По данным зарубежных научных исследований, скрытыми носителями данной мутации являются от 6 до 20 % быков-производителей черно-пестрой породы.
Праймеры для амплификации фрагмента гена SLC35A3:
F: 5´- gCT CTC CTC TgT AAT CCC CA - 3´ R: 5´- CCA CTg gAA AAA CTA gCT gTg AgT A- 3´
ПЦР-программа: 94 °С – 10 мин; 34 цикла: 94 °С – 30 сек, 60 °С – 30 сек, 72 °С – 30 сек; 72 °С – 5 мин.
Длина амплифицированного фрагмента – 225 п.о.
При расщеплении продуктов амплификации рестриктазой RsaI при 37 °С идентифицируются следующие генотипы:
генотип CVMTV/TV – 201,24 п.о. (животные, свободные от мутации) генотип CVMTV/CV – 225 п.о., 201 п.о. и 24 п.о. (животные-носители мутации)
генотип CVMCV/CV – 225 п.о. (животные с рецессивным генотипом)
ДИАГНОСТИКА МУТАЦИИ BC (ДЕФИЦИТ ФЕРМЕНТА АРГИНИНСУКЦИНАТСИНТАЗЫ) ГЕНА ASS
Мутация цитрулинемия (дефицит фермента аргининсукцинатсинтазы (ASS) – аутосомный рецессивный признак, проявляющийся гипераммонимией, вызванной разрывом в цикле синтеза мочевины. Животные, кажущимися здоровыми непосредственно после рождения, на второй день жизни становятся подавленными, плохо едят, в последующие дни их поведение становится неадектватным. Телята, облада-
ющие гомозиготным рецессивным генотипом, не могут выделять аммиак. Между пятым и седьмым днями заболевание быстро прогрессирует. При этом у телят с таким дефектом метаболизма наблюдаются клинические признаки интоксикации организма, а также постепенное ухудшение неврологических симптомов. Гибель животных без соответствующего лечения наступает в возрасте от 1 до 2 недель после рождения.
Впервые мутация была выявлена в популяции голштинского скота Австралии. Ее источником был признан один из голштинских быковпроизводителей – Linmack Kriss King.
Праймеры для амплификации фрагмента гена ASS:
CIT1-F: 5´-ggC CAg ggA CCg TgT TCA TTg Agg ACA TC - 3´ CIT2-R: 5´- TTC CTg ggA CCC CgT gAg ACA CAT ACT Тg - 3´
ПЦР-программа: 94 °С – 5 мин; 35 циклов: 94 °С – 30 сек, 57 °С – 30 сек, 72 °С – 1 мин; 72 °С – 10 мин.
Длина амплифицированного фрагмента – 185 п.о.
При расщеплении продуктов амплификации рестриктазой AvaII при 37 °С идентифицируются следующие генотипы:
генотип BCN/N – 103 и 82 п.о. (животные, свободные от мутации) генотип BCN/B – 185, 103 и 82 п.о. (животные-носители мутации) генотип BCB/B – 185 п.о. (животные с рецессивным генотипом)
ДИАГНОСТИКА МУТАЦИИ BY (СИНДРОМ КОРОТКОЙ СПИНЫ) ГЕНА FANCI
Мутация брахиспина (синдром короткой спины) – впервые выявлена в 2007 году специалистами Голландии, Дании и Бельгии после регистрации рождения мертвых телят с укороченным позвоночником и, соответственно, спинным мозгом.
Сопровождается дополнительными клиническими признаками: снижение веса теленка при рождении до 10 кг, длинные конечности, пороки развития внутренних органов (сердца, почек и половых желез). У маточного поголовья снижается оплодотворяющая способность и повышается частота абортов.
Генеалогический анализ позволил установить, что носителем и распространителем мутации является бык С. Х. Традишн 1682485 линии Вис Айдиал 933122 и его сыновья – Клейтус 1879085 и Ледман 1983348.
В настоящее время около 5 % канадской, 6-8 % американской и голландской голштинской популяции крупного рогатого скота могут иметь в своем генотипе мутацию BY.
Альтернативные праймеры для определения мутации BY:
F1: 5´-gCT CAA gTA gTT AgT TgC TCC ACT g - 3´ R1: 5´- ATA AAT AAA TAA AgC Agg ATg CTg AAA - 3´
F2: 5´-TCA CAA AAg ggT Agg AgA CTA CCA Tg - 3´ R2: 5´- gCT TAT TgT TTA CCC TTg ACA gTg g - 3´
ПЦР-программа: 95 °С – 5 мин; 30 циклов: 94 °С – 1 мин, 60 °С – 1 мин, 73 °С – 1 мин; 73 °С – 5 мин.
Длина амплифицированных фрагментов:
