замороженной спермы. Из-за трудностей, возникающих при внедрении оболочки для осеменения через шейку матки, помимо сокращения жизнеспособности сперматозоидов в результате замораживания и размораживания, необходимо увеличение числа сперматозоидов на дозу при использовании замороженной спермы по сравнению со свежей спермой (200 и 100 миллионов сперматозоидов соответственно).
Место, где проводится осеменение, должно быть чистым и свободным от воздушных потоков, температура должна составлять 2025ºC. Самки заключаются как можно быстрее в загоны или коридоры для скота, в стоячем положении, чтобы избежать ненужного стресса. Коридоры могут быть построены на полу сарая или приподняты над полом на более удобную высоту для осеменатора. Метод, позволяющий обеспечить наиболее удобное расположение коз для цервикального осеменения, называется методом «над перилами». Самки представляются для цервикального осеменения ассистентом, стоящим в коридоре и поднимающим задние конечности животного над перилами.
Вульву очищают одноразовым бумажным полотенцем, и небольшое количество вазелина наносится на влагалищное зеркало для облегчения введения. В то время как одна рука держит хвост животного, другая медленно вводит влагалищное зеркало в спинном направлении (животного). После введения внутрь на несколько сантиметров его необходимо направить горизонтально в нижнюю часть влагалища. Шейка матки может быть обнаружена посредством мягкого манипулирования влагалищным зеркалом в сторону или вниз. Если присутствует обильная слизь, то ее можно абсорбировать и удалить с помощью пластиковой пипетки или шприца. Когда это сделано, помощник передает сперму. Пипетка для осеменения Шейка матки Яичник Влагалищное Матка зеркало яйцевод
Рисунок А. Цервикальное искусственное осеменение.
После введения спермы желательно, чтобы козы оставались в положении осеменения в течение 2 или 3 минут, а затем были помещены в загон рядом с самцами на несколько часов. В случае молодых самок процесс введения влагалищного зеркала является очень травмирующим. Поэтому предпочтительнее осуществлять искусственное осеменение только путем введения пипетки для осеменения в вульву и выброса спермы в нижнюю часть влагалища.
Лапароскопическое искусственное осеменение
Эндоскопия выполняется путем введения оптической системы в организм животного через брюшной прокол; гибкий световод дает свет, позволяя рассматривать внутренние органы не прибегая к хирургии.
Когда проводится искусственное осеменение, данный метод известен как лапароскопия, так как он позволяет наблюдать внутренние половые органы через брюшную стенку. Небольшие отверстия делаются троакаром рядом с молочной железой, и доза спермы вводится через них. Осеменение состоит из введения половины дозы спермы в каждый рог матки с помощью пипетки с тонкой иглой на одном конце (рис. B).
Шприц для осеменения
Зажим Брюшная стенка
Эндоскоп
Рог матки
Яичник
Рисунок B. Лапароскопическое искусственное осеменение.
Данный метод осеменения посредством лапароскопии широко используется в отношении овец из-за низкого уровня беременности, получаемой при использовании замороженной спермы посредством цервикального осеменения (20-35%). Это связано с трудностями переноса шейки матки овцы с помощью пипетки для осеменения.
У коз он используется для двойной цели: для увеличения частоты наступления беременности, чем получаемой с помощью цервикального искусственного осеменения, а также для снижения количества сперматозоидов в каждой дозе для осеменения.
| СПЕРМА | ПОСРЕДСТВОМ | ДОЗА | ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ | БЕРЕМЕННОСТЬ |
|---|---|---|---|---|
| СВЕЖАЯ | Цервикальный метод | 100 мл н | После выявления эструса | 60-70% |
| ЗАМОРОЖЕННАЯ | Цервикальный метод | 200 мл н | После выявления эструса Спланированное искусственное осеменение* | 50% (±10%) |
| Лапароскопический метод | 50 мл н | После выявления эструса Спланированное искусственное осеменение** | 55% (±10%) |
- через 45 часов после удаления губок с прогестагенами
** через 55 часов после удаления губок с прогестагенами
Хранение спермы в замороженном состоянии
Процедура замораживания спермы коз выглядит следующим образом:
a) Подготовка разбавителя спермы
Снятое порошкообразное коровье молоко разводят в дистиллированной воде (10%), например берут 50 мл дистиллированной воды на 5 г снятого молока. Разбавитель выдерживают при 92-94ºC на водяной бане в течение 10 минут. После этого его охлаждают до 36ºC и добавляют 1% глюкозы (например 0,5 г глюкозы на 50 мл разбавителя), пенициллин и стрептомицин (1000 единиц и 1 мг на 1 мл разбавителя соответственно). Получившийся объем делят на две равные части: РАЗБАВИТЕЛЬ А без добавления глицерина и РАЗБАВИТЕЛЬ B с добавлением 12% глицерина. Так, например, на 25 мл разбавителя B добавляют 3 мл глицерина. Глицерин подогревают и добавляют в разбавитель в горячем виде для получения хорошей однородности массы. Разбавитель А хранят при лабораторной температуре, а разбавитель B помещают в холодильник при 5ºC (Очень важно: температура в холодильнике не должна опускаться ниже 5ºC).
Если работы проводятся в жарких условиях, то удобно помещать раствор А в холодильник, чтобы избежать его превращения в кислоту, а затем подогревать его непосредственно перед использованием. рНфактор разбавителя должен быть в пределах между 6,8 и 7,2.
b) Сбор и оценка спермы
Сперму, собранную в искусственную вагину, держат на водяной бане при температуре 36ºC для проведения ее оценки. Каплю спермы на предметном стекле помещают на теплую поверхность на микроскопе и
