срезы фасциол. При испытании сывороток крови животных из эндемических очагов фасциолеза иммунофлуоресцентным методом антитела выявлены у тех животных, у которых были обнаружены фасциолы, но положительная реакция также была получена с рядом сывороток от животных, у которых отсутствовали фасциолы. При испытании тех же сывороток иммунопероксидазным методом положительные результаты были получены в 93 % случаев.
Реакция с сыворотками животных, не пораженных фасциолами, была отрицательная. Таким образом, авторы рекомендуют использовать для диагностики фасциолеза крупного рогатого скота иммунопероксидазный метод.
Авторы B. Pesson, N. Leger, G. Madulo – Leblond (1979) рекомендуют в целях диагностики фасциолеза использовать комбинацию двух иммунологических реакций – непрямой гемагглютинации, обладающей высокой чувствительностью и иммуноэлектрофореза (РИЭФ), обладающего высокой специфичностью.
E. J. Ruitenberg, A. Capron, D. Bout, F. Knapen (1977) утверждают, что «ELISA» считается ценным серологическим тестом. Специфичность может быть повышена путем использования очищенного специфического антигена. Этот тест имеет особенную ценность в разграничении между ранними формами заболевания и поздними.
D. Burgen, N. Hammet (1978) считают, что РЭМА позволяет диагностировать антитела против фасциол уже начиная с пятой недели после заражения.
B. Pesson, N. Leger, G. Madulo – Leblond (1979) обращают внимание на дальнейшее развитие и широкое внедрение в практику количественной иммуноэнзимологии, в частности, энзиммеченного иммуносорбционного метода (ELIZA), обладающего высокой специфичностью и чувствительностью.
Швейцарскими учеными K. Pfister, G. Keller, B. Baisiger (1986) было доказано, что метод ELIZA обладает высокой чувствительностью на ранней и поздней (8 и 20 нед.) стадиях развития паразита у экспериментально зараженных Fasciola hepatica животных. В неблагополучных 8 фермах выявлено 64 – 84 % положительно реагирующих животных, причем в период пастбищного сезона (май – октябрь) наблюдали высокие показатели ELIZA (200 – 400). Они делают заключение, что метод ELIZA можно применять для ранней диагностики фасциолеза и эпизоотологического обследования крупного рогатого скота в стаде.
I.J. Sinelair, D.A. Wassall (1986) проводили оценку растворимого экстракта взрослых фасциол и антигена, приготовленного из культуральной жидкости, в которой гельминты находились в течение 24 часов для постановки ELIZA – теста. С помощью антигена, приготовленного из культуральной жидкости, обнаружили специфические антитела к Fasciola hepatica в 91 сыворотке крови, а при использовании в качестве антигена растворимого экстракта взрослых фасциол положительные результаты получили в 33 случаях. Они отметают о возможности повышения чувствительности метода ELIZA в результате использования культурального антигена, содержащего продукты метаболизма Fasciola hepatica.
C. A. R. Marrero, N. Santiago, C.V. Hillyer (1988) также рекомендуют в целях диагностики фасциолеза иммуноферментный метод. Антиген готовили из промытых фасциол, инкубированных в забуференном физиологическом растворе при температуре 37о С в течение 3 часов. Культуральную среду центрифугировали, супернатант использовали свежим. Фракция антигена, обогащенная высокомолекулярными компонентами была реактивной ДОТ – иммуноферментном тесте. Иммуноферментный блот – методикой выявился острый и хронический фасциолез.
Зарубежными авторами C. Arriaga de Morilla, R. Paniagua, A.A. Ruiz – Navarrete (1989) было проведено сравнение точечного иммуно-ферментного
теста, реакции пассивной гемагглютицации и тонкослойного иммунологического теста для диагностики спонтанного и экспериментального фасциолеза у 31 овцы. Диагноз на фасциолез был подтвержден обнаружением взрослых фасциол в печени и яиц гельминта в фекалиях овец. Контролем служили 30 овец из благополучных по фасциолезу хозяйств, результаты копрологического исследования которых на наличие яиц гельминтов дали отрицательный результат. В качестве антигена при постановке перечисленных выше серологических тестов использовали метаболический (экскреторно-секреторный) антиген Fasciola hepatica. Наиболее чувствительным методом серологической диагностики оказался точечный иммуноферментный тест. Титры антител при этом были в 1000 – 2000 раз выше, чем титры антител, определяемые двумя другими серологическими реакциями.
Зарубежными учеными F. Ibarra, N. Montenego, Y. Vera, C. Boulard и другими (1998) проведено сравнение чувствительности и специфичности вариантов: ДОТ – ELIZA, непрямого ELIZA и ELIZA в сочетании с методом диффузии в геле (ДГ – ELIZA) для серологического обследования крупного рогатого скота на наличие антител к фасциолам в тропических условиях Мексики. Чувствительность непрямого варианта ELIZA была в пределах 96,5%, специфичность – 98,8 %, ДГ – ELIZA – 97,5 и 80 %, а ДОТ – ELIZA – 93,1 и 95,4 % соответственно. Делается вывод, что все испытанные ELIZA варианты являются высокочувствительными, специфичными и могут быть рекомендованы для серологического обследования крупного рогатого скота на наличие Fasciola hepatica.
Т.С. Золоткова, М.Д. Новак (2000) разработали антиген и изучили эффективность РНГА при фасциолезе. На основании широкого сероэпизоотологического мониторинга в комплексе с послеубойными исследованиями в хозяйствах Костромской области при фасциолезе крупного рогатого скота подтвердили высокую диагностическую ценность и
