титруется с 1%-ным раствором NaCl в титраторе;
В - сперма исследуемого быка должна быть разбавлена до концентрации 300 млн мл 1%-ным раствором NaCl;
Г - комплемент - нативная сыворотка морской свинки, применяется в разбавлении 1:9 1%-ным раствором NaCl.
В каждой лунке титратора должно быть 0,1 мл титрованной сыворотки крови, 0,1 мл разбавленного комплемента, 0,1 мл спермы, доведенной до концентрации 300 млнв1 мл
