Процесс подготовки инструментов к работе
• Начало работы
UJ H j
Дезинфекция рук перед работой
Дезинфекция подставки
Дезинфекция инструментов
Дезинфекция пакета с чехлами
Извлечение защитного чехла из пакета
Оттаивание спермы
Оттаивание спермы в открытых гранулах. Четвертым тампоном оператор обрабатывает пакет с пипетками (чехлами). Угол пакета надрезает стерильными ножницами или прорывает концом пипетки.
Выдвигает пипетку на 1/3 длины, соединяет ее со стерильным шприцом (или с полиэтиленовой ампулой) с помощью муфты.
Извлекает пипетку из пакета и кладет ее на подставку. Открытый угол пакета закрепляет канцелярской скрепкой.
Техник надевает защитные очки и перчатки, открывает сосуд Дьюара, быстро подтягивает к верхней трети горловины (не более 5 с) канистру с тубой и вскрывает ее. Извлекает стерильным, предварительно охлажденным в азоте, пинцетом (корнцангом) гранулу и переносит ее в подготовленную ампулу или флакон с раствором цитрата. Тубу с оставшимся семенем сразу закрывает и опускает в сосуд Дьюара в положение хранения. Закрывает сосуд крышкой. Эти манипуляции должны занимать не более 5 с.
Оттаивать гранулу необходимо при температуре +38°С в течение 8-10 с, осторожным вращательным движением перемещая ампулу со спермой в водяной бане до тонкого ледяного стерженька. После оттаивания ампулу со спермой насухо вытирают стерильной салфеткой, ставят в штатив из теплоизолирующего материала и определяют качество спермы. Категорически запрещается оттаивать в одной ампуле более одной гранулы, а также оставлять оттаянную сперму в водяной бане. При заправке пипетки поршень шприца, соединенного с ней, следует отвести на 1/3, создав тем самым достаточный запас воздуха для выталкивания всей спермы из пипетки. Только после этого набирают сперму, не допуская ее попадания в шприц. Для проверки герметичности инструмент располагают вертикально: столбик семени должен остаться на месте.
Для осеменения коров спермой, замороженной в открытых гранулах, используют стерильные одноразовые полистироловые пипетки, соединенные полиэтиленовым переходником или эластичной трубкой длиной 30-50 мм со шприцом на 2-5 мл.
Соединение полистироловой пипетки со шприцом
Оттаивание спермы в облицованных гранулах объемом 0,25-0,33 мл осуществляют без разбавления в 2,9%-ном растворе цитрата натрия. Техник надевает защитные очки и перчатки, открывает сосуд Дьюара, быстро подтягивает к верхней трети горловины (не более 5 с) канистру с тубой и вскрывает ее. Извлекает стерильным, предварительно охлажденным в азоте пинцетом (корнцангом) облицованную гранулу и быстро переносит ее пинцетом с широкими браншами в водяную баню температурой 38-40°С, оттаивает до появления тонкого стерженька льда (для этого желательно использовать микротермостаты МТ-1,2 или термостат биологический ТБ-010). Через 8-10 с гранулу извлекает, насухо протирает стерильной салфеткой, проверяет на герметичность путем легкого сжатия между двумя пальцами: герметичной считается спермодоза, у которой не обнаружена утечка содержимого. После этого оценивает качество спермы на подвижность.
Оттаивание спермы в соломинках, укупоренных стеклянными шариками. Техник надевает защитные очки, перчатки, подтягивает к верхней трети горловины сосуда Дьюара (не более 5 с) канистру с тубой, быстро извлекает стерильным, предварительно охлажденным в азоте, пинцетом (корнцангом) соломинку, встряхивает ее 2-3 с и погружает в воду термостата для оттаивания. Встряхивание способствует испарению жидкого азота и предупреждает возможное растрескивание соломинок и выдавливание укупорочных шариков. Канистру с семенем опускает в азот. Сосуд закрывает крышкой.
Оттаивать соломинку необходимо в течение 10 с при температуре 38°С, перемещая ее круговыми движениями в воде.
Затем соломинку извлекают из термостата и, тщательно осушая стерильной марлевой или бумажной салфеткой, проверяют запись клички и номера быка на соломинке, энергично встряхивают, чтобы воздушный пузырек переместился в конец соломинки. Поршень осеменительного шприца оттягивают примерно на 90 мм, в трубку до упора вставляют соломинку, чтобы кончик ее с воздушным пузырьком был снаружи. Конец соломинки обрезают стерильными ножницами строго перпендикулярно через воздушный пузырек на расстоянии около 7 мм от конца соломинки. Ножницы должны быть острыми и использоваться только для обрезания соломинок. Тупые ножницы деформируют соломинку, при этом может нарушиться плотность
