другими бластомерами, а также в асимметричном расположении внутриклеточных компонентов.
Плоскость следующего деления ориентирована так, чтобы использовать эту асимметрию для создания двух различных потомков поляризованного бластомера - полярной клетки, которая располагается снаружи морулы, и аполярной, расположенной внутри нее. Так, клетки компактизированного зародыша делятся и образуют 16- и 32-клеточную морулу. После компактизации тесная упаковка бластомеров стабилизируется более совершенными межклеточными контактами: внутри морулы, между клетками, возникают щелевые контакты, а на поверхности морулы образуются плотные контакты, что приводит к изоляции внутренних клеток морулы.
Во время 6-го - 7-го делений дробления морула преобразуется в бластоцисту (зародышевый пузырек). Стадия бластоцисты играет важную роль, так как при преобразовании морулы в бластоцисту происходит первый процесс дифференцировки. Большая часть потомков наружных клеток морулы становится клетками трофобласта. Эта группа клеток не образует эмбриональных структур, а превращается в хорион, участвующий в образовании плаценты. Ткани плаценты обеспечивают получение плодом кислорода и питательных веществ от матери; секретируют гормоны, необходимые для вынашивания плода; синтезируют регуляторы иммунного ответа, благодаря которым мать не отторгает зародыш. Однако клетки трофобласта не способны образовать ни одной клетки самого зародыша. Они необходимы для имплантации зародыша в стенку матки.
Внутренние (аполярные) клетки 16-клеточной морулы, к которым иногда добавляются и наружные (при переходе к 32клеточной стадии) образуют эмбриобласт - внутреннюю клеточную массу. Клетки эмбриобласта предназначены для развития зародыша и для индукции процессов, необходимых для полноценной имплантации и плацентации. Внутренняя клеточная масса, вместе с трофобластом, также участвует в формировании зародышевых оболочек.
Установлено, что бластомеры, которые на 2-клеточной стадии делятся первыми, с большей вероятностью оказываются среди внутренних клеток морулы, а значит и среди клеток эм-
бриобласта. Следовательно, они имеют большую вероятность попасть в состав тела зародыша.
Морула представляет собой шаровидное скопление бластомеров, лишенное полости, а бластоциста - пузырек, состоящий из стенки (трофобласт), полости с жидкостью (бластоцель) и скопления клеток эмбриобласта на одном из полюсов внутренней поверхности трофобласта.
Процесс образования полости, то есть образования бластоцисты, называется кавитацией . Накопление жидкости в зародыше требует затрат энергии и зависит от активного переноса ионов Nа во внутренние межклеточные пространства. В плазматических мембранах клеток трофобласта имеется калийнатриевый насос, который переносит ионы Na внутрь зародыша, при этом осмотическое давление повышается и сюда начинает поступать жидкость. Накапливаясь между бластомерами, жидкость отодвигает бластомеры к одному из полюсов трофобласта, здесь из них формируется эмбриобласт. Плотные контакты, которыми соединяются клетки трофобласта помогают удержать жидкость в полости.
Чем больше бластополость и лучше развита внутренняя клеточная масса и трофобласт – тем больше потенциал эмбриона к имплантации. Когда полость бластоцисты достигает значительного размера, источившаяся за счет растяжения зона пеллюцида разрывается и начинается процесс хэтчинга , т.е. выхода бластоцисты из зоны пеллюцида. Только после окончания этого процесса бластоциста способна имплантироваться в эндометрий матки.
1.6 ТОТИПОТЕНТНОСТЬ
Зигота содержит полный набор генов и всю генетическую информацию данного вида, породы и особи.
Тотипотентность – это сдобность клетки к формированию любой ткани, вплоть до развития из неё нормальной особи.
Клетки (бластомеры) ранних эмбрионов (вплоть до 8- клеточной стадии) идентичны и вплоть до 8-клеточной стадии зародыш обладает поразительной способностью к регуляции развития, то есть из каждого отдельного бластомера может образоваться полноценное животное. Это означает, что бластомеры способны заменять друг друга, что дает возможность возникновения эмбриона из одного бластомера. Деградированные бластомеры заменяются хорошими, на всех стадиях развития, до наступления процесса компактизации. Также, из поделенных пополам морул и бластоцист, половинки которых содержат клетки эмбрио- и трофобласта, можно получить полноценный эмбрион.
Возникновение однояйцевых близнецов – это естественное свойство тотипотентности. Использование этого свойства дает возможность получать идентичных близнецов.
1.7 ВРЕМЕННЫЕ ПАРАМЕТРЫ РАЗВИТИЯ ЭМБРИОНОВ
Овуляция у нормально циклирующих коров происходит через 30-32 ч после начала течки. Оплодотворение ооцита полноценным спермием наступает уже через 3-4 ч после овуляции. Слияние пронуклеусов происходит через 15 ч. после оплодотворения. Оплодотворенные in vitro яйцеклетки коров достигают 2, 4 и 8-клеточной фазы в период между 15-24 ч, 35-40 ч и через 45-50 ч после оплодотворения. Ранние и поздние морулы, а также ранние бластоцисты появляются через 120 часов. Через 8 суток в среде обнаруживаются поздние и экспандированные бластоцисты, через 264 часа (11 суток) – вышедшие из зоны пеллюцида.
