форма и смесь интенсивно встряхивают в течение 2 минут. После отстоя в течение 10—15 минут и разделения фаз нижний слой хлороформа сливают в химический стакан и упари‘HJalot в термостате при температуре 70ro С.
методом тонкослойй ной 2.3. Очистка прогестерона a" xpomarorp
o I ацетатаiaгмime (1:1)илов енрастворяют в 20 мклпереносме с яти этилдля с метаноло: i : ; олени на пластины «Silufol UV 254». Одновременно на края пластины наносится для контроля 10 мкг ie ae del ‘ного раствора коммерческого препарата прогестерона. aan слойную р хроматографию проводят с О The достижe растворителеннии фронта раствор® безобе И "ПосссЕ‘де лацетатомэтого полосумо ашсо: стандартамипластинку. 110 Fochвыни-про-7 TecTepoмаюеекtaй КИСЛ} ЖИВЕЕк‘HB} al 10% -нымроявлениерастворомпластины‘пятенфосфорно-молиб-CTAaHLapTolв HULAсушиль-TOB ootт mad} в течение. 7 e!5 минут приK температуре 80°C. Foon силикагеля на уровне проявленных пятен стандартов on ° | ливаютee в мл отдельные‘метанолапробиркидва pasaи a|по минутт: us Нойпри комнат роде мл. В тика REE элюциями пробирки цент-: темпера ур при 3000 об/мин. в течение 5 минут. Затем метано/ива при температуре 70°Свсушильномшкафу. Пробыpoo! хранят| в закрытом3 виде при температуре 4°Cо до пророведения газохром,азохроматографического анализа.
2.4. Количественное определение прогестерона в пробахбах сыворотки крови кобыл
Количественное определение содержания прогестерона в пробах проводится методом газожидкостной хроматографии. Сухой осадок метанольного элюата растворяют в 20 мкл хлороформа,<: ирование5 мкл этогопроводитсяраствора т хроная,(азот) —35 мл/мин.,аа воздухтина — 400OV-1: при мл/мин,потокгаза-носителя водородyм д —x: 40250° мл/мин;С, колонкитемпература инъектора— 240°С, детектора— — 225°С. “

‘
= и \
При данных параметрах время удержания прогестерона составляет около 20 минут. Для более точного контроля используется внутреннийГм ii стандартг 1]прогестерона. Количество прогестерона в пробе определяют по калиброрввочнойсывороткекривой.крови,Кобылы,определенное, у которыхпосодержаниеданнойр методикепрогестеронав интервале с 16 по 23 день после случки, превышает уровень 6 нг/мл, считаются жеребыми, а Te, у которых концентрация прогестеронаЛ, в крови ниже 6 нт/мл.> —холостыми.ad
- ДИАГНОСТИКА ЖЕРЕБОСТИ КОБЫЛ УЛЬТРАЗВУКОВЫМ МЕТОДОМ . 3.1. Принцип метода и ‘наиболее эффективные сроки диагностики
Принцип метода основан на использовании эффекта Допплера ультразвуковой волны. В качестве регистрируемого диагпностического параметра используется пульсация ореднематочных артерий. Наиболее эффективна ультразвуковая диагностика в период 60—70ПИ д ней }послеne случки.n 3.2. Аппаратура, применяемая для ультразвуковой диагностики жеребости
Для диагностики жеребости ультразвуковым методом используются аппараты двух основных типов, предназначенные для исследования трансабдоминальным путем или ректальHPNРегистрация результатов может осуществляться либо аускультацией —по прослушиванию маточных артерий, либо визуально. При визуальном контроле проекцию на экран получают в виде эхограммы (ультразвукограммы), или в виде изображения половых путей кобылы. приВпомощиданныхприборарекомендацияхфирмы «Medata»рассматривается‘(производствадиагностикаФранции), снабжасмого при определении жеребости ректальным зондом. Диагиоз na жеребость ставится по аускультации тока крови в маточных артериях 3.3. Проведение, диагностики, ‘ультразвуковым методом
Для проведения диагностики ультразвуковойВ зонд. вводится ректально так, чтобы датчик оказался над рогами матки. Как правило, глубина введения зонда в прямую кишку составляет 35—38 см. Перед введением поверхность зонда обраИ
|
| батывается специальным ма гичным ему). Применение м ность контакта датчика со ст скольжение зонда в процес | 4 пользовать в масле антисепт возможному инфицированию нении масла, не содержащег дует перед каждым новым о дезинфицировать зонд спир йода. После введения зонда в п прослушиваются подвздошн дифференцировать шум ток среднематочных артерий. Дл артерий датчик зонда повор и влево, примерно, на угол в Для установления диагно маточной артерии датчик з перемещая его слегка в кран находят положение, обеспеч регистрирование пульсации риях. Положительный диагн в случае, когда отчетливо п в среднематочных артериях. тольконый. подвздошные артерии
Сдано в набор 8.01-86 г._ Об. ТипографияветеринарнойМосковскойакадеморде 109472, Москва, ул.
