А.Я. Сапунов (1995) показал реальную возможность и целесообразность использования серологических методов исследования (РИФ, РЭМА и др.) для изучения в свиноводческих хозяйствах эпизоотической ситуации по паразитоценозам, выявления и последующего удаления из стада не пригодных для воспроизводства инвазированных животных.
Г.А. Козлова (1999) разработала тест-систему для диагностики трихинеллеза свиней иммуноферментной реакцией с антигеном, очищенным моноклональными антителами. Динамика иммунного ответа у свиней, зараженных личинками Т. pseudospiralis при применении тест-системы испытуемым и контрольным антигенами, характеризовалась появлением специфических антител на 25 – 38 и их максимальным уровнем на 85 – 100 дни после заражения.
К настоящему времени накопилось большое количество фактического экспериментального материала, свидетельствующего об эффективности иммунобиологических диагностических методов. По данным Н.В. Демидова (1965), в некоторых странах (Югославия, Япония, Франция, страны Латинской Америки и др.) антигены из фациол уже применяются в практике медицины и ветеринарии для диагностики фасциолеза.
Наличие специфических антител в крови овец, зараженных фасциолезом, впервые было доказано одновременно Вейнтбергом и Пикканаро (1909). Впервые опыты по иммунобиологической диагностике фасциолеза провел в 1921 году Сервенти, используя в качестве антигена алкогольный экстракт из половозрелых фасциол (по Демидову, 1965).
На современном этапе изучения фасциолеза многими отечественными и зарубежными исследователями Л.Д. Мартыненко, А.И. Понамарева, А.М. Сухоруков, (1981); I. Frada de Azevedo (1965), P. Ambroise – Thomas, Kien Truong Thai et al (1967), G. Kagan Irving (1974), J. Kadhmin, al-Attar M (1974), A. Locatelli, T. Simonic (1974), K. Gladusz- Pawiak (1977), E. J. Ruitenberg, A. Capron, D. Bout, F. Knapen (1977), D. Berden, N. Hammet (1978), G. AR.
32
Marrero, N. Santiago, G. V. Hillуer (1988), C. Arriada de Morilla, R. Paniagua, A. A. Ruiz - Navarrete (1989), F. Ibarra, N. Montenego, Y. Vera et al (1998), рекомендованы серологические методы диагностики этой инвазии.
М.А. Бабянскас (1962) установил, что у крупного рогатого скота при фасциолезе в среднем диагностическая точность копрологических показателей равна 37,5 %, аллергических – 74,5 %, а серологических – 87,5 %. На основании проведенных опытов можно утверждать, что для более ранней и точной прижизненной массовой диагностики фасциолеза животных в производственных условиях не следует пренебрегать иммунобиологическими реакциями, которые являются в производственных условиях менее трудоемкими, более ранними и точными, чем копрологические и не требуют лабораторного оборудования.
Авторы J. Fraga de Azevedo, Coe-Iho Rombert Palmira (1965), J. Crestian (1980) утверждают, что наиболее приемлемой реакцией для серологической диагностики фасциолеза является реакция иммунофлуоресценции. Опыты показали, что у 73 % обследованных фасциолезных животных реакция была положительной и только у 10 % контрольной группы животных отмечено слабое флуоресцирование.
Авторы J. Coudert, Garin J. P., P. Ambroise – Thomas, Kien Truong Thai, J.Despaignis, M.A. Pothier (1967) указывают, что реакция иммунофлюоресценции оказалась чувствительней, чем реакция электрофореза, где в качестве антигена использовали микротомный срез свежемороженой фасциолы, после высушивания которых фиксировали и обезжиривали ацетоном.
К. Чуперлович (1971) изучал динамику комплементсвязывающих антител у кроликов, экспериментально зараженных F. hepatica. В качестве антигена использовал обезжиренный экстракт половозрелых фасциол, собранных из печени овец через 5 месяцев после экспериментального заражения. Установлено, что иммунологическая реактивность кроликов к заражению трематодой сопровождалась интенсивным образованием
комплементсвязывающих антител. По мнению автора, реакция очень удобна для исследования.
J. Kadhim, al-Attar M (1974) сообщают, что метод иммунодиффузии в геле приемлем для диагностики фасциолеза овец.
Булajuh Mиркo, Лалuh Рaдoмир, Moвcеjan Muoдpaг, Чуперлович Коста (1977) изучили сравнительную эффективность иммунобиологических реакций, предложенных для диагностики фасциолеза. Ими было установлено, что секреторно-экскреторный антиген из фасциол является наиболее удобным для иммунодиагностики фасциолеза у людей и животных. Реакция связывания комплемента и двойной диффузии в агаровом геле являются чувствительными реакциями. Реакция непрямой флуоресценции антител является очень чувствительной и удобной в случаях, когда в качестве антигенов используют срезы половозрелых фасциол или их мирацидии.
J. Ecket et al (1977) при исследовании крупного рогатого скота на фасциолез методом непрямой иммунофлуоресценции в модификации Хесса (1974) установили, что у копрологически положительных животных титры флюоресцирующих антител колебались от 1:20 до 1:640, у копрологически отрицательных не превышали 1:10.
Изучена пригодность реакции агглютинациии с латексом для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота (K. Gladysz – Pawiak, 1977). Антиген получали гомогенизацией половозрелых фасциол, с последующим многократным замораживанием и оттаиванием, диализацией, центрифугированием и сбором супернатанта. По мнению авторов, этот метод позволяет выявить до 81,7 % инвазированных животных. При интенсивной инвазии и хроническом течении результат был более высоким 90,5 – 91,8 %, а при низкой интенсивности и ранней инвазии – 68,5 – 76,8 %.
Немецкими учеными M. Grelck, F. Horchner (1977) проведена сравнительная оценка реакции иммунофлуоресценции и иммунопероксидазного метода при серологической диагностике фасциолеза крупного рогатого скота. В качестве антигена использовали замороженные
34
