ИИ
сцветагнилостным (с примесьюзапахом, гноя ирозовато-красного крови). или зеленоватого Свежеполученная неразбавленная сперма жеребцов по органолептическим,гическим показателямфизическим,должна соответствоватьбиологическимтребованиями морфолостандарта ГОСТ-23681-79 (табл.3) у
Таблица 3. Технические условия (ГОСТ-23681-79)
| Наименование показателя | норма |
|---|---|
| Внешний вид | светло-серого цвета, без хлопьев, крови и гноя |
| менее | |
| Подвижность спермиев, баллы, не менее | ; |
| Выживаемость спермиев при 2-5°С 1:3 ЛХЦЖ-срелой: | при разбавлении спермы — |
| $), не менее | 450 |
| выживаемостьв часах, не менее | 150 |
| морфологией, Количество спермиев %, не более © аномальной | 0 |
По концентрации сперму жеребца оценивают следующим образом: густая сперма - от 250 и более млн/мл, средняя - от 100 до 250 млн/мл, редкая - до 100 млн/мл. Редкая сперма для искусственного осеменения непригодна. Определение концентрации сперматозоидов проводят в камерах Горяева, Томмэ и др., применяемых для подсчета форменных элементов крови. Сперму набирают в лейкоцитарный смеситель до деления 0,5. Затем в смеситель набирают 3 % - ный раствор хлористого натрия до отметки 11. Зажимают оба конца смесителя и в течение 2-3 минут переворачивают
его вверх и вниз, смешивая сперму с раствором хлористого натрия. Затем из смесителя выпускают 4-5 капель. Кончик смесителя обтирают салфеткой, после чего наносят каплю на среднюю пластинку камеры. По щелевидным капиллярам сперма | проникаетсетке не было под пв о здушкров н оеых стекло.пузырей. пFiПодсчет ВАЕМаВАНАсперматозоидов eee | ведут при увеличении в 400-600 раз. Камеру устанавливают на столик микроскопа так, чтобы в поле зрения помещался один большой квадрат. Сперматозоиды подсчитывают в пяти больших квадратах, расположенных по диагонали сетки. Кон| центрацию сперматозоидов всех видов сельскохозяйственных животных, выраженную в миллиардах в 1 мл, вычисляют по | упрощенной формуле путем деления числа сперматозоидов, | подсчитанных в 80 малых (пяти больших) квадратах, на 1000. Например, число сперматозоидов жеребца в пяти больших квадратах 176. В этом случае концентрация сперматозоидов составляет 0,176 млрд/мл (или 176 млн/мл).
При отсутствии необходимого оборудования концентрацию спермиев жеребцов можно определить по стандартам, разработанным Всероссийском научно-исследовательским институтом коневодства. Стандарты представляют собой набор запаянных пробирок одинакового диаметра, толщины стенок и прозрачности с жидкостью, имитирующей сперму ребца различной концентрации: 10, 50, 100, 200, 300 и 500 млн спермиевв 1 мл спермы. Определение концентрации спермиев жеребца по стандартам проводят следующим образом: сперму наливают в прилагаемую к стандартам пустую пробирку и сравнивают с двумя пробирками стандарта. Предварительно стандарты встряхивают, чтобы равномерно размешался осадок. Пробирки просматривают на свет, приложив к ним стеклянную палочку, при этом подбирают стандарт, наиболее близкий по мутности к определяемой сперме. Концентрация может быть определена и как промежуточная между двумя стандартами, например 75 млн (между 50 и 100 млн) и так далее.
Оценку подвижности спермы проводят с помощью микроскопии при температуре 38-40°C, используя специальный обогревательный столик (столик Морозова). Для этого на подогретое предметное стекло наносят стерильной палочкой или пипеткой каплю спермы, накрывают ее чистым покровным стеклом и просматривают под микроскопом при увеличении в 200-300 раз и неярком освещении. При нагревании сперматозоиды начинают двигаться не сразу, поэтому для объективной оценки качества спермы ее надо наблюдать иногда до 1-2 мин, пока сперматозоиды проявят наибольшую подвижность. При этом следует брать большую каплю спермы, так как при 3840°С малые капли быстро высыхают, отчего сперматозоиды погибают.
Подвижность сперматозоидов оценивают по десятибалльной шкале. В поле зрения микроскопа глазомерно определяют количество сперматозоидов с активным прямолинейнопоступательным движением в процентах к общему числу перматозоидов. Высшую оценку 10 баллов получает сперма, в которой все 100 % сперматозоидов имеют прямолинейнопоступательное движение, 9 баллов - примерно 90 %, 7 баллов - 70 % сперматозоидов и т.д. Полное отсутствие сперматозоидов в поле зрения обозначается буквой А (азоспермия). Если в поле зрения все сперматозоиды находятся без движения, то такое состояние обозначается буквой Н (некроспермия).
Важным условием в оценке качества спермы является ее переживаемость вне организма. Этот показатель определяют следующим образом: после оценки подвижности спермы под микроскопом в две стерильные пробирки (пенициллиновые флаконы) емкостью 20 мл наливают по 1 мл свежевзятой спермы, в каждую из которых добавляют по 3 мл ЛХЦЖ-среды. Coстав этой среды приведен ниже. Параллельное исследование (в двух пробирках) ведут для получения результатов большей точности. Пробирки закрывают пробками и переносят для хранения в холодильник или термос со льдом (температура 2-4°С).
