новными свойствами определяют па колонке высотой 15 см, буферный раствор используют с РН 5,28, скорость вышевытекания10 смэлюатартутногоравнастолба,25—30температурамл в час, 50°давление С. Коли-не чество образца в два раза меньше, чем при работе на больших колопках. Техника внесения та же. При гидролизе белков часть аминокиелот и амидов разрушается, а их азот переходит в форму аммиака, который выделяется вместе с осповпыми кислотами и дает с ипигидрином окравишавие. Осповные аминокислоты эиопруются в следующем порялкс: лизии, гистидин, аргилии. Аммнак обычно выходит после гисти-
Приготовление реактивов
Нингидриновый реактив. Растворяют в 750 мл мстилнеллозольва 20 г нингидрина и 3 г гидриндантина, добавляют 250 мл буфервиого раствора c pil 5,5. Реактив быстро помешают в сосуд из темного стекла под Ниигидрин ипримспяют химически чистый. Продажный реактив перекристалаизовывают. Для этого 100 г вещества растворяют в 200 мл дистиллированной воды, нагрерают почти до кипения, прибавляют около 5 гактивированного угля и через 19 12 мипут фильтруют. При быстром охлаждении выпалают кристаллы. После промывки их высушивают и в таком виде используют Метилцеллозольв очишаюг добавлением к 500 мл 1-2 г сернокислого закисного экелеза и отгонкой носne 23-часового выпаривапия. Используют фракцию, выделяющуюся нри температуре 116—2126°С. Для приготовления гидриндантина растворяют 80 г нингидрина в двух литрах воды, иагретой до 90°, и добавляю 400 wt 5508 -пого naamnopa аоеорОЩОной kite лоты. Через 30 мипут смесь охлаждают до компатион температуры, выпадают кристаллы гидриндаитниа, которые отфильтровывают, промывают водой и сушат в эксикаторе пад фосфорпым ангидридом. Буферный раствор с pH 5,5 готовят, растворяя в двух литрах воды 1640 г безводного или 2720 г с тремя молекулами кристаллизационной воды (NaCoH 0» + 3H,0) уксуснокислого натрия. Приливают 500 мл ледяной yKсусной кислоты и до 5 л волы fn
$
‘Автоматизация хроматографии аминокиспот
на колонках
де, seeаи время появилось| миоРо устройств| по а, КОЛИполках© соу смоламияXpomarol рафированню аминокислот
4 -
о OR hasан
ее и а
oe ие i ae Sickinn Е И 3% а ie Di ee é
р
а: в о eae те в
Е от
О, ое О.
а Е -
а.
а Boas: и аЕ |
а aeее
Ue a ie Bie Be aa ae areas
в ие, = И
= _
а ИЕ
ны р Se ace a eae
И boо
о ейо
и. ae й al Ciel see
а а Pat а
ры: а о
и eh nae tee a ge = :
ee Pig ое dient :
oe Bie a: Re eo,
er ee та не
к ee не м uae ¥
анти Ры.и п:
м
о ее. ey
О ее В
- Рис. 5. Колонка для хроматографии аминокислот на бумаге
; 3 ое
р — eee
БАЙ Hoe $ в Е. Е. a
| : I Е
тежи ini ; Е. a ay eee
8 Se И ae Be se |
т а A ae
р | Fil da an he a A i
р. 4 Te week es ee 6 @ @ j
ва А. aS __ Е а: | Boviaode |
О ets НН oie а Ff
es и. и ae 4 о. Soe ete
р.О .a Wiens. : .B а:SUS estasа
_eee Tare т | eee
о 2 а | age а №
Е eee о 1 a Е ВЯ 3
Сидов ae |) ne?
=оай.м th :;
Е ae Sd ;
о | & ?
4 о. я
и
Ре о [воевали Е
Рис. 6. Автоматический анализатор аминокислот: а японской фирмы: 6 — чехословацкой фирмы.
ка « is ee Mao nedJ1OH Блуайхстоянлой eenтемпературыWee автоматизиров “Aw о ояиство температуры в колонках является абсолютно необходимым условием точности этого метода, тои автоматизация в регулировании температуры колонок также необходима.6 Ma _ элюата.FeO Обычно д етсяi й 950.300является пробокотборка иэлюата.в каждуюПоэтомуизв нихбольшинствеx cueayerследу принятьполуавтоматов,точно покроме2 мл поддержания заданной температуры, автоматизирован также отбортбор элюата при помощи специального устрой-
