Использование простагландинов для направленной регуляции и коррекции нарушений функции размножения крупного рогатого скота

ГЛАВА VII. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОСТАГЛАНДИНОВ ДЛЯ СИНХНОНИЗАЦИИ ОХОТЫ, ОВУЛЯЦИИ И КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ ТЕЛОК И КОРОВ

ГЛАВА VII. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОСТАГЛАНДИНОВ ДЛЯ СИНХНОНИЗАЦИИ ОХОТЫ, ОВУЛЯЦИИ И КОРРЕКЦИИ НАРУШЕНИЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ ФУНКЦИИ ТЕЛОК И КОРОВ

7.1. Материал и методы исследований

С целью разработки методов использования простагландинов для направленной регуляции и коррекции нарушений функции размножения крупного рогатого скота нами были проведены исследования.

Исследования проводили на комплексе «Кутьино» по направленному выращиванию нетелей опытного хозяйства «Щапово» Всероссийского научно-исследовательского института животноводства и в республике Башкортостан. Опытное хозяйство «Щапово» Подольского района Московской области организовано в 1962 году на базе мелких хозяйств. Содержание телок на комплексе «Кутьино» беспривязное, кормление групповое. Корма подаются ленточным транспортером. Концентрированные корма раздаются в смеси с сочными.

В зимне-стойловый период рацион телок случного возраста состоял из 11 кг силоса, 6 кг сенажа, 5 кг сена, 2,5 кг комбикорма, 0,3 л патоки, 60 г соли и 60 г меда.

В летний период вместо грубых и сочных кормов в рацион включали 35 кг зеленой массы.

Исследования в РБ проводили в агрофирмах «Мормылево» Уфимского района, ГУСП «Тавакан» Кургачинского района, агрофирме «Родина» Гафурийского района и ОПХ «Баймакское» Баймакского района.

В первых трех предприятиях содержат коров симментальской породы отечественной селекции, в ОПХ «Баймакское» – зарубежной и отечественной.

Крупный рогатый скот размещен в хорошо оборудованных помещениях с полной механизацией трудоемких процессов. Тип содержания животных привязной.

Комплексы работают по технологии ВГНИИЖа – щелевые полы, подпольное хранение навоза, доение в доильном зале на установке «Тандем», ленточная раздача кормов, приготовленных в кормоцехах в виде мешанок, отёлы в родильных отделениях.

В период лактации животные во всех хозяйст­вах пользовались моционом на выгульных площадках. В сухостойный период животные прогулками и активным моционом были обеспечены.

Кормление животных осуществляли по общепринятым нормам. Корма подвергали химическому анализу для определения содержания перечня необходимых питательных веществ, их количества, соотношений и пригодности к скармливанию.

Таблица 1

Биохимические показатели крови

* - Р<0,05;

** - Р<0,01

Биохимическими исследованиями крови установлено, что показатели содержания каротина, общего белка, неорганического фосфора, сахара и щелочного резерва не выходят за пределы нижних, а кальция и кетоновых тел верхних границ физиологической нормы (табл.1).

Обеспеченность по общей питательной ценности колебалась в пределах 98,4 – 102,1%, кальцию – 100,0 – 119,9%, фосфору – 98,6 – 103,4%, сахару – 98,3 – 101,9%, каротину – 97,8 – 100,0%. Соотношение кальция к фосфору находилось в пределах 1,5 : 2,1, а сахара и протеина – 0,7 : 0,9.

Анализ приводимых данных аргументировал правомочность проведения научно-исследовательских работ в этих хозяйствах.

Для исследования были использованы телки черно-пестрой породы предслучного (14-16 мес.) и случного (16-18 мес.) возраста и коровы симментальской породы с продуктивностью от 3,5 до 5,6 тыс. кг молока за лактацию (рис. 1-2).

Для опытов отбирали клинически здоровых животных – аналогов по возрасту и массе тела.

Размер групп для лабораторных опытов составлял 3-14, для научно-производственных – 20-47 голов.

Учитывали следующие показатели: сроки формирования групп, дату гормональной обработки, синхронность прихода в охоту, количество перегулов и даты осеменений, а также оплодотворяемость от осеменения в первый и второй цикл, число абортировавших животных, продолжительность стельности, количество бычков и телочек в потомстве и число мертворождений.

Все поголовье, сосредоточенное на комплексах, мечено ушными выщипали, полиэтиленовыми бирками и ошейниками с номерами.

Все сведения о подопытных животных заносили в специальный журнал. Учет велся индивидуально по каждому животному.

Телок в охоте выбирали с 6 до 9 и с 15 до 18 часов на выгульных площадках визуальными наблюдениями.

Основным признаком охоты считали рефлекс неподвижности и состояние наружных половых органов. Течку определяли по выделению слизи из половых органов.

Первое осеменение проводили непосредственно после выборки телок в охоте. Перед осеменением и гормональным воздействием ректально обследовали состояние половых органов у телок.

При описании пользовались следующими символами:

- матка (в норме, ригидная, атоничная, слаборазвитая);

- ф – фолликулы, хорошо пальпируемые;

- жт₁ – желтое тело мягкое, в стадии образования (1-го – 6-й дни цикла);

- жт₂ – желтое тело отчетливо выступает над поверхностью яичника, имеет твердоэластичную консистенцию, в стадии максимального развития (7-го – 14 дни цикла);

- жт₃ – желтое тело хорошо пальпируемое, консистенция дряблая, в стадии регрессии (15 – 18-й дни цикла);

- ст. жт. – желтое тело предыдущего полового цикла, слабо прощупываемое.

Осеменяли телок в пункте искусственного осеменения, ректоцервикальным методом.

Сперму получали с Центральной станции искусственного осеменения, с содержанием 50-75% млн спермиев в дозе.

Осеменение телок двукратное с интервалом 10-12 часов.

После осеменения телок выдерживали на пункте 10-12 часов, затем перегоняли в секции накопители, где за ними вели наблюдение.

О произошедшей овуляции при ректальном обследовании судили по наличию овуляционной ямки на месте лопнувшего фолликула, а также по наличию желтых тел через 7-10 дней после осеменения.

Через 45-60 дней телок, не пришедших в охоту после осеменения, ректально обследовали на наличие стельности.

В опытах использовали следующие простагландины и их аналоги:

1. Эстрофан – синтетический аналог простагландина F_2α. Выпускался фармацевтическим объединением «СПОФА» ЧССР в виде бесцветного раствора в ампулах по 2 мл. Содержит 0,25 мг клопростенола (натриевая соль) в 1 мл раствора.

Введение вызывает рассасывание желтых тел. Применяется для синхронизации опоросов у свиноматок, а также при функциональных нарушениях яичников («тихая охота», персистирующие желтые тела, лютеальные кисты), при эндометритах у крупного рогатого скота.

Препарат инъецируется внутримышечно.

Допростон-В-11 – дезоксипростагландин Е1 – синтезирован под руководством доктора химических наук Я.Ф. Фрейманиса в лаборатории простагландинов института органического синтеза АН Латвийской ССР.

Препарат выпускается в ампулах по 5 мл, в 1 мл содержится 5 мг активного вещества в фосфатном буфере, рН раствора 8±0,2. Температура хранения 4⁰С.

Препарат инъецируют внутримышечно.

1. Энзапрост – синтетический простагландин F_2α фирмы «Хиноин» Венгерской Народной Республики. Молекулярная масса – 354,5, эмпирическая формула – С₂₀Н₃₄О₅. Хорошо растворим в спиртах, эфире, тетрагидрофуране, в 0,3 М растворе ацетата натрия, плохо – в воде. Препарат выпускают в ампулах по 5 мл, в водном растворе, содержащем в 1 мл 4,0 мг действующего вещества, 40,8 мг ацетата натрия и 0,1 мл фенола, рН раствора 5,5-6,5.

Энзапрост рекомендуют для вызывания регрессии желтого тела, терапии субинволюции матки у коров и кобыл, вызывания родов у свиней и собак. Препарат инъецируют внутримышечно.

1. Простагландин F_2α отечественного производства – выпускался опытным заводом органического синтеза и биопрепаратов Института химии АН Эстонской ССР в виде соли трис-оксиметил-аминометана. Молекулярная масса 475,6. Температура плавления – 98-99⁰С, выдерживает длительное хранения при 1-4⁰С. Препарат выпускается в ампулах по 5 мл в виде бесцветного водного раствора с добавлением в качестве консерванта 0,9% бензилового спирта, рН раствора 8,0. В ампуле содержится 25 мг ПГF_2α.

Препарат инъецируют внутримышечно.

1. Лютализ-простин F_2α (динопрост) – препарат простагландина F_2α в форме кристаллической соли ТНАМ (трометамин) фирмы Апджон США. Молекулярный вес – 457,60. Белый кристаллической порошок, растворимый в воде при комнатной температуре до концентрации 200 мг/мл.

Выпускается в форме стерильного водного раствора 6 мг/мл, содержащего 0,9% бензилового спирта в качестве консерванта.

Раствор хранится 6 месяцев при комнатной температуре.

1. Анипрост – синтетический аналог ПГF_2α, синтезирован в 1984 году в ВНПО «Витамины». В отличие от зарубежных аналогов данный препарат содержит только l-изомеры.

Выпускается в ампулах по 2 мл в виде бесцветного водного раствора, в 1 мл содержится 125 мкг действующего начала.

1. Эстуфалат – синтетический аналог простагландина F_2α. Синтезирован в 1985 году институтами Химии Академии наук Эстонской ССР, Органической химии АН Латвийской ССР и Химии Башкирского филиала АН СССР.

Препарат выпускается в ампулах по 2 мл в виде бесцветного водного раствора, в 1 мл содержится 250 мкг действующего начала.

Лабораторные исследования

В лабораторных опытах в сыворотке крови радиоиммуно-логическим методом определяли содержание прогестерона.

Динамика прогестерона изучалась для определения оптимальной дозы анипроста и для сравнения эффективности использования анипроста и других аналогов ПГF_2α.

Содержание прогестерона в плазме крови определяли в отделе эндокринологии сельскохозяйственных животных Всероссийского научно-исследовательского института животноводства.

В этих опытах пробы крови у телок брали с 8 по 12 день полового цикла, перед введением препаратов, а также через 24, 48 и 72 часа после инъекции. В каждом опыте было по 4-9 групп в каждой группе от 3 до 14 телок.

Часть животных была обработана дважды, в первый и во второй цикл. Нами были проведены опыты по изучению гормональной активности желтого тела и дальнейшей воспроизводительной способности телок после многократной обработки простагландинами.

Схемы отдельных опытов и условия их проведения приведены при описании их результатов.

Радиоиммунологический анализ

Изучение гормональных взаимоотношений и роли отдельных гормонов в регуляции репродуктивной функции требует количест-венной оценки гормонов в тканях и биологических жидкостях.

Первые (биологические) методы определения содержания гормонов основывались на увеличении массы или на изменениях в тканях и органах лабораторных животных.

Эти методы очень трудоемки, недостаточно специфичны и недостаточно чувствительны.

На смену биологическим методам пришли методы связывания.

В них определение количества гормона производилось на постепенном насыщении специфического связывающего агента гормоном и последующем измерении его распределения между «свободной» и «связанной» фазами.

Одним из таких методов является радиоиммунологический.

Радиоиммунологический метод впервые был предложен для определения эндогенного инсулина в плазме крови человека.

Главное отличие радиоиммунологического метода от биологического состоит в том, что о количестве анализируемого вещества судят, не по его биологической (функциональной) активности, а по количеству комплекса, образовавшегося при взаимодействии этого вещества с так называемым агентом.

К преимуществам радиоиммунологического метода определения гормонов относятся: высокая чувствительность (до 10^-9-10^-12 г/мл гормона), специфичность, надежность, точность, простота и высокая производительность, он позволяет определить содержание в биологических жидкостях не только гормонов, но и ферментов, рецепторных белков и ряда лекарственных веществ.

В радиоиммунологическом методе используется комбинация двух веществ, одно из которых называют связывающим агентом, а другое (количество которого измеряют) – лигандом [122]. Радиоиммунологический метод основан на законе действия масс, в соответствии с которым определяемое вещество будет конкури-ровать со своим меченым аналогом (антигеном) за ограниченное число связывающих мест до достижения химического равновесия всех компонентов реакционной смеси [114].

В каждую пробирку с исследуемым образцом добавляют одинаковое количество антител и меченого гормона.

Чем больше определяемого гормона в образце, тем большее количество антител будет связано с немеченым гормоном и тем меньше будет радиоактивность комплекса гормон-антитело.

Сравнивая радиоактивность комплекса гормон-антитело и радиоактивность его в серии пробирок с известными стандартными разведениями определенного гормона можно судить о количестве гормона в исследуемом образце.

В своих исследованиях мы пользовались готовыми наборами реактивов для радиоиммунологического определения прогестерона в сыворотке крови человека «СТЕРОН-П¹²⁵I», которых выпускал институт биоорганической химии АН Белорусской ССР [106].

В набор «СТЕРОН-П¹²⁵I» входят:

1. Йод-125-прогестерон, 100 кбк (килобеккерель);
2. – 6 калибровочных проб сыворотки крови, с концентрацией прогестерона от 0 до 100 нмоль/л;
3. – концентрированный буферный раствор, рН 3,8, 10 мл;
4. – антисыворотка к прогестерону;
5. – суспензия активированного угля, покрытого декстраном,

10 мл.

Реактивы поставляются в лиофилизированном виде (кроме активированного угля). Набор рассчитан на проведение анализа 43 неизвестных и 6 калибровочных проб в дубликатах.

Анализ состоял из следующих этапов:

а) во флаконы с меченым прогестероном и антисывороткой добавляли по 11 мл буферного раствора, каждый флакон с извест-ной концентрацией прогестерона – по 1 мл, а на каждую 0,1 мл пробу анализируемой сыворотки по 0,5 мл тщательно перемешивали;

б) после переноса активированного угля в стакан емкостью 100 мл и добавления 50 мл дистиллированной воды, помещали его на магнитную мешалку, а в чистые пробирки, обозначенные № 1-16, разливали по 0,1 мл прогестерона с известной концентрацией;

в) внесли по 0,1 мл раствора, разбавленного буфером пробы анализируемой сыворотки, в аналитические пробирки, обозначенные № 17-102, затем во все пробирки разлили по 0,1 мл антисыворотки, все пробирки встряхнули на вихревом смесителе;

г) после добавления 0,1 мл меченого прогестерона и тщатель-ного перемешивания проводили 2-х часовую инкубацию при комнатной температуре и 15-минутную в ледяной бане при 0-4⁰С;

д) в каждую пробирку приливали по 0,5 мл раствора активированного угля и выдерживали 10 минут в ледяной бане периодически перемешивая;

е) все пробирки центрифугировали при ускорении 1500-2000 об/мин в течение 10 минут, после чего с каждой пробирки отобрали по 0,5 мл над осадочной жидкости и переносили в пробирки для счета.

Всех пробирок поместили в гамма-счетчик РИА-300 американской фирмы «Тракор Аналитик». Гамма счетчик имеет цифровой калькулятор и телетайп.

Радиоактивность, выраженная в импульсах в минуту, набиралась цифровым калькулятором против соответствующей концентрации прогестерона и по полученным точкам строилась калибровочная кривая.

Путем сравнения со стандартом и с калибровочной кривой счет каждого образца преобразуется в концентрацию гормона в миллилитре.

7.2. Результаты собственных исследований

7.2.1. Определение эффективной дозы отечественного аналога ПГF_2α - анипроста

Перевод животноводства на промышленную основу требует применения прогрессивных методов разведения.

Возникает необходимость подчинить репродуктивные процессы коров и телок технологическим циклам производства, календарного регламентирования прихода в охоту, овуляции и оплодотворения для ритмизации последующих производственных циклов – запуска, отела, выращивания молодняка и др.

В последние годы для направленной регуляции репродуктивной функции самок сельскохозяйственных животных практическое применение нашли ПГF_2α и его синтетические аналоги, которые вызывают быстрый лизис желтого тела с последующей овуляцией.

В 1984 году ВНПО «Витамины» синтезировало новый препарат простагландина – анипрост. В отличие от зарубежных аналогов данный препарат содержит только α – изомеры.

Целью наших опытов в разделе 7.2.1. было испытание данного препарата в лабораторных и научно-производственных опытах на телках предслучного и случного возраста, основной задачей было определение эффективной дозы анипроста.

Продолжение · 12

7.2.1.1. Оценка лютеолитической активности различных доз анипроста в сравнении с другими препаратами простагландина

Для опыта были сформированы 9 групп телок по 3 головы в каждой группе. На 9-10 день полового цикла животным вводили различные препараты простагландина в разных дозах.

Кровь для анализа на прогестерон у телок брали перед и через 24, 48 и 72 часа после введения простагландинов.

Контрольным животным инъецировали физраствор.

По скорости снижения концентрации прогестерона судили о лютеолитической активности препаратов. Результаты опыта представлены в таблице 1 и на рисунках 3 и 4.

Через 24-72 часа после введения препаратов происходило снижение уровня прогестерона в крови телок. Наблюдалась прямая связь между дозой препарата и скоростью снижения концентрации прогестерона в крови [8].

В этой связи интересно проследить динамику снижения концентрации прогестерона в крови при использовании анипроста в различных дозах (табл. 2).

Увеличение дозировки анипроста с 50 до 240 мкг ускорило снижение концентрации прогестерона в крови у телок в течение суток с 59,9 до 85,3%.

У телок I-III групп (табл. 1) увеличение концентрации прогестерона через 48 и 72 часа после инъекции (в сравнении с концентрацией через 24 часа), по-видимому, связано с недостаточностью дозировок для вызывания полного лютеолиза.

Таблица 1

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок после введения различных простагландинов

х – Р <0,05; хх – Р <0,01

Отмечены некоторые особенности снижения концентрации прогестерона под действием эстрофана и анипроста в дозе 240 мкг. Концентрация прогестерона в крови под действием эстрофана и анипроста через 24 часа понизилась на 55,1 и 85,4%, через 48 – 70,7 и 92,7%, через 72 – 71,1 и 99,0% от исходного уровня соответственно.

Через 24, 48 и 72 часа после инъекции полного аналога нативного ПГF_2α, концентрация прогестерона понизилась на 55,2; 52,8 и 55,8% соответственно.

Таблица 2

Характер снижения концентрации прогестерона в сыворотке крови телок через 24 часа после инъекции анипроста в разных дозах

Инъекция допростона-В телкам не вызывала значительных изменений содержания прогестерона в крови.

На основании проведенных радиоиммунологических исследо-ваний нами установлена высокая лютеолитическая активность анипроста.

7.2.1.2. Синхронизирующий эффект различных препаратов

простагландинов

Для более полной оценки биологических свойств отдельных простагландинов нами были проведены исследования на циклирующих телках случного возраста.

Для исследований были сформированы 10 групп по 5-6 телок.

На 9-10 день полового цикла телкам инъецировали испытуемые препараты в разных дозах, и в течение 5 дней проводили выборку в охоте. У животных, пришедших в синхронизированную охоту, учитывали продолжительность полового цикла.

Результаты опыта приведены в таблице 3 и на рисунке 5.

Рис. 5. Приход в охоту телок после введения различных простагландинов

Проведенные исследования показали, что допростон-В не обладает

Таблица 3

Приход телок в охоту после введения различных препаратов простагландинов

синхронизирующим эффектом, даже при увеличении дозы в два раза.

Внутримышечное введение телкам ПГF_2α Латвийского производства сихронизировала охоту у 50-60% животных.

При инъекции смеси допростона-В и ПГF_2α телкам, синхронность прихода в охоту была очень низкой.

Так инъекция смеси допростона-В и ПГF_2α телкам синхронизировала охоту лишь у 16,7% животных.

Высокая синхронность по приходу в охоту (80,0-83,4%) получена при использовании анипроста.

Повышение дозы анипроста ускоряет наступление охоты у телок: при дозах 100 и 140 мкг пик охоты приходится на 96-120 часов, а при дозах 200 и 240 мкг – 48-72 часа.

7.2.1.3. Испытание различных препаратов простагландинов по скорости снижения уровня прогестерона в сыворотке крови у телок

Для подтверждения полученных в предыдущих опытах данных были проведены дополнительные исследования.

За подопытными телками вели наблюдение в течение двух половых циклов, что позволило точно определить продолжительность полового цикла каждого из них.

Было сформировано 4 группы по 8 телок, каждая группа была разделена на подгруппы «а» и «б».

На 9 день полового цикла и повторно через 11 дней телкам подгрупп «а» вводили различные препараты простагландинов, кровь брали перед и через 24, 48 и 72 часа после инъекции, телкам подгруппы «б» препараты вводили, начиная со второго цикла.

У животных контрольной группы кровь брали на 9 день и повторно в середине следующего полового цикла.

Результаты опыта представлены в таблицах 4 и 5 и на рисунках 6-8.

Таблица 4

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок после введения различных простагландинов

х – Р <0,05; хх – Р <0,01

Концентрация прогестерона в сыворотке крови телок контрольной группы в течение опытного периода существенно не изменялась. Инъекция анипроста телкам в первый цикл вызвала более резкое снижение концентрации прогестерона в крови через 24, 48 и 72 часа на 78, 93 и 97%, чем инъекция эстрофана на 64, 66 и 75% соответственно.

При повторной инъекции, через 24 часа анипрост вызывал более резкое снижение концентрации прогестерона, чем эстрофан, однако через 48 и 72 часа скорость снижения содержания прогестерона у телок, обработанных анипростом, была ниже, чем эстрофаном.

Так, если через 48 и 72 часа после инъекции эстрофана в крови у телок выявлены лишь следы прогестерона, то после введения анипроста остаточный уровень прогестерона у телок составил 15,6 и 11,0% соответственно.

Рис. 7. Уровень прогестерона в сыворотке крови телок в нг/мл после введения различных простагландинов (II-й цикл)

Инъекция допростона-В не влияла на содержание прогестерона в крови телок.

Во второй цикл у некоторых животных уменьшалось содержание прогестерона, у других увеличивалось.

В лютеальную фазу индуцированного цикла, содержание прогестерона в крови телок, обработанных эстрофаном и анипростом, было выше на 30 и 45% соответственно, по сравнению с контролем.

Пик прихода телок в синхронизированную внутримышечным введением эстрофана и анипроста охоту приходился на 48 часов и составил 66,7 и 75,0% соответственно.

Таблица 5

Приход телок в охоту после введения различных препаратов простагландинов

Синхронность прихода в охоту телок после инъекции эстрофана и анипроста составила по 91,7%.

Средняя продолжительность полового цикла телок сихронизи-рованных введением эстрофана и анипроста составила по 11,3 дня.

После введения допростона-В телки признаков синхронизированной охоты не проявили.

Разницы по синхронности прихода в охоту и продолжительности полового цикла у телок, обработанных эстрофаном и анипростом, не обнаружено (табл. 5).

Результаты исследований подтвердили высокую лютеолитическую активность анипроста в дозе 250 мкг.

• • • 1. Сравнительная оценка лютеолитической активности

анипроста и аналогов ПГF_2α зарубежного производства

Для сравнительной оценки лютеолитической активности анипроста с препаратами ПГF_2α зарубежного производства в рекомендуемых дозах был проведен следующий опыт.

Были отобраны 4 группы по 3 телки в каждой. На 9-10 день полового цикла телкам вводили различные препараты простагландинов, и брали пробы крови перед и через 12, 24, 48 и 72 часа после инъекции.

У телок контрольной группы кровь брали в те же сроки.

В образцах крови радиоиммунологическим методом определяли содержание прогестерона (табл. 6 и рис. 5).

Все использованные аналоги ПГF_2α вызывали снижение концентрации прогестерона в сыворотке крови телок через 12-78 часов (табл. 6 и рис. 9).

Таблица 6

Динамика прогестерона в сыворотке крови телок после обработки различными препаратами простагландина F_2α

Продолжение · 13

Уровень прогестерона в сыворотке крови контрольных телок незначительно вырос за период опыта. Наиболее резкое снижение концентрации прогестерона в крови телок через 12 часов после инъекции вызывали лютализ и анипрост – на 62 и 61% соответственно.

Из использованных препаратов простагландинов наиболее

высокой скоростью снижения прогестерона через 24, 48 и 72 часа обладал лютализ (69,7; 81,6 и 80,9% соответственно).

Концентрация прогестерона у телок инъецированных

анипростом снизилась через 24, 48 и 72 часа на 61,7; 69,6 и 74,6%

соответственно.

7.2.1.5. Испытание различных доз анипроста для синхронизации охоты и овуляции у телок

После определения оптимальных доз анипроста в предварительных опытах, нами были проведены научно-производственные испытания эффективных доз анипроста.

Для опытов отбирали телок с хорошо пальпируемыми желтыми телами в яичниках.

Телок, не пришедших в охоту в течение 5 дней после первой инъекции, через 11 дней обрабатывали повторно.

В контрольную группу вошли телки в течение опытного периода

пришедшие в спонтанную охоту.

Стельность учитывали за два половых цикла. Первый опыт по сравнительному испытанию анипроста в дозе 240 мкг и эстрофана в дозе 500 мкг был проведен в мае на трех группах по 20 телок в каждой (табл. 7 и рис. 10).

Инъекция эстрофана и анипроста синхронизировала охоту у 90 и 95% телок соответственно.

Пик прихода в охоту телок после внутримышечного введения эстрофана и анипроста приходился 3 день и составил 50,0 и 60,0% соответственно.

После двух инъекций эстрофана и анипроста проявили признаки охоты все опытные телки.

Оплодотворяемость от осеменения в первый и за два цикла была выше у телок II-й и III-й групп соответственно на 5,0; 20,0% и 10,0; 10,0%, чем I-й.

Процент стельных телок в контрольной группе за первое и повторное осеменение составил 55,0 и 65,0% соответственно.

Во втором опыте дозу анипроста снизили до 200 мкг.

Опыт проведен в августе (табл. 8 и рис. 10). Приход в охоту после первой и за две инъекции составил 67,5 и 95,0% соответственно.

Рис. 10. Приход в охоту телок после инъекции различных простагландинов

Наличие большого разброса процента прихода в охоту телок после введения 200 мкг анипроста, вероятно, свидетельствует о недостаточной дозе препарата.

Таблица 7

Синхронизация охоты и овуляции у телок эстрофаном и анипростом

Таблица 8

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после инъекции анипроста

Оплодотворилось от первого осеменения и за два цикла 47,4 и 57,9% (в контроле – 45,0 и 50%) соответственно.

Таким образом, в опытах на большом поголовье телок было под-тверждено, что оптимальной дозой анипроста является 240-250 мкг.

7.2.2. Использование простагландинов для повышения оплодотворяемости у телок

7.2.2.1. Применение анипроста для синхронизации охоты и овуляции у телок

После определения оптимальной дозы анипроста нами были проведены научно-производственные опыты, по синхронизации охоты и овуляции у телок.

У телок имелись желтые тела на разных стадиях развития (образования, расцвета, регрессии), у некоторых – фолликулы, у части – гипофункция яичников.

Телок, не пришедших в охоту после 1-ой обработки, обрабатывали повторно через 11 дней.

Осеменяли телок в индуцированную охоту.

Таблица 9

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после введения анипроста

В контрольную группу вошли телки, пришедшие в спонтанную охоту в течение опытного периода.

Первый опыт был проведен в марте.

Результаты синхронизации охоты и овуляции у телок анипростом представлены в таблице 9.

Приход телок в охоту после первой и за две инъекции составил 83,3 и 100,0% соответственно.

В контрольной группе оплодотворилось от первого осеменения 50,0% телок, а за два цикла 60,0%.

Оплодотворяемость телок опытной группы была выше, от осеменения в первый цикл на 13.3% и за два цикла на 6,7% по сравнению с контролем.

Следующий опыт по синхронизации охоты и овуляции телок анипростом был проведен в мае.

Для опыта были сформированы две группы по 30 телок.

После ректального обследования телкам опытной группы вводили по 250 мкг анипроста (табл. 10).

Таблица 10

Приход в охоту и оплодотворяемость телок после обработки анипростом

В течение опытного периода пришли в охоту после первой обработки – 86,7%, после двух – 100,0% телок.

Оплодотворяемость в опытной группе от первого осеменения и за два цикла составила 63,3 и 76,7%, в контроле – 60,0 и 70,0% соответственно.

Таким образом, однократная обработка анипростом синхронизировала охоту у 83,3-86,7% телок.

Оплодотворяемость от первого осеменения телок выше в первом опыте на 6,0%, во втором – 1,5%, чем в контроле.

За два цикла оплодотворилось телок в первом и во втором опыте по 76,7%, против контроля – по 70,0%.

7.2.2.2. Изучение влияния многократных инъекций анипроста и эстрофана на дальнейшую воспроизводительную функцию у телок

Функция размножения направленная на сохранение и развитие вида является одной из важнейших в животном организме.

Лишь при стабильном воспроизводстве скота возможно обеспечение эффективности отрасли и удовлетворение потребностей населения в продуктах питания и промышленности в сырье.

В настоящее время широкое использование для направленной регуляции функции размножения и устранения патологий органов репродуктивной системы животных нашли синтетические аналоги простагландина F₂α [58; 96].

Хотя литературные данные о степени их эффективности и целесообразности применения противоречивы [62].

Вероятно, это связанно с возможностью негативных последствий вследствие вмешательства в гомеостаз животного.

Этот вопрос недостаточно изучен, однако, по мнению многих исследователей необоснованно частое использование гормональных препаратов способствует к угнетению функции гипофиза и половых органов, участвующих в выработке гормонов полового цикла.

Считают, что активность эндокринных желез снижается вследствие экзогенного введения аналогов производимых ими гормонов.

Однако есть мнение о том, что аналоги простагландинов безвредны и не обладают побочным действием [62; 41].

С целью изучения влияния многократных введений телкам аналогов простагландина F₂α на дальнейшую их воспроизводительную функцию нами были проведены исследования.

Местом проведения исследований был комплекс по выращиванию нетелей «Кутьино» (бывшего ОПХ «ВИЖа агрофирмы «Щапово») Подольского района Московской области. Для исследований были использованы 30 клинически здоровых телок голштинизированной черно-пестрой породы, которые по принципу аналогов по возрасту (14 месяцев) и весу (300-310 кг) были разделены на три группы по 10 голов в каждой.

Телки опытных групп имели хорошо пальпируемые желтые тела в яичниках, а контрольной были на разных стадиях полового цикла.

Телкам первой опытной группы вводили по 500 мкг эстрофана, а второй опытной – по 250 мкг анипроста.

Таблица 11