За период наблюдения произошло снижение количества средних эпителиальных клеток и повышение нейтрофилов с 22,50 до 42,0%. Повысилось (Р<0,05) относительное содержание разных клеток. На протяжении опыта количество лимфоцитов в секрете долей вымени оставалось на одном уровне. Эти изменения были недостоверны (Р>0,05).
0,35
0,3
0,25 малые
средние
0,2
большие
нейтрофилы
0,15
лимфоциты
моноциты
0,1
разные
0,05 фагоциты
0
1 день 3 день 5 день 7 день 10 день
Рис. 26. Динамика клеточного состава секрета из долей вымени у здоровых коров в 1-й, 3-й, 5-й, 7-й и 10-й дни лактации
Малые эпителиальные клетки – овальной, округлой формы имели величину от 6,0 до 15,0 мкм. Контуры этих клеток неровные, угловатые, а ядра имели неправильную округлую форму, занимали значительную часть клеток. Лимфоциты – малые, средние и большие – были величиной от 5,0 до 20,0 мкм округлой или овальной формы, с четко очерченными краями, располагались отдельно, мелкими или средними группами (рис. 27) [176].
3.2. Морфология молочной железы у коров при субклиническом мастите и клеточный состав молока в период лактации
Изучение морфологии молочной железы у лактирующих коров при субклиническом мастите и клеточного состава молока в период лактации показало, что если макроскопическая структура молочной железы находилась в пределах нормы, то микроскопическая структура ее претерпевала значительные клеточные и субклеточные изменения. Развитие патологии в молочной железе у коров при субклиническом мастите сопровождалось обильным выпотом в альвеолы серозно-катарального экссудата. В воспалительно-клеточном инфильтрате появлялись немногочисленные полинуклеарные (сегментоядерные), а также лимфоидные, макрофагальные, плазматические и другие клетки. Немаловажным фактом является увеличение количества лимфоцитов и лейкоци-
тов в воспалительном инфильтрате, что указывало на начало развития патологического процесса в ткани молочной железы. Сходные данные приводят Л.И. Кундрюкова [118], Л. Мосьяков [156], С.Б. Оразалиева [170; 171], А.А. Соломатин [258]. Иные морфологические отличия в молочной железе при воспалении наблюдали И.С. Дудко с соавт. [59]. Особенностями мастита у коров является повышенное количество расширенных лимфатических сосудов в молочной железе; очаговый гиалиноз коллагеновых волокон междольковой, межальвеолярной и периваскулярной тканей; наличие значительного количества кистозных полостей железистых структур; включения жира и гемосидерина в цитоплазме тканевых клеток; вакуолизация цитоплазмы гистиоцитов.
Материалом для исследований служили образцы молочных желез от лактирующих коров, убитых на убойных пунктах по производственной необходимости. Взятие материала производилось в течение первого часа после убоя животного. Образцы ткани обрабатывали общепринятыми методами для электронномикроскопического исследования. После промывки в фосфатном буфере (не менее 15 минут) фрагменты ткани дополнительно постфиксировали в 1,0% растворе OsO4 на фосфатном буфере в течение 1,5 часов. Далее все образцы ткани обезвоживались в спиртах восходящей концентрации, обрабатывались в ацетоне и были заключены в эпоксидную смолу на основе Эпон-812. Заливка осуществлялась плоскопараллельным методом. Блоки с заключенными в них фрагментами тканей молочной железы далее затачивали на фрезе Leica или обычным лезвием под стереолупой. С полученных блоков изготавливали полутонкие срезы, которые окрашивали толуидиновым синим или азуром II – основным фуксином и изучали в световом микроскопе для прицельной заточки пирамиды перед приготовлением ультратонких срезов. Ультратонкие срезы толщиной 50 нм изготавливали на ультрамикротоме Ultracut-E (Leica, Германия) с использованием алмазного ножа Diamont (Швейцария), контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца и просматривали в трансмиссионном электронном микроскопе Jem 1011 (Jeol, Япония).
